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脐带血干细胞体外培养条件优化与共培养研究

摘要第1-7页
Abstract第7-10页
英文缩略词第10-16页
引言第16-17页
1 文献综述第17-36页
   ·造血干细胞第17-28页
     ·定义、分类及来源第17页
     ·临床应用及存在的问题第17页
     ·造血干细胞体外扩增的研究现状第17-18页
     ·人工神经网络第18-21页
     ·造血干细胞体外扩增的影响因素第21-28页
     ·造血干细胞体外培养的评价指标第28页
   ·脐带血来源间充质干细胞第28-30页
     ·定义及特征第28-29页
     ·临床应用及存在的问题第29页
     ·脐带血来源间充质干细胞分离培养的研究现状第29-30页
   ·造血干细胞与间充质干细胞的共培养第30-35页
     ·临床应用价值第30页
     ·研究现状及存在的问题第30页
     ·共培养模式第30-31页
     ·海藻酸钙-壳聚糖(Alginate chitosan,AC)胶珠第31-35页
   ·本文的选题依据和研究内容第35-36页
2 神经网络模型对造血干细胞体外扩增的评价与培养条件的优化第36-49页
   ·引言第36页
   ·模型建立第36-45页
     ·网络的输入与输出第36-37页
     ·网络结构第37-38页
     ·输入输出参数的量化第38-41页
     ·神经网络的训练与预测第41-42页
     ·神经网络预测结果的极差、方差分析第42-45页
   ·计算结果与讨论第45-48页
     ·神经网络模型的训练与预测结果第45-47页
     ·各影响因素的显著性分析第47-48页
   ·小结第48-49页
3 神经网络模型预测结果的实验验证第49-74页
   ·引言第49页
   ·实验仪器与材料第49-52页
     ·实验仪器与设备第49-51页
     ·药品与试剂第51-52页
     ·实验动物与脐带血第52页
   ·实验方法第52-59页
     ·UCB-MNCs的分离第52页
     ·UCB-CD34~+细胞的流式分选第52页
     ·兔骨髓MSCs的原代与继代培养第52-53页
     ·AC胶珠制备参数的优化第53-55页
     ·最佳制备工艺条件下AC胶珠的通透性实验第55-56页
     ·AC胶珠包埋兔骨MSCs支持UCB-NCs扩增的培养条件优化第56页
     ·验证实验设计方法第56-57页
     ·RWVB的操作方法第57页
     ·细胞培养与检测方法第57-58页
     ·CFU-Cs集落培养第58-59页
     ·CD34~+细胞的流式细胞仪分析第59页
     ·统计方法第59页
   ·结果与讨论第59-73页
     ·AC胶珠的最佳制备工艺第59-63页
     ·最佳制备工艺条件下AC胶珠的通透性第63-64页
     ·AC胶珠内兔骨髓MSCs支持UCB-NCs扩增的最佳培养条件第64-66页
     ·验证实验1、2:UCB-HSCs在RWVB及T形瓶内的扩增第66-68页
     ·验证实验3、4:UCB-MNCs与兔骨髓MSCs在6孔板及T形瓶内的间接共培养第68-70页
     ·验证实验5、6:UCB-CD34~+细胞在转瓶及6孔板内的扩增第70-72页
     ·验证实验结果与神经网络模型预测结果的比较第72-73页
   ·小结第73-74页
4 脐带血来源间充质干细胞原代培养条件的优化第74-90页
   ·引言第74页
   ·实验仪器与材料第74-75页
     ·实验仪器与设备第74页
     ·药品与试剂第74-75页
     ·脐带血第75页
   ·实验方法第75-79页
     ·UCB-MNCs的分离第75页
     ·正交实验设计第75-77页
     ·UCB-MSCs培养条件优化后的原代、继代培养第77-78页
     ·UCB-MSCs的免疫表型检测第78页
     ·UCB-MSCs的多向诱导分化第78-79页
     ·统计方法第79页
   ·结果第79-87页
     ·影响UCB-MSCs体外培养的关键因素第79-81页
     ·影响UCB-MSCs体外培养的细胞因子种类第81-83页
     ·IL-3、GM-CSF细胞因子的适宜用量第83-85页
     ·培养细胞的免疫表型分析第85-86页
     ·培养细胞的多向分化潜能分析第86-87页
   ·讨论第87-89页
   ·小结第89-90页
5 脐带血来源造血干细胞与间充质干细胞的共培养研究第90-107页
   ·引言第90页
   ·实验仪器与材料第90-91页
     ·实验仪器与设备第90-91页
     ·药品与试剂第91页
     ·脐带血、脂肪组织第91页
   ·实验方法第91-94页
     ·UCB-MNCs的分离第91页
     ·脂肪干细胞的分离、培养及鉴定第91页
     ·ADSCs在AC胶珠内的包埋第91-92页
     ·GCSC微载体的预处理第92页
     ·静态条件下共培养UCB-HSCs与UCB-MSCs第92页
     ·反应器条件下共培养UCB-HSCs与UCB-MSCs第92-93页
     ·UCB-HSCs与UCB-MSCs的流式细胞仪分析第93页
     ·CFU-Cs集落培养第93页
     ·UCB-MSCs的多向诱导分化第93页
     ·UCB-MSCs的扫描电镜观察第93-94页
     ·AC胶珠内ADSCs的死活鉴定第94页
     ·统计方法第94页
   ·结果第94-104页
     ·NCs的扩增第94-95页
     ·UCB-HSCs和UCB-MSCs的扩增第95-98页
     ·CFU-Cs的扩增第98-99页
     ·粘附在GCSC微载体上的细胞的免疫表型分析第99-100页
     ·粘附在GCSC微载体上细胞的多向分化潜能分析第100-102页
     ·UCB-MSCs在GCSC微载体上的形态观察第102页
     ·包被在AC胶珠内基质细胞的活力第102-104页
   ·讨论第104-106页
   ·小结第106-107页
结论第107-108页
工作展望第108-109页
创新点摘要第109-110页
参考文献第110-123页
附录A 神经网络模拟计算数据第123-135页
附录B 神经网络模拟计算数据的说明第135-137页
附录C 神经网络模拟计算程序第137-142页
攻读博士学位期间发表学术论文情况第142-144页
致谢第144-146页

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