| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-17页 |
| ·甘油醛 3-磷酸脱氢酶简介 | 第9页 |
| ·甘油醛 3-磷酸脱氢酶在原核和真核生物中的分布 | 第9-10页 |
| ·甘油醛 3-磷酸脱氢酶在原核生物中的分布 | 第9页 |
| ·甘油醛 3-磷酸脱氢酶在真核生物中的分布 | 第9-10页 |
| ·甘油醛 3-磷酸脱氢酶的制备方法 | 第10-11页 |
| ·原核表达技术 | 第10页 |
| ·真核表达技术 | 第10-11页 |
| ·甘油醛 3-磷酸脱氢酶重组蛋白的分离纯化 | 第11-13页 |
| ·重组蛋白概述 | 第11页 |
| ·重组蛋白的表达 | 第11-12页 |
| ·重组蛋白样本的制备 | 第12页 |
| ·重组蛋白的纯化及常用技术 | 第12-13页 |
| ·TAT 蛋白转导肽与甘油醛 3-磷酸脱氢酶的高效制备 | 第13-15页 |
| ·蛋白转导结构域概述 | 第13页 |
| ·蛋白转导肽 TAT 概述及研究进展 | 第13-15页 |
| ·蛋白转导肽 TAT 对甘油醛 3-磷酸脱氢酶表达的影响 | 第15页 |
| ·甘油醛 3-磷酸脱氢酶功能及应用研究进展 | 第15-16页 |
| ·甘油醛 3-磷酸脱氢酶的活性研究 | 第15页 |
| ·甘油醛 3-磷酸脱氢酶的功能研究进展 | 第15-16页 |
| ·甘油醛 3-磷酸脱氢酶在原核、真核生物中的应用 | 第16页 |
| ·本研究的选题目的及意义 | 第16-17页 |
| 第二章 材料与方法 9 2.1 甘油醛 3-磷酸脱氢酶的原核表达、分离纯化 | 第17-24页 |
| ·甘油醛 3-磷酸脱氢酶的原核表达、分离纯化 | 第17-21页 |
| ·试验材料 | 第17页 |
| ·试验方法 | 第17-21页 |
| ·甘油醛 3-磷酸脱氢酶的体外酶活动态监测 | 第21页 |
| ·试验材料 | 第21页 |
| ·试验方法 | 第21页 |
| ·TAT 蛋白转导肽对甘油醛 3-磷酸脱氢酶表达的影响 | 第21-22页 |
| ·试验材料 | 第21-22页 |
| ·试验方法 | 第22页 |
| ·甘油醛 3-磷酸脱氢酶在原核和真核生物中的应用研究 | 第22-24页 |
| ·试验材料 | 第22页 |
| ·试验方法 | 第22-24页 |
| 第三章 结果与分析 16 3.1 原核表达载体 pET28b-GAPDH 的构建 | 第24-32页 |
| ·原核表达载体 pET28b-GAPDH 的构建 | 第24-25页 |
| ·原核表达载体 pET28b-GAPDH 的构建示意图 | 第24页 |
| ·目的基因、质粒及重组质粒结果图 | 第24-25页 |
| ·原核表达产物 SDS-PAGE 及 Western Blot 鉴定图 | 第25-26页 |
| ·原核表达产物分离纯化结果图 | 第26-27页 |
| ·原核表达产物体外酶活动态监测 | 第27页 |
| ·TAT-pET28b-GAPDH 与 pET28b-GAPDH 原核表达产物的比较结果图 | 第27-28页 |
| ·GAPDH 在原核和真核生物免疫沉淀试验的应用 | 第28-32页 |
| ·原核和真核生物中普遍存在的内源性的 GAPDH 免疫印迹检测图 | 第28-29页 |
| ·大肠杆菌 HB101 内源性 GAPDH 免疫印迹及 MALDI-TOF 检测图 | 第29-30页 |
| ·大肠杆菌内源性 GAPDH 原核表达鉴定图 | 第30页 |
| ·线虫、酵母及 PC12 细胞内源性 GAPDH 原核表达鉴定图 | 第30-32页 |
| 第四章 讨论 24 4.1 原核表达载体 pET28b-GAPDH 的构建 | 第32-37页 |
| ·原核表达载体 pET28b-GAPDH 的构建 | 第32-33页 |
| ·甘油醛 3-磷酸脱氢酶的高效表达和 Western Blot 验证 | 第33-34页 |
| ·原核表达产物甘油醛 3-磷酸脱氢酶的分离纯化 | 第34页 |
| ·原核表达产物甘油醛 3-磷酸脱氢酶的体外酶活监测 | 第34-35页 |
| ·TAT 蛋白转导肽对甘油醛 3-磷酸脱氢酶表达的影响 | 第35页 |
| ·TAT 标签能够促进外源蛋白高效可溶性表达具有普遍性 | 第35页 |
| ·TAT 标签对外源蛋白甘油醛 3-磷酸脱氢酶表达的影响研究 | 第35页 |
| ·甘油醛 3-磷酸脱氢酶在原核和真核生物中的应用 | 第35-37页 |
| 第五章 结论 29 5.1 建立了甘油醛 3-磷酸脱氢酶有重要酶活的高效制备方法 | 第37-38页 |
| ·建立了甘油醛 3-磷酸脱氢酶有重要酶活的高效制备方法 | 第37页 |
| ·甘油醛 3-磷酸脱氢酶可作为原核和真核生物的通用内标蛋白 | 第37-38页 |
| 参考文献 | 第38-42页 |
| 致谢 | 第42-43页 |
| 作者简介 | 第43页 |
