摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-11页 |
第1章 前言 | 第11-21页 |
·IRTKS简介 | 第11-15页 |
·IRSp53的结构 | 第11-13页 |
·IRTKS结构及与其相互作用的蛋白 | 第13-14页 |
·IRTKS的功能 | 第14-15页 |
·IRTKS与IRSp53的磷酸化探讨 | 第15页 |
·原癌基因Src | 第15-18页 |
·Src的发现 | 第15页 |
·v-Src与c-Src的区别及其活化机制 | 第15-17页 |
·c-Src参与的信号通路 | 第17页 |
·Src的功能 | 第17-18页 |
·MDM2简介 | 第18-19页 |
·MDM2对p53功能的调控 | 第18-19页 |
·MDM2的泛素连接酶活性 | 第19页 |
·实验室前期研究 | 第19-20页 |
·IRTKS稳定诱导表达细胞株的构建 | 第19页 |
·IRTKS功能的初步研究 | 第19-20页 |
·研究目的和内容 | 第20-21页 |
·研究目的 | 第20页 |
·研究内容 | 第20-21页 |
第2章 材料与方法 | 第21-32页 |
·试验材料和试剂 | 第21-25页 |
·试验仪器 | 第21-22页 |
·菌株及其培养基 | 第22页 |
·载体 | 第22页 |
·生化试剂 | 第22-23页 |
·用到的引物 | 第23-24页 |
·RNA干扰用到的序列 | 第24-25页 |
·实验方法 | 第25-32页 |
·定点突变 | 第25-26页 |
·质粒提取(中抽) | 第26页 |
·质粒提取(小抽) | 第26-27页 |
·细胞培养 | 第27-28页 |
·转染 | 第28页 |
·细胞裂解 | 第28-29页 |
·BCA蛋白定量 | 第29页 |
·免疫沉淀(Immunoprecipitation) | 第29-30页 |
·蛋白印迹(Western Blot) | 第30-31页 |
·紫外处理细胞 | 第31页 |
·细胞划痕试验 | 第31-32页 |
第3章 结果与讨论 | 第32-62页 |
·IRTKS在细胞系中的酪氨酸磷酸化状态及其磷酸化机制 | 第32-37页 |
·IRTKS在各细胞系中的酪氨酸磷酸化状态 | 第32-34页 |
·Src激酶介导IRTKS酪氨酸磷酸化 | 第34-36页 |
·IRTKS与Src的相互作用 | 第36-37页 |
·IRTKS的IMD区域的酪氨酸磷酸化位点研究 | 第37-45页 |
·IRTKS的酪氨酸位点及其缺失突变 | 第37-38页 |
·IRTKS缺失突变的磷酸化 | 第38-40页 |
·Src激酶介导的磷酸化位点的分析 | 第40-42页 |
·Src激酶介导IMD结构域磷酸化的位点 | 第42-44页 |
·Y37,Y156,Y163在IMD结构域上的位置信息 | 第44-45页 |
·IRTKS的羧基末端区域磷酸化位点的分析 | 第45-49页 |
·Src激酶介导D5磷酸化的位点分析 | 第46-47页 |
·Src激酶介导D5酪氨酸磷酸化的位点 | 第47-49页 |
·IRTKS磷酸化功能研究 | 第49-55页 |
·IRTKS的促细胞迁移功能 | 第49-52页 |
·Src调控IRTKS促细胞迁移的功能 | 第52-54页 |
·IRTKS对Src激酶信号通路的影响 | 第54-55页 |
·IRTKS的泛素化修饰 | 第55-57页 |
·MDM2促进IRTKS的降解 | 第56页 |
·MDM2能多聚泛素化IRTKS | 第56-57页 |
·磷酸化的IRTKS更加稳定 | 第57-58页 |
·Src使IRTKS更加稳定 | 第57-58页 |
·IRTKS的磷酸化抑制其泛素化降解 | 第58页 |
·讨论 | 第58-62页 |
参考文献 | 第62-66页 |
致谢 | 第66页 |