| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-12页 |
| 缩略词 | 第12-13页 |
| 第一章 前言 | 第13-32页 |
| ·课题的提出 | 第13-14页 |
| ·前人研究进展 | 第14-31页 |
| ·植物体细胞杂交研究概况 | 第14-20页 |
| ·植物原生质体的融合方法 | 第15-16页 |
| ·原生质体的融合方式 | 第16页 |
| ·体细胞杂交研究的转变趋势 | 第16-18页 |
| ·杂种细胞的选择 | 第18-19页 |
| ·体细胞杂种植株的鉴定 | 第19-20页 |
| ·马铃薯体细胞杂交研究概况 | 第20-23页 |
| ·马铃薯的原生质体培养研究 | 第20-21页 |
| ·马铃薯的体细胞杂交研究 | 第21-23页 |
| ·马铃薯体细胞杂交技术的评价 | 第23页 |
| ·体细胞杂交与植物抗病种质的创造 | 第23-26页 |
| ·茄科植物 | 第24-25页 |
| ·十字花科植物 | 第25页 |
| ·禾谷类植物 | 第25-26页 |
| ·柑橘类植物 | 第26页 |
| ·体细胞杂交与马铃薯的抗病育种 | 第26-28页 |
| ·体细胞杂交与马铃薯抗晚疫病育种 | 第26-27页 |
| ·体细胞杂交与马铃薯抗病毒育种 | 第27页 |
| ·体细胞杂交与马铃薯抗青枯病育种 | 第27-28页 |
| ·马铃薯青枯病与抗青枯病种质 | 第28-31页 |
| ·我国青枯菌菌系分类和特点 | 第28-29页 |
| ·青枯菌的侵染和致病因素 | 第29-30页 |
| ·马铃薯抗青枯病育种现状 | 第30-31页 |
| ·本研究的目的和内容 | 第31-32页 |
| 第二章 材料与方法 | 第32-37页 |
| ·植物材料 | 第32页 |
| ·试验方法 | 第32-37页 |
| ·实生籽的消毒和培养 | 第32页 |
| ·材料的繁殖 | 第32页 |
| ·原生质体的分离纯化和培养 | 第32-33页 |
| ·原生质体培养各阶段的培养基组成 | 第33-34页 |
| ·DNA提取 | 第34-35页 |
| ·马铃薯基因组DNA小量抽提法 | 第34-35页 |
| ·马铃薯基因组DNA大量抽提法 | 第35页 |
| ·DNA的浓度和质量检测 | 第35页 |
| ·原生质体融合 | 第35页 |
| ·体细胞杂种鉴定 | 第35-36页 |
| ·体细胞杂种的青枯病抗性鉴定 | 第36页 |
| ·体细胞杂种的无性系变异检测 | 第36-37页 |
| 第三章 马铃薯叶肉原生质体融合及其植株再生 | 第37-55页 |
| ·前言 | 第37-38页 |
| ·材料与方法 | 第38-41页 |
| ·试验材料 | 第38页 |
| ·试管苗培养过程中AgNO_3浓度设置 | 第38页 |
| ·原生质体的分离、纯化及融合 | 第38-40页 |
| ·原生质体的分离和纯化 | 第38-39页 |
| ·原生质体活力检测 | 第39页 |
| ·原生质体化学融合方法及参数选择 | 第39页 |
| ·电融合方法及参数优化 | 第39-40页 |
| ·融合细胞的培养 | 第40-41页 |
| ·愈伤组织增殖培养基中NAA浓度设置 | 第40页 |
| ·芽分化培养基中的激素浓度搭配 | 第40-41页 |
| ·原生质体再生植株编号 | 第41页 |
| ·结果与分析 | 第41-54页 |
| ·原生质体的分离 | 第41-44页 |
| ·不同酶液浓度及组合对原生质体产量和活力的影响 | 第41-43页 |
| ·不同基因型的最佳酶解时间差异 | 第43-44页 |
| ·AgNO_3浓度对试管苗原生质体产量和质量的影响 | 第44页 |
| ·马铃薯原生质体融合 | 第44-49页 |
| ·电融合过程 | 第44-45页 |
| ·交流电场(AC)及其作用时间对双核融合率的影响 | 第45-46页 |
| ·直流脉冲电压及其脉冲次数对融合率的影响 | 第46页 |
| ·原生质体的PEG融合 | 第46-47页 |
| ·FA作用时间对融合效率的影响 | 第47-48页 |
| ·不同细胞密度对双核融合率的影响 | 第48-49页 |
| ·两种融合方式与融合子培养效果比较 | 第49页 |
| ·融合细胞的培养及其植株再生 | 第49-52页 |
| ·不同培养阶段的培养方法和相应的形态特征 | 第50-51页 |
| ·不同分化培养基对愈伤组织的分化影响 | 第51-52页 |
| ·不同亲本组合原生质体融合培养进程 | 第52-54页 |
| ·小结 | 第54-55页 |
| 第四章 体细胞杂种分析 | 第55-73页 |
| ·前言 | 第55-56页 |
| ·材料与方法 | 第56-59页 |
| ·试验材料 | 第56页 |
| ·PCR反应体系与程序 | 第56页 |
| ·试管苗的大棚盆栽 | 第56-57页 |
| ·杂种植株的形态学及农艺性状观察 | 第57页 |
| ·再生植株的倍性分析 | 第57页 |
| ·流式细胞仪检测DNA含量 | 第57页 |
| ·根尖染色体数目观察 | 第57页 |
| ·杂种植株的叶绿体SSR引物分析 | 第57-59页 |
| ·叶绿体SSR引物合成 | 第57-58页 |
| ·叶绿体基因组PCR扩增反应体系与程序 | 第58-59页 |
| ·结果与分析 | 第59-71页 |
| ·再生植株的RAPD鉴定 | 第59-62页 |
| ·RAPD引物筛选 | 第59页 |
| ·特异引物在杂种植株鉴定中的稳定性 | 第59-60页 |
| ·再生植株的RAPD标记鉴定结果 | 第60-62页 |
| ·体细胞杂种植株的倍性分析 | 第62-63页 |
| ·流式细胞仪检测DNA含量 | 第62页 |
| ·不同倍性水平植株的根尖染色体计数分析 | 第62-63页 |
| ·体细胞杂种的叶绿体SSR分析 | 第63-64页 |
| ·分化植株起源的愈伤组织杂合性 | 第64-70页 |
| ·体细胞杂种植株的形态学和农艺性状观察 | 第70-71页 |
| ·小结 | 第71-73页 |
| 第五章 叶绿体差异片段克隆及双亲叶绿体类型杂种的叶绿体传递稳定性 | 第73-82页 |
| ·前言 | 第73-74页 |
| ·材料与方法 | 第74-76页 |
| ·试验材料 | 第74页 |
| ·亲本差异片段的回收 | 第74-75页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第75页 |
| ·差异片段的A-T克隆转化测序 | 第75-76页 |
| ·连接反应 | 第75-76页 |
| ·转化 | 第76页 |
| ·转化子的筛选与鉴定 | 第76页 |
| ·双亲叶绿体类型杂种其叶绿体在继代培养中的传递稳定性 | 第76页 |
| ·结果与分析 | 第76-80页 |
| ·两亲本叶绿体差异片段的克隆 | 第76-78页 |
| ·亲本叶绿体差异片段的测序与比较 | 第78-79页 |
| ·双亲叶绿体类型杂种植株的叶绿体在继代繁殖中的传递 | 第79-80页 |
| ·小结 | 第80-82页 |
| 第六章 体细胞杂种的青枯病抗性评价 | 第82-93页 |
| ·前言 | 第82-83页 |
| ·材料与方法 | 第83-85页 |
| ·试验材料 | 第83页 |
| ·青枯菌的分离 | 第83-84页 |
| ·青枯菌小种鉴定 | 第84页 |
| ·青枯菌的室内接种鉴定 | 第84-85页 |
| ·结果与分析 | 第85-91页 |
| ·青枯菌的小种鉴定结果 | 第85页 |
| ·杂种植株及其亲本的青枯菌接种鉴定结果 | 第85-91页 |
| ·体细胞杂种植株的抗性水平及其抗性分布 | 第86-88页 |
| ·部分体细胞杂种植株抗病性水平的方差分析 | 第88-89页 |
| ·体细胞杂种植株的抗性水平与其倍性和叶绿体类型的关系 | 第89-91页 |
| ·小结 | 第91-93页 |
| 第七章 体细胞杂种植株的遗传变异分析 | 第93-102页 |
| ·前言 | 第93页 |
| ·材料与方法 | 第93-94页 |
| ·试验材料 | 第93页 |
| ·随机引物的PCR扩增 | 第93-94页 |
| ·数据分析 | 第94页 |
| ·结果与分析 | 第94-97页 |
| ·引物筛选 | 第94页 |
| ·不同群体的RAPD分析 | 第94-95页 |
| ·马铃薯实生籽原生质体融合杂种的遗传变异分析 | 第95-96页 |
| ·实生籽亲本材料间的遗传变异分析 | 第96页 |
| ·马铃薯叶肉细胞融合杂种植株的遗传变异分析 | 第96-97页 |
| ·小结 | 第97-102页 |
| 第八章 讨论 | 第102-112页 |
| ·马铃薯体细胞杂交技术 | 第102-104页 |
| ·分离原生质体的外植体材料 | 第102-103页 |
| ·诱导原生质体融合的方法 | 第103-104页 |
| ·马铃薯叶肉原生质体融合体系 | 第104页 |
| ·体细胞杂种的RAPD鉴定 | 第104-105页 |
| ·体细胞杂种的生长优势及其应用 | 第105-106页 |
| ·体细胞杂种植株的倍性水平 | 第106-108页 |
| ·体细胞杂种的叶绿体类型 | 第108-109页 |
| ·体细胞杂种植株的青枯病抗性 | 第109-110页 |
| ·体细胞杂交技术的展望 | 第110-112页 |
| 参考文献 | 第112-127页 |
| 图版和说明 | 第127-142页 |
| 致谢 | 第142页 |
