| 中文摘要 | 第1-4页 |
| 英文摘要 | 第4-9页 |
| 插图和附表清单 | 第9-13页 |
| 缩略语表 | 第13-14页 |
| 1 引言 | 第14-47页 |
| ·微量元素 Zn 的研究进展 | 第14-21页 |
| ·Zn 在动物体内的分布与代谢 | 第15-16页 |
| ·Zn 的生物学功能 | 第16-20页 |
| ·微量元素 Zn 在基因表达中的作用 | 第20-21页 |
| ·胰岛素样生长因子 I（IGF-I）及其受体（IGF-IR）的研究 | 第21-28页 |
| ·胰岛素样生长因子 I（IGF-I） | 第21-22页 |
| ·IGF-I 的生理功能 | 第22-23页 |
| ·IGF- I 受体（IGF-IR） | 第23-24页 |
| ·IGF- I 与泌乳的关系 | 第24页 |
| ·IGFs 蛋白生物学特性 | 第24-25页 |
| ·IGFs 与泌乳 | 第25-26页 |
| ·影响 GH-IGF-Ⅰ联合作用的因素 | 第26-27页 |
| ·类胰岛素生长因子的营养调控 | 第27-28页 |
| ·乳蛋白的研究进展 | 第28-35页 |
| ·乳中蛋白质的合成 | 第28页 |
| ·乳蛋白合成的营养调控 | 第28-33页 |
| ·生物活性物质与泌乳调控 | 第33-35页 |
| ·应用分子遗传学研究泌乳生理 | 第35页 |
| ·Stat5 对乳蛋白合成的影响 | 第35-36页 |
| ·Stat5 | 第35-36页 |
| ·Stat5 的作用 | 第36页 |
| ·动物细胞培养研究 | 第36-45页 |
| ·动物细胞培养的发展简史 | 第36-38页 |
| ·细胞培养方法的研究 | 第38-39页 |
| ·乳腺细胞的研究 | 第39-45页 |
| ·论文研究思路 | 第45-47页 |
| ·立题依据 | 第45页 |
| ·研究内容 | 第45页 |
| ·试验技术路线 | 第45-47页 |
| 2 标准山羊β-酪蛋白的制备 | 第47-49页 |
| ·试验材料 | 第47页 |
| ·山羊酪蛋白的制备 | 第47页 |
| ·山羊β-酪蛋白的分离纯化 | 第47-48页 |
| ·SDS-PAGE 检测 | 第48页 |
| ·结果与分析 | 第48-49页 |
| ·β-酪蛋白纯化 | 第48-49页 |
| ·SDS-PAGE 检测结果 | 第49页 |
| ·小结 | 第49页 |
| 3 山羊β-酪蛋白抗体的制备和含量的测定 | 第49-53页 |
| ·试验材料与仪器设备 | 第50页 |
| ·佐剂抗原的制备 | 第50页 |
| ·兔抗羊β-酪蛋白血清的制备 | 第50页 |
| ·血清效价的测定 | 第50-51页 |
| ·β-酪蛋白的 ELISA 检测 | 第51-52页 |
| ·棋盘滴定法选择一抗的最适反应浓度 | 第51页 |
| ·标准曲线制作 | 第51页 |
| ·双抗体夹心ELISA操作程序 | 第51-52页 |
| ·结果与分析 | 第52页 |
| ·血清效价的测定结果 | 第52页 |
| ·用棋盘滴定法确定的反应一抗的适宜作用浓度 | 第52页 |
| ·β-酪蛋白的标准曲线 | 第52页 |
| ·小结 | 第52-53页 |
| 4 山羊乳腺上皮细胞的分离培养 | 第53-63页 |
| ·试验材料与仪器设备 | 第54-55页 |
| ·乳腺组织来源 | 第55页 |
| ·细胞培养及传代 | 第55-57页 |
| ·培养液的准备 | 第55页 |
| ·培养及传代 | 第55页 |
| ·细胞形态观察及表达产物电泳分析 | 第55页 |
| ·乳腺上皮细胞生长影响因素的研究 | 第55-57页 |
| ·统计分析 | 第57页 |
| ·结果与分析 | 第57-62页 |
| ·细胞表达产物电泳分析结果 | 第57页 |
| ·乳腺上皮细胞生长曲线 | 第57-58页 |
| ·不同的胶原对细胞生长的影响 | 第58页 |
| ·胎牛血清（FBS）对乳腺上皮细胞生长的影响 | 第58-59页 |
| ·上皮生长因子（EGF）的影响结果 | 第59-60页 |
| ·胰岛素对乳腺上皮细胞生长的影响 | 第60页 |
| ·氢化可的松对乳腺上皮细胞生长的影响 | 第60-61页 |
| ·胰岛素-转铁蛋白硒钠（ITS）对乳腺上皮细胞生长的影响 | 第61-62页 |
| ·生长因子的不同配比对乳腺上皮细胞生长的影响 | 第62页 |
| ·小结 | 第62-63页 |
| 5 微量元素 Zn 对不同时期乳腺上皮细胞生长的影响 | 第63-66页 |
| ·试验材料与仪器设备 | 第63-64页 |
| ·培养基的配制及细胞培养 | 第64页 |
| ·统计分析 | 第64页 |
| ·结果与分析 | 第64-65页 |
| ·小结 | 第65-66页 |
| 6 Zn 对不同时期乳腺上皮细胞 IGF-Ⅰ及β-酪蛋白分泌量的影响 | 第66-73页 |
| ·材料与方法 | 第66-67页 |
| ·试验材料与仪器设备 | 第66页 |
| ·试验方法 | 第66-67页 |
| ·结果与分析 | 第67-72页 |
| ·不同浓度的 Zn 对 IGF-Ⅰ分泌量的影响 | 第67-68页 |
| ·不同浓度的 Zn 对β-酪蛋白分泌量的影响 | 第68页 |
| ·不同时期乳腺上皮细胞代谢物的比较 | 第68-72页 |
| ·小结 | 第72-73页 |
| 7 Zn 对乳腺上皮细胞 IGF-ⅠmRNA 及 IGF-ⅠR mRNA 表达量的影响 | 第73-87页 |
| ·试验材料与仪器设备 | 第73页 |
| ·山羊乳腺上皮细胞总 RNA 的提取和定量 | 第73-76页 |
| ·引物设计 | 第73-74页 |
| ·半定量 RT-PCR 方法的建立 | 第74-76页 |
| ·PCR 产物的检测和定量 | 第76页 |
| ·统计分析 | 第76页 |
| ·结果与分析 | 第76-87页 |
| ·细胞总 RNA 的提取 | 第76-77页 |
| ·退火温度对 PCR 结果的影响 | 第77-78页 |
| ·引物比例对 PCR 结果的影响 | 第78-80页 |
| ·循环次数对 PCR 结果的影响 | 第80-81页 |
| ·乳腺上皮细胞 IGF-ⅠR mRNA 表达量的影响 | 第81-83页 |
| ·乳腺上皮细胞 IGF-ⅠmRNA 表达量的影响 | 第83-85页 |
| ·Zn 对不同时期乳腺上皮细胞 IGF-Ⅰ和 IGF-ⅠRmRNA 表达量的影响 | 第85-87页 |
| ·小结 | 第87页 |
| 8 IGF-Ⅰ对 IGF-ⅠR mRNA 的表达及 Stat5 活性的影响研究 | 第87-89页 |
| ·试验材料 | 第87页 |
| ·样品准备 | 第87-88页 |
| ·IGF-ⅠR mRNA 的表达 | 第88页 |
| ·探针设计及 Stat5 活性测定 | 第88页 |
| ·结果与分析 | 第88-89页 |
| ·IGF-ⅠR 的 PCR 结果 | 第88页 |
| ·Stat5 活性检测结果 | 第88-89页 |
| ·小结 | 第89页 |
| 9 各因素间相关性研究 | 第89-92页 |
| ·孕期乳腺上皮细胞各影响因素相关性比较结果 | 第90-91页 |
| ·泌乳期乳腺上皮细胞各因素相关性比较结果 | 第91-92页 |
| ·小结 | 第92页 |
| 10 总体讨论 | 第92-99页 |
| ·矿物营养元素 Zn 对山羊β-酪蛋白的分泌有一定的影响 | 第92-93页 |
| ·激素与营养对乳蛋白的合成及分泌存在共同作用 | 第93页 |
| ·Stat5-DNA 结合活性影响酪蛋白合成及分泌 | 第93-96页 |
| ·微量元素 Zn 对山羊β-酪蛋白合成及分泌的信号传导假说 | 第96-99页 |
| 11 总体结论 | 第99页 |
| 12 创新点 | 第99-100页 |
| 13 展望 | 第100-101页 |
| 致谢 | 第101-102页 |
| 参考文献 | 第102-113页 |
| 附录 | 第113-125页 |
| 作者简介 | 第125-126页 |
| 附件 | 第126-163页 |
