| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 英文缩略词 | 第10-16页 |
| 引言 | 第16-17页 |
| 1 文献综述 | 第17-36页 |
| ·造血干细胞 | 第17-28页 |
| ·定义、分类及来源 | 第17页 |
| ·临床应用及存在的问题 | 第17页 |
| ·造血干细胞体外扩增的研究现状 | 第17-18页 |
| ·人工神经网络 | 第18-21页 |
| ·造血干细胞体外扩增的影响因素 | 第21-28页 |
| ·造血干细胞体外培养的评价指标 | 第28页 |
| ·脐带血来源间充质干细胞 | 第28-30页 |
| ·定义及特征 | 第28-29页 |
| ·临床应用及存在的问题 | 第29页 |
| ·脐带血来源间充质干细胞分离培养的研究现状 | 第29-30页 |
| ·造血干细胞与间充质干细胞的共培养 | 第30-35页 |
| ·临床应用价值 | 第30页 |
| ·研究现状及存在的问题 | 第30页 |
| ·共培养模式 | 第30-31页 |
| ·海藻酸钙-壳聚糖(Alginate chitosan,AC)胶珠 | 第31-35页 |
| ·本文的选题依据和研究内容 | 第35-36页 |
| 2 神经网络模型对造血干细胞体外扩增的评价与培养条件的优化 | 第36-49页 |
| ·引言 | 第36页 |
| ·模型建立 | 第36-45页 |
| ·网络的输入与输出 | 第36-37页 |
| ·网络结构 | 第37-38页 |
| ·输入输出参数的量化 | 第38-41页 |
| ·神经网络的训练与预测 | 第41-42页 |
| ·神经网络预测结果的极差、方差分析 | 第42-45页 |
| ·计算结果与讨论 | 第45-48页 |
| ·神经网络模型的训练与预测结果 | 第45-47页 |
| ·各影响因素的显著性分析 | 第47-48页 |
| ·小结 | 第48-49页 |
| 3 神经网络模型预测结果的实验验证 | 第49-74页 |
| ·引言 | 第49页 |
| ·实验仪器与材料 | 第49-52页 |
| ·实验仪器与设备 | 第49-51页 |
| ·药品与试剂 | 第51-52页 |
| ·实验动物与脐带血 | 第52页 |
| ·实验方法 | 第52-59页 |
| ·UCB-MNCs的分离 | 第52页 |
| ·UCB-CD34~+细胞的流式分选 | 第52页 |
| ·兔骨髓MSCs的原代与继代培养 | 第52-53页 |
| ·AC胶珠制备参数的优化 | 第53-55页 |
| ·最佳制备工艺条件下AC胶珠的通透性实验 | 第55-56页 |
| ·AC胶珠包埋兔骨MSCs支持UCB-NCs扩增的培养条件优化 | 第56页 |
| ·验证实验设计方法 | 第56-57页 |
| ·RWVB的操作方法 | 第57页 |
| ·细胞培养与检测方法 | 第57-58页 |
| ·CFU-Cs集落培养 | 第58-59页 |
| ·CD34~+细胞的流式细胞仪分析 | 第59页 |
| ·统计方法 | 第59页 |
| ·结果与讨论 | 第59-73页 |
| ·AC胶珠的最佳制备工艺 | 第59-63页 |
| ·最佳制备工艺条件下AC胶珠的通透性 | 第63-64页 |
| ·AC胶珠内兔骨髓MSCs支持UCB-NCs扩增的最佳培养条件 | 第64-66页 |
| ·验证实验1、2:UCB-HSCs在RWVB及T形瓶内的扩增 | 第66-68页 |
| ·验证实验3、4:UCB-MNCs与兔骨髓MSCs在6孔板及T形瓶内的间接共培养 | 第68-70页 |
| ·验证实验5、6:UCB-CD34~+细胞在转瓶及6孔板内的扩增 | 第70-72页 |
| ·验证实验结果与神经网络模型预测结果的比较 | 第72-73页 |
| ·小结 | 第73-74页 |
| 4 脐带血来源间充质干细胞原代培养条件的优化 | 第74-90页 |
| ·引言 | 第74页 |
| ·实验仪器与材料 | 第74-75页 |
| ·实验仪器与设备 | 第74页 |
| ·药品与试剂 | 第74-75页 |
| ·脐带血 | 第75页 |
| ·实验方法 | 第75-79页 |
| ·UCB-MNCs的分离 | 第75页 |
| ·正交实验设计 | 第75-77页 |
| ·UCB-MSCs培养条件优化后的原代、继代培养 | 第77-78页 |
| ·UCB-MSCs的免疫表型检测 | 第78页 |
| ·UCB-MSCs的多向诱导分化 | 第78-79页 |
| ·统计方法 | 第79页 |
| ·结果 | 第79-87页 |
| ·影响UCB-MSCs体外培养的关键因素 | 第79-81页 |
| ·影响UCB-MSCs体外培养的细胞因子种类 | 第81-83页 |
| ·IL-3、GM-CSF细胞因子的适宜用量 | 第83-85页 |
| ·培养细胞的免疫表型分析 | 第85-86页 |
| ·培养细胞的多向分化潜能分析 | 第86-87页 |
| ·讨论 | 第87-89页 |
| ·小结 | 第89-90页 |
| 5 脐带血来源造血干细胞与间充质干细胞的共培养研究 | 第90-107页 |
| ·引言 | 第90页 |
| ·实验仪器与材料 | 第90-91页 |
| ·实验仪器与设备 | 第90-91页 |
| ·药品与试剂 | 第91页 |
| ·脐带血、脂肪组织 | 第91页 |
| ·实验方法 | 第91-94页 |
| ·UCB-MNCs的分离 | 第91页 |
| ·脂肪干细胞的分离、培养及鉴定 | 第91页 |
| ·ADSCs在AC胶珠内的包埋 | 第91-92页 |
| ·GCSC微载体的预处理 | 第92页 |
| ·静态条件下共培养UCB-HSCs与UCB-MSCs | 第92页 |
| ·反应器条件下共培养UCB-HSCs与UCB-MSCs | 第92-93页 |
| ·UCB-HSCs与UCB-MSCs的流式细胞仪分析 | 第93页 |
| ·CFU-Cs集落培养 | 第93页 |
| ·UCB-MSCs的多向诱导分化 | 第93页 |
| ·UCB-MSCs的扫描电镜观察 | 第93-94页 |
| ·AC胶珠内ADSCs的死活鉴定 | 第94页 |
| ·统计方法 | 第94页 |
| ·结果 | 第94-104页 |
| ·NCs的扩增 | 第94-95页 |
| ·UCB-HSCs和UCB-MSCs的扩增 | 第95-98页 |
| ·CFU-Cs的扩增 | 第98-99页 |
| ·粘附在GCSC微载体上的细胞的免疫表型分析 | 第99-100页 |
| ·粘附在GCSC微载体上细胞的多向分化潜能分析 | 第100-102页 |
| ·UCB-MSCs在GCSC微载体上的形态观察 | 第102页 |
| ·包被在AC胶珠内基质细胞的活力 | 第102-104页 |
| ·讨论 | 第104-106页 |
| ·小结 | 第106-107页 |
| 结论 | 第107-108页 |
| 工作展望 | 第108-109页 |
| 创新点摘要 | 第109-110页 |
| 参考文献 | 第110-123页 |
| 附录A 神经网络模拟计算数据 | 第123-135页 |
| 附录B 神经网络模拟计算数据的说明 | 第135-137页 |
| 附录C 神经网络模拟计算程序 | 第137-142页 |
| 攻读博士学位期间发表学术论文情况 | 第142-144页 |
| 致谢 | 第144-146页 |