| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-11页 |
| 前言 | 第11-13页 |
| 第一部分 文献综述 | 第13-20页 |
| ·新城疫病毒的概况 | 第13-15页 |
| ·NDV的分子生物学特性 | 第13-14页 |
| ·NDV的理化特性和分类 | 第14-15页 |
| ·ND的流行情况 | 第15-16页 |
| ·NDV的毒力演化 | 第16-17页 |
| ·ND诊断方法的研究进展 | 第17-19页 |
| ·NDV的分离鉴定技术 | 第17页 |
| ·NDV的血清学诊断技术 | 第17-18页 |
| ·NDV的分子生物学诊断技术 | 第18-19页 |
| ·研究目的和意义 | 第19-20页 |
| 第二部分 鸭源新城疫病毒分离鉴定、全基因序列测定及遗传进化分析 | 第20-42页 |
| 试验一 鸭源新城疫病毒的分离鉴定和部分生物学特性的研究 | 第20-26页 |
| 1 材料和方法 | 第20-23页 |
| ·材料 | 第20-21页 |
| ·病料的采集 | 第21页 |
| ·病毒的分离 | 第21页 |
| ·血凝及血凝抑制试验 | 第21页 |
| ·病毒的纯化 | 第21-22页 |
| ·病毒的生物学特性的测定 | 第22页 |
| ·RT-PCR检测 | 第22-23页 |
| 2 结果 | 第23-24页 |
| ·病毒的分离鉴定与纯化增殖 | 第23页 |
| ·鸡胚平均致死时间(MDT)和鸡胚半数致死量(ELD_(50))的测定结果 | 第23页 |
| ·1日龄雏鸡脑内接种致病指数测定(ICPI)结果 | 第23页 |
| ·RT-PCR扩增结果 | 第23-24页 |
| 3 讨论 | 第24-26页 |
| 试验二 7株鸭源NDV分离株全基因序列测定及遗传进化分析 | 第26-42页 |
| 1 材料与方法 | 第27-30页 |
| ·毒株 | 第27页 |
| ·主要试剂 | 第27页 |
| ·引物设计及合成 | 第27页 |
| ·病毒RNA的提取与反转录 | 第27-28页 |
| ·PCR扩增 | 第28页 |
| ·PCR产物的初步鉴定 | 第28-29页 |
| ·目的片段的纯化与回收 | 第29页 |
| ·连接与转化 | 第29页 |
| ·阳性克隆质粒的鉴定 | 第29-30页 |
| ·克隆片段的序列测定 | 第30页 |
| ·测序结果的拼接和比较分析 | 第30页 |
| 2 结果 | 第30-31页 |
| ·NDV分离株全基因组序列RT-PCR扩增结果 | 第30页 |
| ·F基因遗传进化分析 | 第30-31页 |
| ·全基因组同源性分析 | 第31页 |
| ·HN基因的遗传进化分析 | 第31页 |
| ·全基因组阅读框的比较 | 第31页 |
| 3 讨论 | 第31-42页 |
| 第三部分 鸭源NDV检测方法的研究 | 第42-58页 |
| 试验一 新城疫病毒强弱毒株LAMP鉴别检测方法的建立 | 第42-51页 |
| 1 材料与方法 | 第42-45页 |
| ·试验毒株 | 第42-43页 |
| ·试验主要试剂 | 第43页 |
| ·引物设计与合成 | 第43-44页 |
| ·病毒RNA的抽提与反转录 | 第44-45页 |
| ·LAMP方法的优化 | 第45页 |
| ·LAMP的特异性和敏感性试验 | 第45页 |
| ·重复性试验 | 第45页 |
| 2 结果 | 第45-49页 |
| ·LAMP反应条件的优化 | 第45-47页 |
| ·特异性试验结果 | 第47-48页 |
| ·敏感性试验结果 | 第48-49页 |
| ·重复性试验结果 | 第49页 |
| 3. 讨论 | 第49-51页 |
| 试验二 鸭源新城疫病毒和鸭瘟病毒二重PCR检测方法的建立 | 第51-58页 |
| 1 材料和方法 | 第51-54页 |
| ·试验毒株 | 第51-52页 |
| ·对照菌(毒)株 | 第52页 |
| ·试剂 | 第52页 |
| ·病毒的增殖和收集 | 第52页 |
| ·菌(毒)株核酸的提取 | 第52页 |
| ·引物设计和合成 | 第52-53页 |
| ·二重PCR方法的反应体系 | 第53页 |
| ·不同引物浓度及退火温度的优化 | 第53页 |
| ·特异性试验 | 第53页 |
| ·敏感性试验 | 第53-54页 |
| ·临床样品的检测 | 第54页 |
| 2 结果 | 第54-56页 |
| ·引物浓度及退火温度的优化结果 | 第54-55页 |
| ·二重PCR特异性试验结果 | 第55页 |
| ·二重PCR敏感性试验结果 | 第55-56页 |
| ·临床样品的检测 | 第56页 |
| 3 讨论 | 第56-58页 |
| 结论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 个人简历 | 第67页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第67页 |
