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猪链球菌的分离鉴定及2型猪链球菌基因芯片检测技术的试验研究

致谢第1-5页
目录第5-9页
摘要第9-10页
第一章 文献综述第10-31页
 1 基因芯片技术的应用与发展第10-21页
   ·基因芯片概述第10-12页
     ·基因芯片的概念第10-11页
     ·基因芯片的技术原理第11页
     ·基因芯片的分类第11-12页
   ·基因芯片的技术环节第12-13页
     ·芯片的设计与制备第12页
     ·样品的制备与标记第12页
     ·杂交反应第12-13页
     ·信号扫描与结果分析第13页
   ·基因芯片技术的应用第13-19页
     ·在基础研究中的应用第13-14页
     ·在传染病防治中的应用第14-17页
     ·基因芯片在药物研究中的应用第17-19页
   ·基因芯片技术存在的问题与展望第19-21页
 2 猪链球菌病的研究进展第21-31页
   ·猪链球菌的分子生物学研究进展第21-27页
     ·病原特性第21-22页
     ·流行病学第22-23页
     ·猪链球菌的毒力相关因子的研究现状第23-25页
     ·猪链球菌耐药性研究第25-26页
     ·猪链球菌疫苗开发的研究现状第26-27页
   ·猪链球菌病检测方法的研究进展第27-30页
     ·微生物学诊断方法第27页
     ·血清学检测方法第27-28页
     ·分子生物学检测方法第28-29页
     ·基因芯片检测技术第29-30页
   ·结语第30-31页
第二章 试验研究第31-51页
 试验一 猪链球菌的分离鉴定第31-41页
  引言第31页
  1 材料与方法第31-36页
   ·材料第31-32页
     ·病料来源第31页
     ·标准菌株来源第31-32页
     ·主要试剂第32页
     ·主要溶液及培养基第32页
     ·主要仪器第32页
   ·方法第32-36页
     ·细菌分离与培养第32-33页
     ·细菌基因组 DNA 的提取及注意事项第33-34页
     ·引物的设计与合成第34页
     ·PCR 反应体系和反应条件的确立第34页
     ·细菌基因组 DNA 的 PCR 检测第34-35页
     ·目的基因的凝胶回收及注意事项第35页
     ·目的基因的序列测定第35-36页
  2 结果与分析第36-39页
   ·细菌分离培养结果分析第36页
   ·目的基因PCR检测结果第36-37页
   ·目的基因凝胶回收后的PCR扩增产物结果第37页
   ·2 型猪链球菌特异性引物扩增结果第37-39页
     ·2 型猪链球菌标准菌株 PCR 扩增结果第37-38页
     ·病料中提取的 DNA 分型鉴定结果第38-39页
   ·病料 3、4 已纯化 DNA 的 PCR 产物测序结果第39页
  3 结论与讨论第39-41页
 试验二 2 型猪链球菌基因芯片检测技术的试验研究第41-51页
  引言第41-42页
  1 材料与方法第42-46页
   ·材料第42-43页
     ·标准菌株来源第42页
     ·芯片材料第42页
     ·试验仪器第42页
     ·主要试剂和溶液第42-43页
   ·方法第43-46页
     ·细菌的培养第43页
     ·细菌基因组 DNA 的提取及注意事项第43-44页
     ·引物的设计与合成第44页
     ·基因芯片的制备第44-45页
     ·杂交用 PCR 产物的制备与鉴定第45页
     ·基因芯片的杂交第45-46页
     ·基因芯片的洗涤与干燥第46页
     ·基因芯片的扫描及扫描结果分析第46页
  2 结果与分析第46-48页
   ·不对称 PCR 扩增产物分析第46-47页
   ·基因芯片杂交扫描结果的分析第47-48页
  3 结论与讨论第48-51页
   ·猪链球菌 2 型第48-49页
   ·不对称 PCR 的应用第49页
   ·不同的杂交条件对芯片杂交信号的影响第49-50页
     ·探针合成时是否加有 Poly(dT)对杂交结果的影响第49页
     ·不同浓度的探针对杂交结果的影响第49页
     ·杂交温度和时间对芯片杂交结果的影响第49-50页
   ·基因芯片技术第50-51页
     ·基因芯片技术特点第50页
     ·目的基因的标记及探针的修饰第50页
     ·基因芯片杂交结果的判定第50-51页
     ·基因芯片技术的优势第51页
4 全文总结与创新点第51-53页
参考文献第53-63页
ABSTRACT第63-65页
附录第65-68页
 附录1:主要培养基和溶液的配制第65-66页
 附录2:测序图第66-68页
发表文章第68页

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