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湖北省牛瑟氏泰勒虫的分子进化分析及分子iELISA诊断方法的建立

目录第1-7页
中文摘要第7-9页
Abstract第9-11页
缩略语表第11-13页
第一章 国内外牛泰勒虫病的研究进展第13-25页
   ·牛泰勒虫病的病原学第13-18页
     ·病原的分类第13-15页
     ·泰勒虫形态学及超微结构第15-16页
     ·泰勒虫的核酸组成特点第16-17页
     ·泰勒虫主要的抗原分子第17-18页
   ·流行病学第18-19页
     ·泰勒虫病的传播媒介蜱第18页
     ·泰勒虫病的流行情况第18-19页
     ·诊断方法第19-21页
     ·病原学诊断第19-20页
     ·血清学诊断第20-21页
   ·预防措施第21-25页
     ·药物预防第21-22页
     ·免疫预防第22-25页
第二章 牛瑟氏泰勒虫p33/p23基因的克隆及分子进化分析第25-49页
   ·研究的目的意义第25页
   ·材料与方法第25-30页
     ·试验材料第25-27页
     ·试验方法第27-30页
   ·结果与分析第30-47页
     ·牛瑟氏泰勒虫p33/p23基因的PCR扩增、克隆及序列测定第30-42页
     ·五株泰勒虫的p33基因序列与其相关序列的比较分析及系统发生树的建立第42-44页
     ·p33、p23两蛋白抗原性及等电点的预测第44-47页
   ·讨论第47-49页
第三章 牛瑟氏泰勒虫p33/p23基因的原核表达第49-71页
   ·研究的目的意义第49页
   ·试验材料第49-52页
     ·质粒与菌株第49-50页
     ·主要药品及试剂第50-51页
     ·主要试剂及溶液的配制第51-52页
   ·试验方法第52-55页
     ·重组表达质粒的构建及鉴定第52-53页
     ·重组表达质粒在BL21-CodonPlus中的诱导表达第53页
     ·最佳诱导表达条件的确定第53页
     ·表达产物存在形式的检测第53页
     ·可溶性表达产物的提取第53-54页
     ·不溶性表达产物(包涵体)的提取和复性第54页
     ·SDS-PAGE电泳第54页
     ·Western-blot试验第54-55页
   ·结果与分析第55-71页
     ·pGEX-KG-p33与pGEX-KG-p23重组表达质粒的构建及原核表达第55-62页
     ·pET-28a-p33与pET-28a-p23两种重组表达质粒的构建及原核表达第62-71页
第四章 牛泰勒虫病分子间接ELISA诊断方法的建立及初步应用第71-101页
   ·研究的目的意义第71-76页
     ·材料与方法第71-72页
     ·试验方法第72-76页
   ·结果与分析第76-96页
     ·酶标反应板均一性的测定第76页
     ·GST-p33和GST-p23两种融合蛋白ELISA方法的建立第76-78页
     ·His-p33和His-p23分子间接ELISA诊断方法的建立第78-88页
     ·间接ELISA的特异性试验第88-90页
     ·His-p33/p23间接ELISA的重复性检测第90-92页
     ·His-p33/p23间接ELISA敏感性试验第92页
     ·His-p33间接ELISA和His-p23间接ELISA检测牛体内瑟氏泰勒虫特异性抗体的水平第92-94页
     ·His-p33和His-p23包被ELISA板的保质期试验第94页
     ·His-p33和His-p23两种蛋白间接ELISA方法的临床初步应用第94-95页
     ·His-p33、His-p23两种蛋白单独包被的ELISA与两种蛋白混合后包被进行ELISA试验的比较第95页
     ·His-p33间接ELISA/His-p23间接ELISA方法与本实验室所建立的牛泰勒虫特异性PCR诊断方法的比较第95-96页
   ·讨论第96-99页
   ·小结第99-101页
结论第101-102页
参考文献第102-109页
致谢第109-110页
附录1第110页

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