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IRTKS蛋白的磷酸化修饰及降解的研究

摘要第1-6页
Abstract第6-11页
第1章 前言第11-21页
   ·IRTKS简介第11-15页
     ·IRSp53的结构第11-13页
     ·IRTKS结构及与其相互作用的蛋白第13-14页
     ·IRTKS的功能第14-15页
     ·IRTKS与IRSp53的磷酸化探讨第15页
   ·原癌基因Src第15-18页
     ·Src的发现第15页
     ·v-Src与c-Src的区别及其活化机制第15-17页
     ·c-Src参与的信号通路第17页
     ·Src的功能第17-18页
   ·MDM2简介第18-19页
     ·MDM2对p53功能的调控第18-19页
     ·MDM2的泛素连接酶活性第19页
   ·实验室前期研究第19-20页
     ·IRTKS稳定诱导表达细胞株的构建第19页
     ·IRTKS功能的初步研究第19-20页
   ·研究目的和内容第20-21页
     ·研究目的第20页
     ·研究内容第20-21页
第2章 材料与方法第21-32页
   ·试验材料和试剂第21-25页
     ·试验仪器第21-22页
     ·菌株及其培养基第22页
     ·载体第22页
     ·生化试剂第22-23页
     ·用到的引物第23-24页
     ·RNA干扰用到的序列第24-25页
   ·实验方法第25-32页
     ·定点突变第25-26页
     ·质粒提取(中抽)第26页
     ·质粒提取(小抽)第26-27页
     ·细胞培养第27-28页
     ·转染第28页
     ·细胞裂解第28-29页
     ·BCA蛋白定量第29页
     ·免疫沉淀(Immunoprecipitation)第29-30页
     ·蛋白印迹(Western Blot)第30-31页
     ·紫外处理细胞第31页
     ·细胞划痕试验第31-32页
第3章 结果与讨论第32-62页
   ·IRTKS在细胞系中的酪氨酸磷酸化状态及其磷酸化机制第32-37页
     ·IRTKS在各细胞系中的酪氨酸磷酸化状态第32-34页
     ·Src激酶介导IRTKS酪氨酸磷酸化第34-36页
     ·IRTKS与Src的相互作用第36-37页
   ·IRTKS的IMD区域的酪氨酸磷酸化位点研究第37-45页
     ·IRTKS的酪氨酸位点及其缺失突变第37-38页
     ·IRTKS缺失突变的磷酸化第38-40页
     ·Src激酶介导的磷酸化位点的分析第40-42页
     ·Src激酶介导IMD结构域磷酸化的位点第42-44页
     ·Y37,Y156,Y163在IMD结构域上的位置信息第44-45页
   ·IRTKS的羧基末端区域磷酸化位点的分析第45-49页
     ·Src激酶介导D5磷酸化的位点分析第46-47页
     ·Src激酶介导D5酪氨酸磷酸化的位点第47-49页
   ·IRTKS磷酸化功能研究第49-55页
     ·IRTKS的促细胞迁移功能第49-52页
     ·Src调控IRTKS促细胞迁移的功能第52-54页
     ·IRTKS对Src激酶信号通路的影响第54-55页
   ·IRTKS的泛素化修饰第55-57页
     ·MDM2促进IRTKS的降解第56页
     ·MDM2能多聚泛素化IRTKS第56-57页
   ·磷酸化的IRTKS更加稳定第57-58页
     ·Src使IRTKS更加稳定第57-58页
     ·IRTKS的磷酸化抑制其泛素化降解第58页
   ·讨论第58-62页
参考文献第62-66页
致谢第66页

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