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波形蛋白对PRRSV感染细胞的作用研究

中文摘要第1-10页
Abstract第10-12页
1. 引言第12-26页
   ·PRRSV生物学特征第13-14页
   ·PRRSV基因组结构第14-18页
     ·结构蛋白第15-17页
     ·非结构蛋白第17-18页
   ·PRRSV 遗传变异第18-19页
     ·结构蛋白编码区的变异第19页
     ·非结构蛋白编码区的变异第19页
   ·PRRSV 免疫学与致病机制的研究进展第19-22页
     ·体液免疫反应第20-21页
     ·细胞免疫反应第21页
     ·PRRSV 的致病机制第21-22页
   ·PRRSV 受体的研究进展第22-24页
   ·PRRSV 的预防及控制第24页
   ·研究的目的和意义第24-26页
2 材料与方法第26-51页
   ·材料第26-30页
     ·样品来源第26页
     ·菌株和质粒第26-27页
     ·试剂第27-29页
     ·仪器与设备第29-30页
     ·其它试剂第30页
     ·培养基和溶液第30页
     ·主要功能蛋白及抗体第30页
   ·方法第30-51页
     ·猪源波形蛋白扩增及鉴定第30-35页
     ·猪源波形蛋白及猴源分段波形蛋白的原核表达质粒的构建及鉴定第35-38页
     ·猴源波形蛋白真核转染质粒 pcDNA-3.1-GIV 的构建及鉴定第38-41页
     ·波形蛋白的表达及鉴定第41-44页
     ·抗猪源波形蛋白阳性血清的制备第44-46页
     ·猪波形蛋白及其抗体血清对 PRRSV 的阻断作用第46-47页
     ·I-ELISA 方法检测表达的重组波形蛋白与 PRRSV 的 N 蛋白的关系第47-48页
     ·pcDNA-3.1-EmGFP/GIV 稳定转染 BHK-21 细胞系的建立与应用第48-49页
     ·PRRSV 感染 BHK-21-GIV 细胞间接免疫荧光分析第49-51页
3 结果与分析第51-62页
   ·波形蛋白质粒的构建结果第51-53页
     ·猪源波形蛋白的扩增及重组质粒的构建结果第51页
     ·猴源波形蛋白基因的扩增及转染质粒的构建结果第51-52页
     ·猴源波形蛋白分段基因重组质粒的构建结果第52-53页
   ·波形蛋白的表达与鉴定结果第53-55页
     ·猪源波形蛋白的表达及鉴定结果第53-54页
     ·猴源波形蛋白分段表达及鉴定结果第54-55页
   ·猪源波形蛋白抗血清的制备及其在 PRRSV 感染 Marc-145 细胞中的阻断作用第55-57页
     ·抗波形蛋白抗体水平检测结果第55页
     ·抗猪源波形蛋白血清与 PK-15 细胞结合结果第55-56页
     ·波形蛋白的病毒阻断 IFA 检测结果第56页
     ·抗波形蛋白抗体的病毒阻断 IFA 检测结果第56-57页
   ·稳定表达猴源波形蛋白 BHK-21 细胞系的建立及对 PRRSV 易感性的初步研究第57-58页
     ·pcDNA-3.1-EmGFP/GIV 稳定转染 BHK-21 细胞系的筛选与建立第57页
     ·BHK-21-GIV 细胞系外源波形蛋白表达检测分析第57-58页
     ·病毒感染细胞及间接免疫荧光结果第58页
   ·I-ELISA方法检测表达的重组波形蛋白与PRRSV N蛋白的结合第58-62页
     ·猪源波形蛋白与N蛋白结合实验结果第58-59页
     ·猴源分段波形蛋白与 PRRSV N 蛋白的结合实验结果第59-62页
4 讨论第62-66页
   ·猪波形蛋白的表达及抗血清的制备第63-64页
   ·波形蛋白与 PRRSV N 蛋白的关系第64页
   ·转染猴源波形蛋白对 PRRSV 非易感细胞系 BHK-21 的影响第64-66页
5 结论第66-67页
   ·病毒阻断第66页
   ·波形蛋白与 PRRSV N 蛋白结合第66-67页
参考文献第67-76页
致谢第76-77页
攻读学位期间发表论文情况第77页

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