首页--农业科学论文--畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂论文--动物医学(兽医学)论文--兽医基础科学论文--家畜微生物学(兽医病原微生物学)论文--家畜病毒学论文

H9N2亚型流感病毒HA基因变异分析及对鸡免疫机能的影响

中文摘要第1-15页
Abstract第15-19页
前言第19-47页
 1 禽流感的流行现状第19-21页
 2 禽流感病毒的理化特性第21-28页
   ·形态与结构第21-22页
   ·病毒编码的蛋白及其功能第22-28页
     ·血凝素(Hemagglutinin,HA)第22-24页
     ·核蛋白(Nucleoprtein,NP)第24-25页
     ·神经氨酸酶(Nueraminidase,NA)第25-26页
     ·基质蛋白(Matrix Protein,M)第26页
     ·聚合酶(Polymerase)第26-27页
     ·非结构蛋白(Non-structrue protein,NS)第27-28页
 3 禽流感病毒的致病性第28-32页
   ·病毒复制与致病性的关系第29-30页
   ·病毒蛋白与致病性的关系第30-32页
 4 禽流感病毒与细胞凋亡第32-37页
   ·细胞凋亡第32-33页
   ·病毒感染诱导细胞凋亡第33页
   ·禽流感病毒与细胞凋亡第33-37页
     ·凋亡相关结构第34-35页
     ·凋亡相关基因第35-37页
 5 禽流感病毒对免疫系统的影响第37-47页
   ·家禽的免疫系统及对病毒的免疫应答第37-38页
   ·禽流感病毒免疫研究进展第38-41页
     ·宿主免疫应答第38页
     ·体液免疫反应第38-39页
     ·细胞免疫第39-41页
   ·禽流感病毒与免疫抑制第41-47页
     ·免疫抑制及其危害第41-42页
     ·病毒性免疫抑制病第42页
     ·免疫抑制病毒造成免疫抑制的机理第42-44页
     ·禽流感病毒与免疫抑制第44-45页
     ·病毒性免疫抑制病的防制第45-47页
研究内容第47-108页
 试验一 H9N2 亚型禽流感病毒的分离、鉴定及 HA 基因变异分析第47-69页
  1 材料与方法第47-57页
   ·材料第47-48页
     ·主要仪器第47-48页
     ·试剂第48页
     ·引物设计第48页
   ·方法第48-57页
     ·病料的采集第48-49页
     ·病毒的分离与初步鉴定第49页
     ·病毒的蚀斑纯化第49-50页
       ·鸡胚成纤维细胞的制备第49页
       ·蚀斑纯化第49-50页
       ·挑斑第50页
       ·纯化代次第50页
     ·鸡胚半数感染量(EID50)的测定第50-51页
     ·HA 基因RT-PCR 扩增第51-56页
       ·Trizol 法提取病毒总RNA第51页
         ·试剂和器材的DEPC 处理第51页
         ·病毒基因组RNA 的提取和纯化第51页
       ·RT-PCR第51-53页
       ·PCR 产物鉴定第53页
       ·PCR 产物的纯化第53-54页
       ·PCR 产物与pMD18-T Vector 连接、转化第54-55页
       ·阳性克隆筛选第55页
       ·重组质粒的鉴定及测序第55-56页
     ·NA 基因的RT-PCR 扩增第56-57页
  2. 结果第57-65页
   ·临床症状与剖检变化第57-58页
   ·病毒的分离与初步鉴定第58-59页
   ·分离毒株纯化结果第59页
   ·EID50测定结果第59-60页
   ·RT-PCR 扩增HA 基因第60-61页
   ·RT-PCR 扩增NA 基因第61页
   ·HA 基因序列分析第61-65页
  3. 讨论第65-69页
 试验二 H9N2 亚型禽流感病毒对鸡的致病性研究第69-95页
  1 材料与方法第69-75页
   ·材料第69-70页
     ·病毒与实验动物第69页
     ·仪器与试剂第69-70页
   ·方法第70-75页
     ·试验动物分组第70页
     ·荧光定量RT-PCR 检测禽流感病毒第70-72页
     ·间接荧光免疫染色对流感病毒抗原定位第72-73页
     ·病理组织学检察第73-74页
       ·石蜡切片制作方法第73页
       ·H.E.染色方法第73-74页
     ·免疫器官指数的测定第74页
     ·H9N2 亚型禽流感病毒对新城疫疫苗HI 抗体水平的影响第74-75页
       ·试验分组与处理第74页
       ·H9N2 亚型禽流感病毒对新城疫疫苗HI 抗体水平的影响第74-75页
  2 结果第75-90页
   ·临床症状及剖检变化第75-76页
   ·荧光定量PCR 检测H9N2 流感病毒第76-78页
   ·间接免疫荧光染色结果第78-80页
   ·病理组织学观察第80-86页
   ·H9N2 流感病毒对SPF 鸡免疫器官的影响第86-89页
   ·H9N2 亚型禽流感病毒对新城疫免疫后HI 抗体水平的影响第89-90页
  3 讨论第90-95页
   ·间接免疫荧光染色与荧光定量PCR 方法的应用第90-92页
   ·病理组织学观察第92页
   ·H9N2 亚型禽流感病毒对鸡免疫器官的影响第92-94页
   ·H9N2 亚型禽流感病毒对新城疫免疫后HI 抗体水平的影响第94-95页
 试验三 H9N2 亚型流感病毒对鸡T 淋巴细胞亚群的影响第95-100页
  1 材料与方法第95-96页
   ·材料第95-96页
     ·病毒第95页
     ·试验动物第95页
     ·仪器与试剂第95-96页
   ·方法第96页
     ·试验动物分组第96页
     ·流式细胞术分析T 淋巴细胞亚群第96页
  2 结果第96-98页
  3 讨论第98-100页
 试验四 H9N2 禽流感病毒对细胞凋亡和P53 、Bcl-2 mRNA 表达水平的影响第100-108页
  1 材料与方法第100-103页
   ·材料第100-101页
     ·病毒与试验动物第100页
     ·仪器与试剂第100-101页
   ·方法第101-103页
     ·试验动物分组与处理第101页
     ·细胞凋亡的检测第101页
     ·P53 和 Bcl-2 mRNA 表达水平的检测第101-103页
       ·引物合成第101-102页
       ·细胞总 RNA 的提取第102页
       ·cDNA 合成第102-103页
       ·PCR 扩增第103页
       ·PCR 产物分析第103页
       ·数据处理与统计第103页
  2 结果第103-105页
   ·细胞凋亡检测结果第103-105页
   ·P53 和 Bcl-2 mRNA 表达水平检测结果第105页
  3 讨论第105-108页
结论第108-109页
参考文献第109-120页
附录第120-122页
致谢第122页

论文共122页,点击 下载论文
上一篇:嗜热真菌热稳定几丁质酶基因的克隆、表达与分子改造
下一篇:生鲜鸡肉调理制品菌群结构分析和货架期预测模型的研究