致谢 | 第1-5页 |
目录 | 第5-9页 |
摘要 | 第9-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-31页 |
1 基因芯片技术的应用与发展 | 第10-21页 |
·基因芯片概述 | 第10-12页 |
·基因芯片的概念 | 第10-11页 |
·基因芯片的技术原理 | 第11页 |
·基因芯片的分类 | 第11-12页 |
·基因芯片的技术环节 | 第12-13页 |
·芯片的设计与制备 | 第12页 |
·样品的制备与标记 | 第12页 |
·杂交反应 | 第12-13页 |
·信号扫描与结果分析 | 第13页 |
·基因芯片技术的应用 | 第13-19页 |
·在基础研究中的应用 | 第13-14页 |
·在传染病防治中的应用 | 第14-17页 |
·基因芯片在药物研究中的应用 | 第17-19页 |
·基因芯片技术存在的问题与展望 | 第19-21页 |
2 猪链球菌病的研究进展 | 第21-31页 |
·猪链球菌的分子生物学研究进展 | 第21-27页 |
·病原特性 | 第21-22页 |
·流行病学 | 第22-23页 |
·猪链球菌的毒力相关因子的研究现状 | 第23-25页 |
·猪链球菌耐药性研究 | 第25-26页 |
·猪链球菌疫苗开发的研究现状 | 第26-27页 |
·猪链球菌病检测方法的研究进展 | 第27-30页 |
·微生物学诊断方法 | 第27页 |
·血清学检测方法 | 第27-28页 |
·分子生物学检测方法 | 第28-29页 |
·基因芯片检测技术 | 第29-30页 |
·结语 | 第30-31页 |
第二章 试验研究 | 第31-51页 |
试验一 猪链球菌的分离鉴定 | 第31-41页 |
引言 | 第31页 |
1 材料与方法 | 第31-36页 |
·材料 | 第31-32页 |
·病料来源 | 第31页 |
·标准菌株来源 | 第31-32页 |
·主要试剂 | 第32页 |
·主要溶液及培养基 | 第32页 |
·主要仪器 | 第32页 |
·方法 | 第32-36页 |
·细菌分离与培养 | 第32-33页 |
·细菌基因组 DNA 的提取及注意事项 | 第33-34页 |
·引物的设计与合成 | 第34页 |
·PCR 反应体系和反应条件的确立 | 第34页 |
·细菌基因组 DNA 的 PCR 检测 | 第34-35页 |
·目的基因的凝胶回收及注意事项 | 第35页 |
·目的基因的序列测定 | 第35-36页 |
2 结果与分析 | 第36-39页 |
·细菌分离培养结果分析 | 第36页 |
·目的基因PCR检测结果 | 第36-37页 |
·目的基因凝胶回收后的PCR扩增产物结果 | 第37页 |
·2 型猪链球菌特异性引物扩增结果 | 第37-39页 |
·2 型猪链球菌标准菌株 PCR 扩增结果 | 第37-38页 |
·病料中提取的 DNA 分型鉴定结果 | 第38-39页 |
·病料 3、4 已纯化 DNA 的 PCR 产物测序结果 | 第39页 |
3 结论与讨论 | 第39-41页 |
试验二 2 型猪链球菌基因芯片检测技术的试验研究 | 第41-51页 |
引言 | 第41-42页 |
1 材料与方法 | 第42-46页 |
·材料 | 第42-43页 |
·标准菌株来源 | 第42页 |
·芯片材料 | 第42页 |
·试验仪器 | 第42页 |
·主要试剂和溶液 | 第42-43页 |
·方法 | 第43-46页 |
·细菌的培养 | 第43页 |
·细菌基因组 DNA 的提取及注意事项 | 第43-44页 |
·引物的设计与合成 | 第44页 |
·基因芯片的制备 | 第44-45页 |
·杂交用 PCR 产物的制备与鉴定 | 第45页 |
·基因芯片的杂交 | 第45-46页 |
·基因芯片的洗涤与干燥 | 第46页 |
·基因芯片的扫描及扫描结果分析 | 第46页 |
2 结果与分析 | 第46-48页 |
·不对称 PCR 扩增产物分析 | 第46-47页 |
·基因芯片杂交扫描结果的分析 | 第47-48页 |
3 结论与讨论 | 第48-51页 |
·猪链球菌 2 型 | 第48-49页 |
·不对称 PCR 的应用 | 第49页 |
·不同的杂交条件对芯片杂交信号的影响 | 第49-50页 |
·探针合成时是否加有 Poly(dT)对杂交结果的影响 | 第49页 |
·不同浓度的探针对杂交结果的影响 | 第49页 |
·杂交温度和时间对芯片杂交结果的影响 | 第49-50页 |
·基因芯片技术 | 第50-51页 |
·基因芯片技术特点 | 第50页 |
·目的基因的标记及探针的修饰 | 第50页 |
·基因芯片杂交结果的判定 | 第50-51页 |
·基因芯片技术的优势 | 第51页 |
4 全文总结与创新点 | 第51-53页 |
参考文献 | 第53-63页 |
ABSTRACT | 第63-65页 |
附录 | 第65-68页 |
附录1:主要培养基和溶液的配制 | 第65-66页 |
附录2:测序图 | 第66-68页 |
发表文章 | 第68页 |