摘要 | 第1-11页 |
第一章 前言 | 第11-46页 |
一、药用真菌中具有抗肿瘤活性的凝集素 | 第11-21页 |
·凝集素( Lectin) | 第11-21页 |
·真菌凝集素的理化性质 | 第12-15页 |
·真菌凝集素的N端序列及cDNA序列 | 第15-17页 |
·真菌凝集素的抗肿瘤活性 | 第17-19页 |
·植物和细菌凝集素的抗肿瘤活性 | 第19-21页 |
二、半乳糖结合凝集素(Galectin) | 第21-35页 |
·Galectin的非传统分泌方式 | 第22-23页 |
·Galectin的多价性 | 第23-25页 |
·其他 Galectin相关蛋白 | 第25-27页 |
·Galectin-10亚族 | 第25页 |
·GRIFIN | 第25-27页 |
·Galectin在细胞生长和凋亡方面的功能 | 第27-35页 |
·Galectin-1 | 第28-30页 |
·Galectin-3 | 第30-32页 |
·Galectin-7 | 第32-33页 |
·Galectin-9 | 第33页 |
·Galectin-12 | 第33-35页 |
三、Ras蛋白、法尼基转移酶和法尼基转移酶抑制剂 | 第35-45页 |
·Ras蛋白 | 第35-40页 |
·Ras的翻译后修饰 | 第35-37页 |
·Ras的上游信号途径 | 第37-38页 |
·Ras的下游信号途径 | 第38-40页 |
·肿瘤中的异常 Ras信号 | 第40页 |
·法尼基转移酶 | 第40-43页 |
·法尼基转移酶抑制剂(Inhibitor of Farnesyltransferase,FTI) | 第43-45页 |
研究背景 | 第45页 |
研究目的 | 第45-46页 |
第二章 杨树菇凝集素AAL cDNA的克隆和表达 | 第46-69页 |
·引言 | 第46-47页 |
·材料和方法 | 第47-61页 |
·菌株,质粒和试剂 | 第47-59页 |
实验中所用到的溶液及试剂 | 第59-61页 |
·研究结果 | 第61-66页 |
·AAL的cDNA的扩增和鉴定 | 第61-62页 |
·AAL的cDNA的测序 | 第62-63页 |
·AAL原核表达载体pET28-aal的构建和鉴定 | 第63-66页 |
·讨论 | 第66-69页 |
第三章 AAL相互作用肽的筛选、法尼基转移酶基因的克隆和相互作用的研究 | 第69-90页 |
·引言 | 第69-70页 |
·材料和方法 | 第70-80页 |
·质粒,文库,抗体和试剂 | 第70页 |
·噬菌体文库筛选 | 第70-73页 |
·细胞学实验技术 | 第73-75页 |
·细胞转染 | 第75-76页 |
·酵母双杂交系统 | 第76-78页 |
·免疫共沉淀 | 第78-79页 |
·Western Blot | 第79-80页 |
·实验结果 | 第80-87页 |
·15肽库的筛选结果 | 第80页 |
·法尼基转移酶 α亚基的克隆和鉴定 | 第80-82页 |
·质粒pGBK-aal的构建和鉴定 | 第82-83页 |
·pHM6-aal和pCMV-FTase α的构建和鉴定 | 第83-85页 |
·AAL和 FTase α在酵母中的相互作用 | 第85-86页 |
·AAL与 FTase α在 Hela细胞中的相互作用 | 第86-87页 |
·讨论 | 第87-90页 |
第四章 AAL作为 FTI而诱导细胞凋亡 | 第90-101页 |
·引言 | 第90-93页 |
·材料和方法 | 第93-96页 |
·实时定量 PCR | 第93-94页 |
·间接免疫荧光试验 | 第94页 |
·流式细胞术分析 | 第94-95页 |
·PI染色及流式细胞仪分析 | 第95页 |
·膜蛋白的提取方法 | 第95-96页 |
·实验结果 | 第96-99页 |
·AAL影响了Ras在膜上的定位 | 第96页 |
·AAL上调了Fas的转录 | 第96-97页 |
·AAL上调了Fas的表达量 | 第97-98页 |
·AAL诱导了HeLa细胞的凋亡 | 第98-99页 |
·讨论 | 第99-101页 |
参考文献 | 第101-111页 |
研究总结和创新点 | 第111-112页 |
硕士研究生期间发表的论文 | 第112-113页 |
致谢 | 第113-114页 |