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奶牛乳房炎大肠杆菌AI-2检测及luxS和pfs基因表达

致谢第4-8页
英文缩写词表第8-9页
摘要第9-11页
文献综述第11-20页
    1 奶牛乳房炎综述第11-12页
        1.1 奶牛乳房炎的概况第11页
        1.2 奶牛乳房炎的病因第11-12页
        1.3 乳房炎的危害第12页
        1.4 乳房炎的防制第12页
    2 奶牛乳房炎的分子流行病学综述第12-15页
        2.1 细菌性因素第13-15页
        2.2 非细菌性因素第15页
    3 细菌密度感应系统(Quorum Sensing,QS)的简介第15-20页
        3.1 革兰氏阴性菌的信号系统第16页
        3.2 革兰氏阳性菌的信号系统第16-17页
        3.3 LuxS/AI-2群体感应系统第17-18页
        3.4 大肠杆菌的群体感应系统第18-20页
试验一 奶牛乳房炎大肠杆菌AI-2信号分子检测第20-30页
    1 材料第21-22页
        1.1 菌种第21页
        1.2 主要试剂第21页
        1.3 培养基及配制第21页
        1.4 主要仪器第21-22页
    2 方法第22-24页
        2.1 奶牛乳房炎的大肠杆菌中信号分子AI-2的制备第22页
        2.2 哈维弧菌BB170的培养第22页
        2.3 AI-2的活性检测第22-23页
        2.4 pfs和luxS mRNA水平检测第23-24页
    3 结果第24-28页
        3.1 不同的奶牛乳房炎大肠杆菌AI-2活性检测第24页
        3.2 不同生长时期E285株AI-2 活性检测第24-25页
        3.3 检测不同培养条件下E285株AI-2活性第25-26页
        3.4 E285株不同生长时期luxS与pfs mRNA水平检测第26-27页
        3.5 E285株不同培养条件下luxS基因和pfs基因mRNA的分析第27-28页
    4 讨论第28-30页
试验二 AI-2信号分子luxS和pfs基因的表达第30-43页
    1 材料第30-31页
        1.1 材料第30-31页
        1.2 仪器第31页
        1.3 SDS-PAGE试剂及配制第31页
    2 方法第31-35页
        2.1 引物设计第31页
        2.2 大肠杆菌luxS和pfs基因的PCR扩增第31-32页
        2.3 胶回收和质粒提取第32页
        2.4 PCR产物酶切第32页
        2.5 表达pET30a载体的酶切第32页
        2.6 连接第32-33页
        2.7 阳性菌落筛选第33页
        2.8 重组蛋白的诱导表达第33页
        2.9 SDS-PAGE第33-34页
        2.10 重组蛋白纯化第34页
        2.11 多克隆抗体制备第34页
        2.12 Western-blotting第34-35页
    3 结果第35-41页
        3.1 luxS和pfs基因的PCR扩增第35页
        3.2 重组质粒的鉴定第35-40页
        3.3 重组质粒pET30a-luxS和pET30a-pfs表达纯化第40页
        3.4 多克隆抗体制备和Western-blotting检测第40-41页
    4 讨论第41-43页
全文总结第43-44页
参考文献第44-55页
ABSTRACT第55-57页

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