| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-40页 |
| 1.Resistin研究进展 | 第14-26页 |
| ·Resistin的发现 | 第14-15页 |
| ·Resistin基因结构 | 第15页 |
| ·Resistin蛋白质结构特征 | 第15-18页 |
| ·Resistin的组织分布 | 第18页 |
| ·Resistin样分子家族(RELMs) | 第18-20页 |
| ·Resistin的生物学功能 | 第20-26页 |
| ·Resistin与肥胖相关的胰岛素抵抗 | 第20-23页 |
| ·Resistin与炎症反应 | 第23-25页 |
| ·Resistin对葡萄糖的调控作用 | 第25-26页 |
| ·小结 | 第26页 |
| 2.脂联素及其受体研究进展 | 第26-38页 |
| ·脂联素的发现 | 第26-27页 |
| ·脂联素基因 | 第27-28页 |
| ·脂联素蛋白质结构多态性 | 第28-30页 |
| ·体内脂联素的表达调控 | 第30-32页 |
| ·脂联素的功能 | 第32-36页 |
| ·脂联素对葡萄糖和脂代谢的调控作用 | 第32-34页 |
| ·脂联素与动脉粥样硬化 | 第34-36页 |
| ·脂联素受体 | 第36-38页 |
| ·小结 | 第38页 |
| 3.研究目的和意义 | 第38-40页 |
| 第二章 猪抵抗素基因的克隆和表达研究 | 第40-64页 |
| 1.前言 | 第40-41页 |
| 2.实验材料与试剂 | 第41-45页 |
| ·实验材料 | 第41页 |
| ·实验动物 | 第41页 |
| ·样品采集 | 第41页 |
| ·菌株及质粒 | 第41页 |
| ·主要仪器、试剂及溶液配制 | 第41-45页 |
| ·主要仪器 | 第41-42页 |
| ·主要试剂 | 第42页 |
| ·主要溶液配制 | 第42-45页 |
| 3.实验方法 | 第45-53页 |
| ·血液白细胞的分离与纯化 | 第45-46页 |
| ·血液白细胞总DNA提取 | 第46页 |
| ·血液白细胞／组织样品总RNA提取 | 第46页 |
| ·总RNA纯化 | 第46-47页 |
| ·总RNA含量及纯度鉴定 | 第47页 |
| ·SDS-PAGE和Western杂交 | 第47页 |
| ·目标片段的扩增与纯化 | 第47-50页 |
| ·引物设计 | 第47页 |
| ·全长resistin cDNA的扩增 | 第47-50页 |
| ·全长resistin DNA的扩增 | 第50页 |
| ·猪resistin mRNA的组织分布 | 第50-51页 |
| ·兔抗猪resistin多克隆抗血清的制备 | 第51-53页 |
| ·原核表达载体的构建与鉴定 | 第51页 |
| ·重组蛋白质表达 | 第51页 |
| ·包涵体提取与重组蛋白质的纯化和鉴定 | 第51-52页 |
| ·抗血清的制备 | 第52页 |
| ·抗血清的效价检测(ELISA法检测) | 第52页 |
| ·抗血清的Western blotting检测 | 第52-53页 |
| ·抗血清的纯化 | 第53页 |
| ·猪血液样品中天然resistin蛋白的检测 | 第53页 |
| ·数据统计分析 | 第53页 |
| 4.结果与分析 | 第53-62页 |
| ·猪resistin全长cDNA的克隆 | 第53-55页 |
| ·猪resistin全长基因的克隆 | 第55-56页 |
| ·猪resistin mRNA的组织分布 | 第56-58页 |
| ·PCR扩增指数期循环数的确定 | 第56-57页 |
| ·组织表达谱分析 | 第57-58页 |
| ·兔抗猪resistin多克隆抗血清的制备 | 第58-60页 |
| ·表达载体的构建与鉴定 | 第58-59页 |
| ·重组蛋白质的表达 | 第59页 |
| ·重组蛋白质的纯化与鉴定 | 第59-60页 |
| ·兔抗猪多克隆抗血清的检测 | 第60-61页 |
| ·猪血液样品中天然resistin蛋白的检测 | 第61-62页 |
| 5.讨论 | 第62-64页 |
| 第三章 猪脂联素及其受体基因的克隆、表达及染色体定位研究 | 第64-84页 |
| 1.前言 | 第64页 |
| 2.实验材料与试剂 | 第64-65页 |
| ·实验动物和样品采集 | 第64页 |
| ·主要仪器、试剂及溶液配制 | 第64-65页 |
| 3.实验方法 | 第65-68页 |
| ·总DNA提取 | 第65页 |
| ·总RNA提取和纯化 | 第65页 |
| ·猪脂联素及其受体基因片段的扩增 | 第65页 |
| ·引物设计 | 第65页 |
| ·PCR扩增条件 | 第65页 |
| ·猪脂联素及其受体的染色体定位 | 第65-66页 |
| ·引物设计 | 第65-66页 |
| ·PCR扩增 | 第66页 |
| ·数据分析 | 第66页 |
| ·猪脂联素及其受体基因的组织分布 | 第66-67页 |
| ·猪脂联素受体1基因内含子的扩增 | 第67-68页 |
| 4.结果与分析 | 第68-80页 |
| ·猪脂联素及其受体基因片段的分离、序列分析与鉴定 | 第68-72页 |
| ·猪脂联素及其受体基因片段的分离 | 第68页 |
| ·基因组片段的序列分析与鉴定 | 第68-72页 |
| ·猪脂联素及其受体基因染色体定位结果分析 | 第72页 |
| ·猪脂联素及其受体基因的组织分布 | 第72-75页 |
| ·猪脂联素受体1基因组片段的扩增及其基因组结构分析 | 第75-80页 |
| 5.讨论 | 第80-84页 |
| 结论与创新点 | 第84-86页 |
| 1.结论 | 第84-85页 |
| 2.创新点 | 第85-86页 |
| 参考文献 | 第86-103页 |
| 研究生期间论文发表情况 | 第103-104页 |
| 致谢 | 第104页 |