摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-29页 |
·包涵体形成及定义 | 第10-11页 |
·包涵体的形成 | 第10页 |
·包涵体的定义 | 第10页 |
·包涵体的形成机制 | 第10-11页 |
·常规的包涵体单变复性操作 | 第11-13页 |
·包涵体的提取 | 第12页 |
·包涵体的溶解 | 第12-13页 |
·包涵体的复性 | 第13页 |
·包涵体双变复性研究基础 | 第13-19页 |
·包涵体双变复性操作流程 | 第13-15页 |
·包涵体双变复性应用及数据分析 | 第15-19页 |
·蛋白质折叠机制研究 | 第19-29页 |
·蛋白质折叠理论基础 | 第19-20页 |
·蛋白质折叠监控常用方法 | 第20-29页 |
第二章 增强型绿色荧光蛋白(Enhanced Green Fluorescent Protein,EGFP)变复性过程优化 | 第29-39页 |
·GFP介绍 | 第29-32页 |
·材料与方法 | 第32-36页 |
·试剂 | 第32页 |
·仪器 | 第32页 |
·菌株与序列 | 第32-33页 |
·EGFP的表达 | 第33页 |
·EGFP包涵体双变复性流程 | 第33-34页 |
·EGFP包涵体单变复性流程 | 第34-35页 |
·EGFP纯化过程 | 第35-36页 |
·EGFP荧光检测 | 第36页 |
·结果与讨论 | 第36-39页 |
第三章 神经元限制性沉默因子/抑制元素1沉默转录因子蛋白的DNA结合结构域(NRSF/REST DNA Binding Domain,DBD)变复性过程优化 | 第39-46页 |
·DBD介绍 | 第39-40页 |
·材料与方法 | 第40-43页 |
·试剂 | 第40页 |
·仪器 | 第40-41页 |
·菌株与序列 | 第41页 |
·包涵体双变复性过程 | 第41-43页 |
·DBD纯化方法 | 第43页 |
·结果与讨论 | 第43-46页 |
第四章 巨噬细胞金属弹性蛋白酶催化区域(Matrix Metal Proteinases-12,MMP-12)变复性过程优化 | 第46-56页 |
·MMPs(Matrix Metal Proteinases)介绍 | 第46-48页 |
·金属基质蛋白酶 | 第46-47页 |
·MMP-12介绍 | 第47-48页 |
·材料与方法 | 第48-54页 |
·试剂 | 第48-49页 |
·仪器 | 第49页 |
·菌株与序列 | 第49-50页 |
·MMP-12包涵体表达 | 第50-51页 |
·MMP-12包涵体双变复性流程 | 第51-52页 |
·MMP-12纯化过程 | 第52-53页 |
·MMP-12酶活测定实验 | 第53-54页 |
·结果与讨论 | 第54-56页 |
第五章 MMP-12再折叠过程监控 | 第56-62页 |
·蛋白质折叠监控常用方法 | 第56-57页 |
·NMR监控蛋白质折叠理论基础 | 第56页 |
·荧光法的理论基础 | 第56页 |
·圆二色光谱(Circular dichroism简称CD)理论基础 | 第56页 |
·ANS荧光探针法的理论基础 | 第56-57页 |
·材料与方法 | 第57-59页 |
·试剂 | 第57页 |
·仪器 | 第57页 |
·~(15)N标记的MMP-12的HSQC谱图采集 | 第57-58页 |
·色氨酸荧光光谱法 | 第58页 |
·圆二色光谱测定 | 第58-59页 |
·ANS结合实验 | 第59页 |
·结果与讨论 | 第59-62页 |
·HSQC谱图 | 第59-60页 |
·色氨酸荧光吸收结果 | 第60页 |
·圆二色光谱测定结果 | 第60-61页 |
·ANS荧光探针实验 | 第61-62页 |
第六章 论文总结 | 第62-64页 |
展望 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-73页 |
致谢 | 第73页 |