| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-11页 |
| 英文缩略表 | 第11-17页 |
| 第一章 文献综述 | 第17-31页 |
| ·植物倍半萜类化合物的研究状况 | 第17-21页 |
| ·倍半萜的化学结构、性质和功能 | 第17-18页 |
| ·倍半萜在植物中的生物合成和代谢 | 第18-21页 |
| ·提高植物中倍半萜化合物的努力和尝试 | 第21页 |
| ·法尼烯焦磷酸合成酶的研究进展 | 第21-23页 |
| ·FPS 的生物学特征 | 第21-22页 |
| ·FPS 的催化机理 | 第22-23页 |
| ·FPS 的表达调控 | 第23页 |
| ·植物来源的 fps 的功能及其在基因工程方面的应用 | 第23页 |
| ·蚜虫与植物的互作 | 第23-26页 |
| ·蚜虫取食与其对植物的危害 | 第24页 |
| ·蚜虫造成的植物危害症状 | 第24页 |
| ·植物对蚜虫的防御机制 | 第24-25页 |
| ·蚜虫与其它昆虫的互作 | 第25-26页 |
| ·蚜虫抗性评价方法 | 第26-28页 |
| ·室内抗蚜性评价方法 | 第26-27页 |
| ·田间抗蚜性评价方法 | 第27-28页 |
| ·小麦抗蚜工程 | 第28-29页 |
| ·麦蚜的危害 | 第28页 |
| ·小麦抗蚜虫育种 | 第28-29页 |
| ·选题意义及技术路线 | 第29-31页 |
| 第二章 材料和方法 | 第31-37页 |
| ·植物材料 | 第31页 |
| ·常用试剂 | 第31页 |
| ·基因全长 cDNA 序列和基因组 DNA 序列的分离和克隆 | 第31-33页 |
| ·叶片 DNA 的提取 | 第31页 |
| ·Total RNA 提取 | 第31页 |
| ·RT-PCR | 第31-32页 |
| ·PCR 产物的克隆及鉴定 | 第32-33页 |
| ·Real-time RT-PCR | 第33-34页 |
| ·SDS-PAGE 电泳 | 第34-35页 |
| ·试剂配制 | 第34-35页 |
| ·SDS-PAGE 方法 | 第35页 |
| ·农杆菌转化 | 第35-37页 |
| ·菌株 | 第35页 |
| ·农杆菌电击感受态的制备 | 第35-36页 |
| ·电击转化农杆菌 | 第36-37页 |
| 第三章 小麦法尼烯焦磷酸合成酶基因 Tafps 克隆及染色体定位 | 第37-49页 |
| ·引言 | 第37页 |
| ·材料与方法 | 第37-47页 |
| ·材料 | 第37页 |
| ·菌株及载体 | 第37页 |
| ·本实验所用到的引物 | 第37-38页 |
| ·实验方法 | 第38页 |
| ·结果与分析 | 第38-47页 |
| ·讨论 | 第47-49页 |
| ·小麦科农 199 中存在六个 Tafps 成员 | 第48页 |
| ·六个 Tafps 成员分别定位于不同染色体上 | 第48-49页 |
| 第四章 基因表达特性分析 | 第49-55页 |
| ·引言 | 第49页 |
| ·材料与方法 | 第49-51页 |
| ·材料 | 第49页 |
| ·方法 | 第49-51页 |
| ·结果与分析 | 第51-53页 |
| ·Tafps 基因在不同时期、不同器官的表达特点 | 第51-52页 |
| ·Tafps 基因在蚜虫诱导后的表达特点 | 第52-53页 |
| ·讨论 | 第53-55页 |
| ·Tafps1、Tafps2 在小麦中的表达具有时空特异性 | 第53-54页 |
| ·Tafps1、Tafps2 的表达量受蚜虫诱导 | 第54-55页 |
| 第五章 TaFPS-B1 和 TaFPS-B2 酶活性鉴定 | 第55-62页 |
| ·引言 | 第55页 |
| ·材料与方法 | 第55-58页 |
| ·材料 | 第55页 |
| ·方法 | 第55-58页 |
| ·结果与分析 | 第58-61页 |
| ·载体构建及融合蛋白表达细胞的获得 | 第58页 |
| ·蛋白诱导表达、提取及 FPLC 纯化 | 第58-60页 |
| ·TaFPS 的酶活性鉴定 | 第60-61页 |
| ·讨论 | 第61-62页 |
| ·原核表达系统 | 第61页 |
| ·利用 GC-MS 对蛋白功能的验证 | 第61-62页 |
| 第六章 Tafps 基因亚细胞定位 | 第62-67页 |
| ·引言 | 第62页 |
| ·材料与方法 | 第62-64页 |
| ·材料 | 第62-63页 |
| ·方法 | 第63-64页 |
| ·结果与分析 | 第64-66页 |
| ·载体构建 | 第64-65页 |
| ·亚细胞定位 | 第65-66页 |
| ·讨论 | 第66-67页 |
| ·Tafps 的定位于胞质中 | 第66页 |
| ·小麦中的 Tafps 可能存在前导肽 | 第66-67页 |
| 第七章 利用转基因拟南芥验证 Tafps 的功能 | 第67-88页 |
| ·引言 | 第67页 |
| ·材料与方法 | 第67-73页 |
| ·材料 | 第67-69页 |
| ·方法 | 第69-73页 |
| ·结果与分析 | 第73-86页 |
| ·拟南芥突变体的检测 | 第73-74页 |
| ·载体构建 | 第74-76页 |
| ·转基因拟南芥的筛选及分子检测 | 第76-78页 |
| ·转基因拟南芥挥发物的分析 | 第78-83页 |
| ·4通道嗅觉仪对蚜虫取食行为的影响 | 第83-85页 |
| ·转基因拟南芥的杂交 | 第85-86页 |
| ·讨论 | 第86-88页 |
| ·野生型拟南芥中过表达 Tafps 可促进倍半萜烯化合物的产生 | 第86页 |
| ·过表达 Tafps 的拟南芥对蚜虫具有驱避作用 | 第86-87页 |
| ·TaFPS-B1 的活性高于 TaFPS-B2 | 第87-88页 |
| 第八章 结论及总结 | 第88-90页 |
| ·普通小麦 Tafps 同源克隆与染色体定位 | 第88页 |
| ·Tafps 基因在小麦中表达特点分析 | 第88页 |
| ·TaFPS-B1 与 TaFPS-B2 酶活性鉴定及亚细胞定位 | 第88页 |
| ·Tafps-B1 与 Tafps-B2 在拟南芥中功能鉴定与分析 | 第88-90页 |
| 第九章 创新点、正在进行和拟进一步开展的工作 | 第90-91页 |
| ·本研究的创新点 | 第90页 |
| ·正在进行和拟进一步开展的工作 | 第90-91页 |
| ·毛细管电泳检测 Tafps 的拷贝数 | 第90页 |
| ·烟草瞬时表达验证是否可以提高 EβF 释放量 | 第90页 |
| ·BSMW VIGS 介导的 Tafps 基因沉默及其对蚜虫取食行为的影响 | 第90-91页 |
| 参考文献 | 第91-101页 |
| 附录 | 第101-109页 |
| 致谢 | 第109-110页 |
| 作者简介 | 第110页 |
