| 符号说明 | 第1-8页 |
| 中文摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 1 前言 | 第12-42页 |
| ·PRRSV 生物学特征 | 第13-17页 |
| ·PRRSV 基因组结构 | 第13-17页 |
| ·主要结构蛋白（GP5、M和N蛋白） | 第15-16页 |
| ·其他次要结构蛋白（GP2、GP3 和 GP4） | 第16-17页 |
| ·PRRSV 遗传变异 | 第17-19页 |
| ·结构蛋白编码区的变异 | 第18-19页 |
| ·非结构蛋白编码区的变异 | 第19页 |
| ·PRRSV 免疫学与致病机制的研究进展 | 第19-22页 |
| ·体液免疫反应 | 第19-20页 |
| ·细胞免疫反应 | 第20-21页 |
| ·PRRSV 的致病机制 | 第21-22页 |
| ·DNA 疫苗的研究进展 | 第22-28页 |
| ·核酸疫苗的研究历史 | 第22页 |
| ·核酸疫苗的组成结构 | 第22页 |
| ·DNA 疫苗的免疫机制 | 第22-25页 |
| ·核酸疫苗的优点及其不足 | 第25-27页 |
| ·影响 DNA 免疫效果的主要因素 | 第27-28页 |
| ·增强 DNA 疫苗免疫效果的策略 | 第28页 |
| ·分子佐剂的选择 | 第28-42页 |
| ·补体 C3d 研究进展 | 第28-34页 |
| ·干扰素诱导蛋白 10（IP-10）研究进展 | 第34-37页 |
| ·法氏囊三肽（BS）研究进展 | 第37-38页 |
| ·胸腺五肽的研究进展 | 第38-42页 |
| 2 材料和方法 | 第42-57页 |
| ·材料 | 第42-44页 |
| ·菌株和毒株 | 第42页 |
| ·载体 | 第42页 |
| ·试剂 | 第42页 |
| ·试验动物 | 第42页 |
| ·主要仪器 | 第42-43页 |
| ·试验所用溶液及其配制 | 第43页 |
| ·RT-RCR 试验所用物品的准备和处理 | 第43-44页 |
| ·方法 | 第44-57页 |
| ·PRRSV-SDDP 株全基因克隆测序及序列分析 | 第44-49页 |
| ·病料的处理 | 第44页 |
| ·细胞的培养及传代 | 第44页 |
| ·盲传病毒 | 第44页 |
| ·病毒的大量繁殖 | 第44-45页 |
| ·病毒的 TCID50 的测定 | 第45页 |
| ·间接免疫荧光试验（IFA） | 第45页 |
| ·病毒 RNA 的提取 | 第45页 |
| ·引物的设计 | 第45-46页 |
| ·RT-PCR 检测 | 第46-47页 |
| ·目的条带回收 | 第47页 |
| ·制作感受态细胞 | 第47-48页 |
| ·PCR 产物与 pEASY-T 的连接及转化 | 第48页 |
| ·阳性克隆鉴定 | 第48-49页 |
| ·重组表达质粒的构建及鉴定 | 第49-57页 |
| ·引物设计 | 第50页 |
| ·目的基因的扩增、纯化及载体的双酶切、纯化 | 第50页 |
| ·真核表达载体重组质粒的构建和鉴定 | 第50-51页 |
| ·重组质粒的大量提取 | 第51页 |
| ·重组质粒在 293-T 细胞中的表达 | 第51-52页 |
| ·间接免疫荧光鉴定转染细胞 | 第52页 |
| ·重组质粒免疫效果监测 | 第52-53页 |
| ·ELISA 试剂盒检测 PRRSV-GP5 特异性抗体 | 第53-57页 |
| ·操作步骤 | 第53-54页 |
| ·试验结果的判定 | 第54页 |
| ·小鼠血清中 IL-4 的检测 | 第54-55页 |
| ·小鼠血清中 IFN-γ的检测 | 第55-57页 |
| 3 结果与分析 | 第57-65页 |
| ·病毒分离结果 | 第57页 |
| ·SDDP 毒株 TCID50的检测结果 | 第57-58页 |
| ·间接免疫荧光试验结果 | 第58页 |
| ·PCR 检测结果 | 第58-59页 |
| ·序列分析结果 | 第59-60页 |
| ·重组质粒的免疫效果研究 | 第60-65页 |
| ·真核表达载体构建结果 | 第60-61页 |
| ·重组质粒在细胞内的表达 | 第61页 |
| ·重组质粒对小鼠的免疫效果 | 第61-65页 |
| ·对小鼠体液免疫（抗体水平）增强结果 | 第61-62页 |
| ·对小鼠细胞免疫（IL-4 和 IFN-γ的含量）增强结果 | 第62-65页 |
| 4 讨论 | 第65-67页 |
| ·PRRSV-SDDP 株全基因序列分析 | 第65-66页 |
| ·不同分子佐剂对 PRRSV-GP5 免疫效果的影响 | 第66-67页 |
| 5 结论 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 研究生期间发表论文 | 第77页 |
