| 中文摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 1 引言 | 第12-29页 |
| ·戊型肝炎概况 | 第12-20页 |
| ·戊型肝炎病毒病原学研究 | 第12-13页 |
| ·病毒基因组结构 | 第13-14页 |
| ·戊型肝炎的流行病学 | 第14-17页 |
| ·检测方法 | 第17-18页 |
| ·疫苗的研究 | 第18-20页 |
| ·禽戊型肝炎病毒的研究进展 | 第20-23页 |
| ·禽戊型肝炎病毒病原学 | 第20页 |
| ·禽戊型肝炎病毒流行病学 | 第20-21页 |
| ·禽戊型肝炎病毒免疫学 | 第21-23页 |
| ·昆虫杆状病毒表达系统研究的新进展 | 第23-28页 |
| ·杆状病毒转移载体的优化 | 第23-24页 |
| ·细胞株的优化 | 第24页 |
| ·病毒滴度测定方法的改进 | 第24页 |
| ·昆虫杆状病毒表达系统的优越性 | 第24-26页 |
| ·昆虫杆状病毒表达载体系统的应用 | 第26-28页 |
| ·本研究课题的目的与意义 | 第28-29页 |
| 2 材料与方法 | 第29-49页 |
| ·材料 | 第29-32页 |
| ·实验动物及病毒株 | 第29页 |
| ·实验材料 | 第29页 |
| ·主要仪器 | 第29-30页 |
| ·溶液的配制 | 第30-32页 |
| ·方法 | 第32-49页 |
| ·禽 HEV ORF3 克隆质粒的构建 | 第32-36页 |
| ·禽 HEV ORF3 原核表达质粒的构建 | 第36-37页 |
| ·禽 HEV ORF3 蛋白的原核表达与纯化 | 第37-40页 |
| ·重叠的不同截短的禽 HEV ORF3 蛋白的设计、构建、表达、鉴定和纯化 | 第40-41页 |
| ·原核表达的 ORF3 蛋白为抗原免疫小鼠 | 第41-42页 |
| ·抗 ORF3 蛋白单克隆抗体的制备 | 第42-45页 |
| ·单抗的鉴定 | 第45-46页 |
| ·不同截短的 ORF3S 蛋白对临床血清的检查 | 第46页 |
| ·杆状病毒表达系统对禽 HEV ORF3 蛋白的表达 | 第46-47页 |
| ·真核表达的 ORF3 蛋白小鼠血清的制备及蛋白免疫原性分析 | 第47-49页 |
| 3 结果与分析 | 第49-60页 |
| ·ORF3 表达质粒的构建 | 第49-50页 |
| ·禽 HEV ORF3 克隆质粒的构建与双酶切鉴定 | 第49页 |
| ·目的基因的测序鉴定 | 第49页 |
| ·禽 HEV ORF3 基因重组表达质粒的构建 | 第49-50页 |
| ·禽 HEV ORF3 蛋白的表达与鉴定 | 第50-51页 |
| ·禽 HEV ORF3 蛋白的表达 | 第50页 |
| ·蛋白的 WESTERN BLOT 鉴定 | 第50-51页 |
| ·不同截短的 ORF3 蛋白的设计 | 第51-53页 |
| ·ORF3 蛋白分段分析与引物设计 | 第52页 |
| ·分段蛋白的表达纯化与鉴定 | 第52-53页 |
| ·单抗的制备与鉴定 | 第53-55页 |
| ·细胞融合及抗禽 HEV ORF3 蛋白单抗的筛选 | 第53页 |
| ·单抗腹水的制备与纯化 | 第53页 |
| ·单抗的特异性及其识别抗原表位的鉴定 | 第53-55页 |
| ·单抗亚型鉴定 | 第55页 |
| ·禽 HEV ORF3 蛋白的抗原表位分析 | 第55-56页 |
| ·抗禽 HEV ORF3 蛋白的阳性鸡血清的鉴定 | 第55页 |
| ·分段 ORF3 蛋白检测阳性血清 | 第55-56页 |
| ·ORF3 蛋白的真核表达 | 第56-59页 |
| ·PFAST-BAC-HTB-ORF3 质粒的构建 | 第56页 |
| ·重组杆粒鉴定 | 第56-57页 |
| ·重组 ORF3 蛋白表达的 SDS-PAGE 和 WESTERN BLOT 鉴定 | 第57-58页 |
| ·IFA 鉴定重组蛋白的表达 | 第58页 |
| ·重组 ORF3 蛋白在 SF9 细胞中的表达优化 | 第58-59页 |
| ·多抗制备与免疫原性分析 | 第59-60页 |
| 4 讨论 | 第60-63页 |
| ·禽 HEV ORF3 蛋白的原核表达与单抗制备 | 第60页 |
| ·利用分段蛋白对临床血清检测 | 第60-61页 |
| ·禽 HEV ORF3 的真核表达与免疫原性的分析 | 第61-63页 |
| 5 结论 | 第63-64页 |
| 6 参考文献 | 第64-74页 |
| 7 致谢 | 第74-75页 |
| 8 攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第75页 |
