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海洋细菌Paenibacillus sp. BME-14内切葡聚糖酶和甘露聚糖酶基因的克隆、表达与酶学分析

摘要第1-9页
Abstract第9-11页
缩略语表第11-12页
1 前言第12-24页
   ·纤维素半纤维素第12-14页
   ·纤维素酶第14-19页
     ·纤维素酶的来源第14-15页
     ·纤维素酶的结构第15-17页
     ·纤维素酶基因的克隆与表达第17-18页
     ·纤维素酶的应用第18-19页
   ·甘露聚糖酶第19-23页
     ·甘露聚糖酶的来源第19-20页
     ·甘露聚糖酶的特性第20-22页
     ·甘露聚糖酶的应用第22-23页
   ·本研究目的和意义第23-24页
2 材料和方法第24-36页
   ·材料第24-26页
     ·菌株与质粒第24页
     ·试剂第24页
     ·培养基第24页
     ·溶液第24-26页
   ·方法第26-36页
     ·内切葡聚糖酶,甘露聚糖酶活性菌株的筛选第26页
     ·基因组 DNA的提取第26页
     ·菌株鉴定第26-27页
     ·碱裂解法抽提质粒第27页
     ·大肠杆菌电转感受态的制备第27页
     ·基因组文库的建立第27-28页
     ·阳性克隆的筛选第28-29页
     ·内切葡聚糖酶基因的克隆第29-30页
     ·内切葡聚糖酶的表达与纯化第30-31页
     ·内切葡聚糖酶酶学性质研究第31-32页
     ·甘露聚糖酶基因的克隆第32-34页
     ·甘露聚糖酶的表达,纯化第34页
     ·甘露聚糖酶的酶学性质研究第34-36页
3 结果与分析第36-55页
   ·纤维素酶和甘露聚糖酶产生菌的筛选第36页
   ·基因组 DNA的抽提第36-37页
   ·菌株鉴定第37页
   ·基因组文库的建立第37-55页
     ·Paenibacillus sp.BME-14基因组部分酶切第37-38页
     ·文库验证第38页
     ·文库筛选第38页
     ·序列分析第38-41页
     ·内切葡聚糖酶的克隆第41页
     ·Cel9P的表达与纯化第41-42页
     ·内切葡聚糖酶酶学性质研究第42-46页
     ·甘露聚糖酶基因的序列分析及克隆第46-50页
     ·甘露聚糖酶的表达与纯化第50页
     ·甘露聚糖酶酶学性质研究第50-55页
4 讨论第55-59页
   ·筛选方法的确定第55页
   ·内切葡聚糖酶 Cel9P的研究第55-56页
   ·反向PCR第56-57页
   ·甘露聚糖酶 Man26B的研究第57-59页
参考文献第59-67页
致谢第67-68页
附录第68页

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