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重组蛋白包涵体变复性过程优化及折叠机制探索

摘要第1-6页
Abstract第6-10页
第一章 文献综述第10-29页
   ·包涵体形成及定义第10-11页
     ·包涵体的形成第10页
     ·包涵体的定义第10页
     ·包涵体的形成机制第10-11页
   ·常规的包涵体单变复性操作第11-13页
     ·包涵体的提取第12页
     ·包涵体的溶解第12-13页
     ·包涵体的复性第13页
   ·包涵体双变复性研究基础第13-19页
     ·包涵体双变复性操作流程第13-15页
     ·包涵体双变复性应用及数据分析第15-19页
   ·蛋白质折叠机制研究第19-29页
     ·蛋白质折叠理论基础第19-20页
     ·蛋白质折叠监控常用方法第20-29页
第二章 增强型绿色荧光蛋白(Enhanced Green Fluorescent Protein,EGFP)变复性过程优化第29-39页
   ·GFP介绍第29-32页
   ·材料与方法第32-36页
     ·试剂第32页
     ·仪器第32页
     ·菌株与序列第32-33页
     ·EGFP的表达第33页
     ·EGFP包涵体双变复性流程第33-34页
     ·EGFP包涵体单变复性流程第34-35页
     ·EGFP纯化过程第35-36页
     ·EGFP荧光检测第36页
   ·结果与讨论第36-39页
第三章 神经元限制性沉默因子/抑制元素1沉默转录因子蛋白的DNA结合结构域(NRSF/REST DNA Binding Domain,DBD)变复性过程优化第39-46页
   ·DBD介绍第39-40页
   ·材料与方法第40-43页
     ·试剂第40页
     ·仪器第40-41页
     ·菌株与序列第41页
     ·包涵体双变复性过程第41-43页
     ·DBD纯化方法第43页
   ·结果与讨论第43-46页
第四章 巨噬细胞金属弹性蛋白酶催化区域(Matrix Metal Proteinases-12,MMP-12)变复性过程优化第46-56页
   ·MMPs(Matrix Metal Proteinases)介绍第46-48页
     ·金属基质蛋白酶第46-47页
     ·MMP-12介绍第47-48页
   ·材料与方法第48-54页
     ·试剂第48-49页
     ·仪器第49页
     ·菌株与序列第49-50页
     ·MMP-12包涵体表达第50-51页
     ·MMP-12包涵体双变复性流程第51-52页
     ·MMP-12纯化过程第52-53页
     ·MMP-12酶活测定实验第53-54页
   ·结果与讨论第54-56页
第五章 MMP-12再折叠过程监控第56-62页
   ·蛋白质折叠监控常用方法第56-57页
     ·NMR监控蛋白质折叠理论基础第56页
     ·荧光法的理论基础第56页
     ·圆二色光谱(Circular dichroism简称CD)理论基础第56页
     ·ANS荧光探针法的理论基础第56-57页
   ·材料与方法第57-59页
     ·试剂第57页
     ·仪器第57页
     ·~(15)N标记的MMP-12的HSQC谱图采集第57-58页
     ·色氨酸荧光光谱法第58页
     ·圆二色光谱测定第58-59页
     ·ANS结合实验第59页
   ·结果与讨论第59-62页
     ·HSQC谱图第59-60页
     ·色氨酸荧光吸收结果第60页
     ·圆二色光谱测定结果第60-61页
     ·ANS荧光探针实验第61-62页
第六章 论文总结第62-64页
展望第64-65页
参考文献第65-73页
致谢第73页

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