| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-26页 |
| 1.1 海藻糖的简介 | 第16-18页 |
| 1.1.1 海藻糖的理化性质 | 第16页 |
| 1.1.2 海藻糖的生物合成 | 第16-17页 |
| 1.1.3 海藻糖的生物学功能 | 第17-18页 |
| 1.1.4 海藻糖的工业生产和实际应用 | 第18页 |
| 1.2 海藻糖合酶的简介 | 第18-20页 |
| 1.2.1 海藻糖合酶性质、来源和作用 | 第18-19页 |
| 1.2.2 海藻糖合酶的作用机制 | 第19-20页 |
| 1.3 酶的固定化 | 第20-24页 |
| 1.3.1 酶催化的优缺点 | 第20页 |
| 1.3.2 酶固定化的目的及意义 | 第20页 |
| 1.3.3 酶固定化的方法 | 第20-21页 |
| 1.3.4 酶固定化的研究进展 | 第21-23页 |
| 1.3.5 海藻糖合酶固定化的研究进展 | 第23-24页 |
| 1.4 本课题的研究意义及内容 | 第24-26页 |
| 1.4.1 本课题的研究意义 | 第24页 |
| 1.4.2 本课题的研究内容 | 第24-26页 |
| 第二章 无载体固定化海藻糖合酶 | 第26-36页 |
| 2.1 引言 | 第26页 |
| 2.2 实验方法 | 第26-30页 |
| 2.2.1 实验材料及仪器 | 第26-27页 |
| 2.2.2 交联酶聚集体的制备 | 第27-28页 |
| 2.2.3 沉淀剂的选择 | 第28-29页 |
| 2.2.4 不同底物浓度的探究 | 第29页 |
| 2.2.5 酶量的优化 | 第29页 |
| 2.2.6 壳聚糖量的优化 | 第29-30页 |
| 2.2.7 丙酮量的优化 | 第30页 |
| 2.2.8 固定化酶的循环利用 | 第30页 |
| 2.3 实验结果与讨论 | 第30-35页 |
| 2.3.1 沉淀剂的选择 | 第30-31页 |
| 2.3.2 不同底物浓度的探究 | 第31-32页 |
| 2.3.3 固定化条件的优化 | 第32-34页 |
| 2.3.4 循环批次 | 第34-35页 |
| 2.4 本章小结 | 第35-36页 |
| 第三章 纳米花固定海藻糖合酶 | 第36-48页 |
| 3.1 引言 | 第36-37页 |
| 3.2 实验方法 | 第37-38页 |
| 3.2.1 实验材料及仪器 | 第37-38页 |
| 3.2.2 酶-晶体复合结构的制备 | 第38页 |
| 3.3 固定化条件优化 | 第38-39页 |
| 3.3.1 铜离子浓度的优化 | 第38-39页 |
| 3.3.2 蛋白浓度的优化 | 第39页 |
| 3.3.3 PBS浓度的优化(磷酸根浓度优化) | 第39页 |
| 3.3.4 固定化时间优化 | 第39页 |
| 3.3.5 循环批次 | 第39页 |
| 3.4 游离酶与固定化酶的稳定性比较 | 第39-40页 |
| 3.4.1 pH稳定性 | 第39-40页 |
| 3.4.2 温度稳定性 | 第40页 |
| 3.5 实验结果及讨论 | 第40-46页 |
| 3.5.1 酶-无机晶体的扫描电镜表征 | 第40-41页 |
| 3.5.2 固定化条件优化结果 | 第41-44页 |
| 3.5.3 游离酶与固定化酶的稳定性比较 | 第44-45页 |
| 3.5.4 循环批次 | 第45-46页 |
| 3.6 本章小结 | 第46-48页 |
| 第四章 树脂固定海藻糖合酶 | 第48-64页 |
| 4.1 引言 | 第48-49页 |
| 4.2 固定化实验方法 | 第49-51页 |
| 4.2.1 实验材料及仪器 | 第49页 |
| 4.2.2 树脂的预处理及固定化酶的制备 | 第49-50页 |
| 4.2.3 载体量的优化 | 第50页 |
| 4.2.4 酶量的优化 | 第50页 |
| 4.2.5 固定化时间的优化 | 第50页 |
| 4.2.6 反应pH条件优化 | 第50页 |
| 4.2.7 反应温度优化 | 第50-51页 |
| 4.2.8 循环批次 | 第51页 |
| 4.3 除副产物及过柱实验方法 | 第51-54页 |
| 4.3.1 麦芽糖及海藻糖配比实验 | 第52页 |
| 4.3.2 工厂结晶数据配比实验 | 第52页 |
| 4.3.3 双酶除葡萄糖 | 第52-53页 |
| 4.3.4 双酶去除反应液中葡萄糖 | 第53页 |
| 4.3.5 补加麦芽糖实验 | 第53-54页 |
| 4.3.6 过柱实验 | 第54页 |
| 4.4 实验结果与讨论 | 第54-62页 |
| 4.4.1 固定化条件优化 | 第54-56页 |
| 4.4.2 反应条件优化 | 第56-57页 |
| 4.4.3 循环批次 | 第57-58页 |
| 4.4.4 去除葡萄糖结果 | 第58-61页 |
| 4.4.5 过柱实验结果 | 第61-62页 |
| 4.5 本章小结 | 第62-64页 |
| 第五章 其他来源海藻糖合酶的表达 | 第64-74页 |
| 5.1 引言 | 第64页 |
| 5.2 实验方法 | 第64-68页 |
| 5.2.1 实验材料及仪器 | 第64-65页 |
| 5.2.2 五种来源Tres基因在大肠杆菌中的表达系统的构建 | 第65-68页 |
| 5.2.3 五种来源海藻糖合酶转化率的比较 | 第68页 |
| 5.3 实验结果与讨论 | 第68-73页 |
| 5.3.1 含五种不同来源目的基因菌株的构建 | 第68-69页 |
| 5.3.2 五种目的基因的表达情况 | 第69-71页 |
| 5.3.3 五种来源海藻糖合酶转化率的比较 | 第71-73页 |
| 5.4 本章小结 | 第73-74页 |
| 第六章 结论与展望 | 第74-76页 |
| 6.1 结论 | 第74-75页 |
| 6.1.1 海藻糖合酶的固定化 | 第74页 |
| 6.1.2 高转化率海藻糖合酶的筛选 | 第74-75页 |
| 6.2 展望 | 第75-76页 |
| 参考文献 | 第76-84页 |
| 致谢 | 第84-86页 |
| 研究成果及发表的学术论文 | 第86-88页 |
| 导师及作者简介 | 第88-90页 |
| 附件 | 第90-91页 |