| 摘要 | 第1-3页 |
| ABSTRACT | 第3-4页 |
| 中文文摘 | 第4-6页 |
| 目录 | 第6-9页 |
| 1 绪论 | 第9-21页 |
| ·课题背景 | 第9-12页 |
| ·产木聚糖酶的微生物 | 第9页 |
| ·木聚糖酶的分类 | 第9-10页 |
| ·木聚糖酶的酶学特性 | 第10-11页 |
| ·木聚糖酶的催化机制 | 第11-12页 |
| ·木聚糖酶的产生及其影响因素 | 第12-13页 |
| ·木聚糖酶的纯化方法 | 第13页 |
| ·木聚糖酶的分子生物学 | 第13-16页 |
| ·催化结构域 | 第13-14页 |
| ·纤维素结合结构域 | 第14页 |
| ·木聚糖结合结构域 | 第14-15页 |
| ·热稳定结构域 | 第15页 |
| ·连接序列 | 第15页 |
| ·基因簇 | 第15-16页 |
| ·木聚糖酶基因的克隆与表达 | 第16-17页 |
| ·木聚糖酶基因的改良 | 第17-18页 |
| ·木聚糖酶的应用 | 第18-19页 |
| ·木聚糖酶在饲料工业中的应用 | 第18页 |
| ·木聚糖酶在造纸工业中的应用 | 第18页 |
| ·木聚糖酶在食品、酿酒工业中的应用 | 第18-19页 |
| ·木聚糖酶在能源方面及其它方面的应用 | 第19页 |
| ·我国木聚糖酶的研究现状和展望 | 第19-20页 |
| ·本课题研究意义和前景 | 第20-21页 |
| 2 黑曲霉木聚糖酶的分离纯化 | 第21-39页 |
| ·实验材料 | 第21-23页 |
| ·菌种 | 第21页 |
| ·主要药品,试剂及耗材 | 第21页 |
| ·常用仪器 | 第21-22页 |
| ·应用软件 | 第22页 |
| ·常用培养基和缓冲液 | 第22-23页 |
| ·实验方法 | 第23-30页 |
| ·酶活测定方法 | 第23-24页 |
| ·酶液蛋白含量测定 | 第24页 |
| ·固体发酵木聚糖酶粗酶液的获得 | 第24页 |
| ·固体粗酶液浸提条件的优化 | 第24-25页 |
| ·木聚糖酶的分离纯化 | 第25-29页 |
| ·Xylanase I N端10个氨基酸测序 | 第29-30页 |
| ·结果与分析 | 第30-39页 |
| ·黑曲霉固体发酵木聚糖酶浸提条件的优化 | 第30-31页 |
| ·硫酸铵沉淀预实验 | 第31-32页 |
| ·粗酶的分离纯化 | 第32-37页 |
| ·Xylanase I N端10个氨基酸序列 | 第37-39页 |
| 3 黑曲霉木聚糖酶酶学特性研究 | 第39-45页 |
| ·实验材料及仪器 | 第39页 |
| ·木聚糖酶酶学特性研究 | 第39-40页 |
| ·温度对木聚糖酶活性的影响 | 第39页 |
| ·木聚糖酶的热稳定性 | 第39页 |
| ·pH对酶活性的影响 | 第39页 |
| ·酸碱稳定性 | 第39页 |
| ·金属离子对酶活性的影响 | 第39-40页 |
| ·木聚糖酶的糖含量 | 第40页 |
| ·酶Km及Vmax的测定 | 第40页 |
| ·结果与分析 | 第40-45页 |
| ·温度对酶活性的影响 | 第40-41页 |
| ·酶的热稳定性 | 第41页 |
| ·pH对酶活性的影响 | 第41-42页 |
| ·酸碱稳定性 | 第42-43页 |
| ·金属离子对酶活性的影响 | 第43-44页 |
| ·木聚糖酶的糖含量 | 第44页 |
| ·酶Km及Vmax的测定 | 第44-45页 |
| 4 黑曲霉木聚糖酶基因克隆 | 第45-53页 |
| ·实验材料 | 第45-46页 |
| ·菌种 | 第45页 |
| ·主要药品、试剂及耗材 | 第45页 |
| ·常用仪器 | 第45页 |
| ·应用软件 | 第45-46页 |
| ·常用培养基和缓冲液 | 第46页 |
| ·实验方法 | 第46-50页 |
| ·寡聚核苷酸引物设计 | 第46-47页 |
| ·黑曲霉总RNA的提取 | 第47页 |
| ·RNA电泳 | 第47页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第47-48页 |
| ·目的基因片断扩增 | 第48页 |
| ·目的条带的分离纯化 | 第48-49页 |
| ·外源DNA的重组、连接转化与筛选 | 第49-50页 |
| ·实验结果与分析 | 第50-53页 |
| ·黑曲霉RNA的提取 | 第50页 |
| ·黑曲霉木聚糖酶基因的克隆 | 第50-51页 |
| ·酶切鉴定 | 第51页 |
| ·测序 | 第51-53页 |
| 5 结果与讨论 | 第53-57页 |
| ·黑曲霉木聚糖酶的分离纯化 | 第53-54页 |
| ·黑曲霉木聚糖酶酶的理化性质 | 第54-55页 |
| ·金属离子对黑曲霉木聚糖酶的影响 | 第55页 |
| ·黑曲霉木聚糖酶的基因克隆 | 第55-56页 |
| ·结论 | 第56-57页 |
| 附录1 英文缩略词表 | 第57-59页 |
| 附录2 XYLANASE I N端10个氨基酸测序图谱 | 第59-63页 |
| 参考文献 | 第63-67页 |
| 攻读学位期间承担的科研任务与主要成果 | 第67-69页 |
| 致谢 | 第69-71页 |
| 个人简历 | 第71-73页 |