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CDK抑制剂夫拉平度诱导人骨肉瘤MG63细胞凋亡和分化的研究

中文摘要第1-7页
Abstract第7-14页
1 引言第14-15页
2 材料和方法第15-31页
   ·材料第15-19页
     ·细胞系来源第15页
     ·主要试剂第15-16页
     ·主要仪器设备第16-17页
     ·常用试剂配制第17-19页
   ·实验方法第19-31页
     ·人骨肉瘤细胞系MG63的培养第19-20页
     ·MTT法检测细胞增殖活力第20-21页
     ·单荧光标记流式细胞术检测细胞周期第21-22页
     ·PI/FITC双荧光标记流式细胞术检测细胞凋亡第22-23页
     ·细胞碱性磷酸酶(ALP)活性的测定第23-24页
     ·ELISA测定细胞Ⅰ型胶原蛋白含量第24页
     ·RT-PCR检测MG63细胞相关基因的表达第24-28页
     ·Western Blotting鉴定药物干预对MG63细胞相关蛋白表达的影响第28-30页
     ·统计学分析第30-31页
3 实验结果第31-57页
   ·骨肉瘤细胞MG63的培养第31-32页
     ·形态学观察第31页
     ·生长曲线描记第31-32页
   ·MTT检测不同浓度药物干预后细胞增殖活力的变化第32-33页
   ·PI单荧光标记流式细胞术检测不同浓度药物干预后的细胞周期变化第33-40页
     ·FP干预24h人骨肉瘤MG63细胞周期变化结果第33-40页
   ·PI/FITC双荧光标记流式细胞术检测细胞凋亡结果第40-42页
     ·FP干预24h人骨肉瘤MG63细胞早期凋亡的结果第40-41页
     ·不同浓度FP干预48h人骨肉瘤MG63细胞早期凋亡的结果第41-42页
   ·细胞内碱性磷酸酶(ALP)含量的测定结果第42-44页
   ·细胞分泌Ⅰ型胶原蛋白含量测定结果第44-46页
   ·RT-PCR检测细胞内相关基因表达的结果第46-54页
     ·不同浓度药物干预细胞不同时间CDK2 mRNA水平的变化第46-47页
     ·不同浓度药物干预细胞不同时间CDK4 mRNA水平的变化第47-48页
     ·不同浓度药物干预细胞不同时间P21WAF mRNA水平的变化第48-49页
     ·不同浓度药物干预细胞不同时间P27KIP1 mRNA水平的变化第49-50页
     ·不同浓度药物干预细胞不同时间Survivin mRNA水平的变化第50-51页
     ·不同浓度药物干预细胞不同时间Rb mRNA水平的变化第51-52页
     ·不同浓度药物干预5d和10d Runx2 mRNA水平的变化第52-53页
     ·不同药物干预后5d和10d OCN mRNA水平的变化第53-54页
   ·Western Blotting检测药物干预对MG63细胞相关蛋白表达的影响第54-56页
     ·不同浓度药物干预后5d、10d细胞内CDK2、Runx2蛋白水平的变化第54-56页
   ·形态学观察第56-57页
4 讨论第57-65页
   ·夫拉平度(Flavopiridol, FP)的作用第58-59页
   ·FP可抑制人骨肉瘤细胞MG63增殖并诱导其凋亡第59-61页
   ·FP对人骨肉瘤细胞MG63具有促进分化的作用第61-65页
5 结论第65-66页
参考文献第66-69页
综述第69-84页
 1 正常的细胞周期的平衡受到严格调控第70-75页
   ·概述第70页
   ·细胞周期蛋白复合物第70-72页
   ·周期蛋白复合物活性的调节第72页
   ·细胞周期的有序进行受到诸多通路和因素的影响第72-75页
 2 肿瘤的产生与细胞分化的故障紧密相关第75-76页
 3 诱导肿瘤细胞向正常细胞分化是肿瘤治疗的趋势第76-78页
 4 总结与展望第78-80页
 参考文献第80-84页
中英文缩略词表第84-85页
致谢第85-86页
个人简历第86页

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