中文摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-14页 |
1 引言 | 第14-15页 |
2 材料和方法 | 第15-31页 |
·材料 | 第15-19页 |
·细胞系来源 | 第15页 |
·主要试剂 | 第15-16页 |
·主要仪器设备 | 第16-17页 |
·常用试剂配制 | 第17-19页 |
·实验方法 | 第19-31页 |
·人骨肉瘤细胞系MG63的培养 | 第19-20页 |
·MTT法检测细胞增殖活力 | 第20-21页 |
·单荧光标记流式细胞术检测细胞周期 | 第21-22页 |
·PI/FITC双荧光标记流式细胞术检测细胞凋亡 | 第22-23页 |
·细胞碱性磷酸酶(ALP)活性的测定 | 第23-24页 |
·ELISA测定细胞Ⅰ型胶原蛋白含量 | 第24页 |
·RT-PCR检测MG63细胞相关基因的表达 | 第24-28页 |
·Western Blotting鉴定药物干预对MG63细胞相关蛋白表达的影响 | 第28-30页 |
·统计学分析 | 第30-31页 |
3 实验结果 | 第31-57页 |
·骨肉瘤细胞MG63的培养 | 第31-32页 |
·形态学观察 | 第31页 |
·生长曲线描记 | 第31-32页 |
·MTT检测不同浓度药物干预后细胞增殖活力的变化 | 第32-33页 |
·PI单荧光标记流式细胞术检测不同浓度药物干预后的细胞周期变化 | 第33-40页 |
·FP干预24h人骨肉瘤MG63细胞周期变化结果 | 第33-40页 |
·PI/FITC双荧光标记流式细胞术检测细胞凋亡结果 | 第40-42页 |
·FP干预24h人骨肉瘤MG63细胞早期凋亡的结果 | 第40-41页 |
·不同浓度FP干预48h人骨肉瘤MG63细胞早期凋亡的结果 | 第41-42页 |
·细胞内碱性磷酸酶(ALP)含量的测定结果 | 第42-44页 |
·细胞分泌Ⅰ型胶原蛋白含量测定结果 | 第44-46页 |
·RT-PCR检测细胞内相关基因表达的结果 | 第46-54页 |
·不同浓度药物干预细胞不同时间CDK2 mRNA水平的变化 | 第46-47页 |
·不同浓度药物干预细胞不同时间CDK4 mRNA水平的变化 | 第47-48页 |
·不同浓度药物干预细胞不同时间P21WAF mRNA水平的变化 | 第48-49页 |
·不同浓度药物干预细胞不同时间P27KIP1 mRNA水平的变化 | 第49-50页 |
·不同浓度药物干预细胞不同时间Survivin mRNA水平的变化 | 第50-51页 |
·不同浓度药物干预细胞不同时间Rb mRNA水平的变化 | 第51-52页 |
·不同浓度药物干预5d和10d Runx2 mRNA水平的变化 | 第52-53页 |
·不同药物干预后5d和10d OCN mRNA水平的变化 | 第53-54页 |
·Western Blotting检测药物干预对MG63细胞相关蛋白表达的影响 | 第54-56页 |
·不同浓度药物干预后5d、10d细胞内CDK2、Runx2蛋白水平的变化 | 第54-56页 |
·形态学观察 | 第56-57页 |
4 讨论 | 第57-65页 |
·夫拉平度(Flavopiridol, FP)的作用 | 第58-59页 |
·FP可抑制人骨肉瘤细胞MG63增殖并诱导其凋亡 | 第59-61页 |
·FP对人骨肉瘤细胞MG63具有促进分化的作用 | 第61-65页 |
5 结论 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-69页 |
综述 | 第69-84页 |
1 正常的细胞周期的平衡受到严格调控 | 第70-75页 |
·概述 | 第70页 |
·细胞周期蛋白复合物 | 第70-72页 |
·周期蛋白复合物活性的调节 | 第72页 |
·细胞周期的有序进行受到诸多通路和因素的影响 | 第72-75页 |
2 肿瘤的产生与细胞分化的故障紧密相关 | 第75-76页 |
3 诱导肿瘤细胞向正常细胞分化是肿瘤治疗的趋势 | 第76-78页 |
4 总结与展望 | 第78-80页 |
参考文献 | 第80-84页 |
中英文缩略词表 | 第84-85页 |
致谢 | 第85-86页 |
个人简历 | 第86页 |