中文摘要 | 第1-9页 |
英文摘要 | 第9-11页 |
1 前言 | 第11-17页 |
·蜜蜂抗氧化基因研究进展 | 第11-12页 |
·蜜蜂体内的主要抗氧化酶 | 第12-13页 |
·甲硫氨酸亚砜还原酶(Msrs)的研究进展 | 第13-16页 |
·甲硫氨酸亚砜还原酶(Msrs)家族分类 | 第13-14页 |
·甲硫氨酸亚砜还原酶A(MsrA)的催化还原机制 | 第14-15页 |
·MsrA 的功能研究 | 第15-16页 |
·本课题研究的目的及意义 | 第16-17页 |
2 材料与方法 | 第17-36页 |
·实验材料 | 第17-19页 |
·动物材料 | 第17页 |
·动物材料的处理 | 第17页 |
·菌株与质粒 | 第17页 |
·酶与各种生化试剂 | 第17页 |
·PCR 引物及反应条件 | 第17-19页 |
·实验方法 | 第19-35页 |
·蜜蜂总RNA 的提取及检测 | 第19页 |
·cDNA 全长序列的获得 | 第19-23页 |
·蜜蜂总DNA 的提取及纯化 | 第23-24页 |
·AccMsrA 全长基因组序列的获得 | 第24页 |
·AccMsrA基因启动子的分离 | 第24-27页 |
·目的片段的回收 | 第27-28页 |
·目的片段与克隆载体的连接 | 第28页 |
·大肠杆菌感受态细胞制备 | 第28页 |
·大肠杆菌感受态细胞的转化 | 第28-29页 |
·质粒DNA 的提取 | 第29页 |
·对重组质粒的鉴定 | 第29-30页 |
·实时荧光定量PCR 检测目的基因的表达 | 第30-31页 |
·原核表达及抗体制备 | 第31-34页 |
·免疫组化 | 第34-35页 |
·数据处理 | 第35-36页 |
3 结果与分析 | 第36-50页 |
·中华蜜蜂甲硫氨酸亚砜还原酶A 基因的分离 | 第36-38页 |
·中华蜜蜂RNA 的提取及反转录 | 第36页 |
·AccMsrA 中间片段的分离 | 第36-37页 |
·AccMsrA 5′片段的分离 | 第37页 |
·AccMsrA 3′片段的分离 | 第37-38页 |
·AccMsrA 全长cDNA 的分离 | 第38页 |
·AccMsrA 的序列分析 | 第38-45页 |
·AccMsrA 的全长cDNA 分析 | 第38-41页 |
·AccMsrA 编码的蛋白质序列分析 | 第41-42页 |
·AccMsrA 基因组及启动子序列分析 | 第42-45页 |
·AccMsrA 基因在不同发育阶段及组织中的表达特性分析 | 第45-46页 |
·AccMsrA 基因在不同环境胁迫下的表达分析 | 第46-47页 |
·AccMsrA 基因的原核诱导表达及抗体制备 | 第47-48页 |
·6 日龄幼虫体内AccMsrA 蛋白定位 | 第48-50页 |
4 讨论 | 第50-53页 |
·AccMsrA 基因的序列特征 | 第50-51页 |
·AccMsrA 可能参抵抗环境胁迫 | 第51页 |
·AccMsrA 可能参与发育调节 | 第51-53页 |
5 结论 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-60页 |
致谢 | 第60-61页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第61-62页 |
硕士学位论文内容简介及自评 | 第62页 |