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生物亲和性核壳纳米颗粒研究及其在生物/医学中的应用

中文摘要第1-4页
Abstract第4-12页
缩略词表第12-14页
第一章 绪论第14-31页
   ·纳米技术概述第14-17页
   ·生物纳米技术第17-28页
     ·生物纳米技术研究的必要性第18-20页
     ·生物纳米技术研究的历史与现状第20-28页
       ·基于纳米颗粒的超灵敏检测方法第21-25页
       ·在生物分离中的应用第25-26页
       ·基于纳米颗粒构建新型非病毒基因载体第26-27页
       ·在制药以及药物靶向性输送中的应用第27-28页
       ·纳米传感器应用于单个细胞物化指数的实时、原位检测第28页
   ·开展本研究的目的与意义以及本论文拟开展的研究工作第28-31页
     ·开展本研究的目的与意义第28-29页
     ·本论文拟开展的研究工作第29-31页
第二章 核壳纳米颗粒制备及其机理研究第31-56页
   ·前言第31-32页
   ·核壳纳米颗粒的制备原理第32-34页
     ·成核原理第32-33页
     ·包壳原理第33-34页
   ·实验部分第34-38页
     ·化学试剂和仪器第34-35页
     ·核壳纳米颗粒的制备方法第35-36页
       ·内核材料的准备第35页
       ·核壳纳米颗粒的成核和包壳第35-36页
       ·核壳纳米颗粒的收集第36页
     ·核壳纳米颗粒制备机理研究--考查影响核壳纳米颗粒形成的因素第36-37页
       ·亲水性内核材料对核壳纳米颗粒形成的影响第36页
       ·壳材料对核壳纳米颗粒形成的影响第36-37页
       ·包壳层数对核壳纳米颗粒形成的影响第37页
     ·核壳纳米颗粒形成的表征第37-38页
       ·内核材料泄露实验第37页
       ·核壳纳米颗粒的大小、形貌检测第37-38页
       ·核壳纳米颗粒的Zeta电位滴定第38页
   ·结果与讨论第38-54页
     ·核壳纳米颗粒形成的影响因素第38-44页
       ·二氧化硅包壳层数的影响第38-39页
       ·内核材料分子量的影响第39页
       ·内核材料电性的影响第39-42页
       ·壳材料电性对核壳纳米颗粒形成的影响第42-44页
       ·形成稳定的核壳纳米颗粒的机理第44页
     ·核壳纳米颗粒制备技术的发展第44-54页
       ·二氧化硅壳类纳米颗粒制备技术第45-46页
       ·氨基化硅壳类纳米颗粒同步制备技术第46-47页
       ·改变分子构型制备核壳纳米颗粒第47-49页
       ·通过壳材料与内核材料的共价键合发展的核壳纳米颗粒制备技术第49-51页
       ·不同尺寸的核壳纳米颗粒制备技术第51-53页
       ·核壳纳米颗粒制备技术的放大第53-54页
   ·结论第54-56页
第三章 核壳纳米颗粒的生物亲和性研究第56-73页
   ·前言第56页
   ·实验部分第56-61页
     ·化学试剂和仪器第56-58页
     ·小白鼠体内的核壳荧光(RuBPY)纳米颗粒的生物亲和性研究第58-59页
       ·核壳荧光(RuBPY)纳米颗粒的注射第58页
       ·血液学与组织学研究第58-59页
     ·核壳纳米颗粒的生物亲和性离体研究--细胞对无机二氧化硅壳类纳米颗粒的敏感性试验第59-61页
       ·COS-7细胞系对SiNP、FSiNP、MSiNP的敏感性试验第59-60页
       ·MCF-7细胞系对SiNP、FSiNP、MSiNP的敏感性试验第60页
       ·HNE1细胞系对FSiNP敏感性试验第60页
       ·人纤维肉瘤细胞系对FSiNP敏感性试验第60-61页
       ·MTT分析方法分析纳米颗粒对细胞的毒性第61页
       ·对细胞进行传代培养并观察细胞形态第61页
   ·结果与讨论第61-72页
     ·小白鼠对核壳荧光纳米颗粒的敏感性第61-67页
       ·核壳荧光纳米颗粒在血液中的运行情况第61-63页
       ·核壳荧光纳米颗粒在不同组织中的分布情况第63-64页
       ·核壳荧光纳米颗粒在小白鼠体内的代谢第64-67页
     ·细胞对无机二氧化硅壳类纳米颗粒的敏感性第67-72页
       ·MTT分析方法检测纳米颗粒对细胞生长的影响第67-70页
       ·对细胞进行传代培养观察纳米颗粒对细胞生长的影响第70-72页
   ·结论第72-73页
第四章 基于生物荧光纳米颗粒的新型荧光标记方法及其在细胞识别和系统性红斑狼疮疾病检测中的应用第73-89页
   ·前言第73-74页
   ·实验部分第74-78页
     ·化学试剂和仪器第74-75页
     ·核壳荧光纳米颗粒的准备与生物修饰第75-76页
     ·核壳生物荧光纳米颗粒的特性检测第76-77页
       ·荧光染料浓度对荧光纳米颗粒荧光强度的影响第76页
       ·核壳荧光纳米颗粒的荧光寿命测量第76页
       ·荧光纳米颗粒内包埋荧光染料分子的估算第76-77页
       ·核壳荧光纳米颗粒的荧光光谱测量第77页
       ·氧气对核壳荧光纳米颗粒荧光强度的影响第77页
       ·核壳荧光纳米颗粒的光漂白性测量第77页
     ·核壳生物荧光纳米颗粒的应用第77-78页
       ·B淋巴细胞的准备第77页
       ·荧光纳米颗粒与B淋巴细胞培育第77页
       ·荧光光谱测量和细胞显微荧光成像第77-78页
   ·结果与讨论第78-87页
     ·核壳生物荧光纳米颗粒的特性第78-83页
       ·荧光染料浓度对荧光纳米颗粒荧光强度的影响第78-79页
       ·核壳荧光纳米颗粒的荧光寿命第79页
       ·荧光纳米颗粒内包埋荧光染料分子数第79-80页
       ·核壳荧光纳米颗粒的荧光光谱特性第80-81页
       ·氧气对核壳荧光纳米颗粒荧光强度的影响第81-82页
       ·核壳荧光纳米颗粒的光漂白性第82-83页
     ·基于生物荧光纳米颗粒的新型荧光标记方法的应用第83-87页
       ·基于生物荧光纳米颗粒的新型荧光标记方法的应用原理第83-84页
       ·生物荧光纳米颗粒对靶细胞的识别第84-85页
       ·基于生物荧光纳米颗粒的荧光标记方法的灵敏度第85-86页
       ·基于生物荧光纳米颗粒的荧光标记方法的光稳定性第86页
       ·基于生物荧光纳米颗粒的荧光标记方法用于系统性红斑狼疮的检测第86-87页
   ·结论第87-89页
第五章 荧光纳米pH传感器应用于单个细胞的pH监测第89-101页
   ·前言第89-90页
   ·实验部分第90-92页
     ·化学试剂和仪器第90-91页
     ·荧光纳米pH传感器的制备第91-92页
   ·结果与讨论第92-100页
     ·基于核壳荧光(FITC-IgG)纳米颗粒pH传感器应用于单个细胞的pH值监测第92-96页
       ·小鼠腹腔巨噬细胞的获取和培养第92页
       ·荧光纳米颗粒与巨噬细胞的培育第92页
       ·荧光纳米颗粒探针对pH的响应第92-93页
       ·基于荧光纳米颗粒的pH探针的稳定性、重现性和可逆性第93-94页
       ·小鼠巨噬细胞对荧光纳米颗粒的吞噬及其细胞内pH值的检测第94-96页
     ·基于双荧光染料的纳米pH传感器应用于单个细胞的pH监测第96-100页
       ·双荧光染料纳米颗粒pH探针的荧光光谱第96页
       ·双荧光染料纳米颗粒探针的光稳定性第96-97页
       ·双荧光染料纳米颗粒pH探针对不同pH缓冲液的响应第97-98页
       ·双荧光染料纳米颗粒pH控针应用于小白鼠单个巨噬细胞pH的测量第98-100页
   ·结论第100-101页
第六章 基于超顺磁性纳米捕获器的生物分离新方法第101-116页
   ·前言第101-102页
   ·实验部分第102-105页
     ·化学试剂和仪器第102-103页
     ·硅壳磁性纳米颗粒的制备第103页
     ·磁性纳米颗粒的特性分析第103页
     ·超顺磁性纳米捕获器应用于葡聚糖的分离第103-104页
       ·应用于分离葡聚糖的超顺磁性纳米捕获器的构建第103页
       ·修饰了伴刀豆球蛋白A的超顺磁性纳米颗粒的检测第103页
       ·伴刀豆球蛋白A修饰的超顺磁性纳米捕获器分离葡聚糖第103-104页
     ·超顺磁性DNA纳米捕获器应用于痕量寡聚核苷酸的分离第104-105页
       ·通过在硅壳磁纳米颗粒表面修饰单链DNA探针构建超顺磁性DNA纳米捕获器第104-105页
       ·超顺磁性DNA纳米捕获器对目标单链DNA的分离第105页
       ·结合在超顺磁性DNA纳米分离器上的目标单链DNA的解离第105页
       ·目标单链DNA分离效果的检测第105页
   ·结果与讨论第105-114页
     ·硅壳磁性纳米颗粒的特性第105-107页
       ·硅壳磁性纳米颗粒的形貌与大小分析第105-106页
       ·硅壳磁纳米颗粒的X-射线衍射分析第106页
       ·磁特性分析第106-107页
       ·二氧化硅外壳对磁核的保护作用第107页
     ·超顺磁性纳米捕获器应用于葡聚糖的分离第107-109页
       ·超顺磁性纳米捕获器分离葡聚糖的原理第107-108页
       ·修饰了伴刀豆球蛋白A的超顺磁性纳米捕获器的荧光光谱第108页
       ·超顺磁性纳米捕获器对葡聚糖的分离第108-109页
     ·超顺磁性DNA纳米捕获器应用于痕量寡聚核苷酸的分离第109-114页
       ·超顺磁性DNA纳米捕获器分离痕量互补寡聚核苷酸的原理第110页
       ·结合了目标单链DNA的DNA纳米捕获器的荧光成像第110-111页
       ·DNA纳米颗粒富集器富集互补单链DNA的荧光光谱检测第111-112页
       ·目标单链DNA的解离第112-114页
       ·DNA纳米捕获器对目标DNA分离的选择性第114页
   ·结论与展望第114-116页
第七章 具酶切保护性的新型非病毒型纳米基因载体第116-135页
   ·前言第116-117页
   ·实验部分第117-121页
     ·化学试剂和仪器第117-119页
     ·PIRGFP质粒DNA的扩增与纯化第119页
     ·氨基化硅壳类纳米颗粒与质粒DNA的结合第119-120页
     ·结合DNA的解离第120页
     ·DNA-纳米颗粒复合物对DNA的保护检测第120-121页
     ·DNA-纳米颗粒复合物对DNA的保护性分析第121页
     ·基于氨基化硅壳纳米颗粒的一类具酶保护性的新型非病毒型基因载体的应用第121页
   ·结果与讨论第121-133页
     ·氨基化硅壳类纳米颗粒结合与富集DNA的原理第121-123页
     ·氨基化硅壳类纳米颗粒与质粒DNA的结合第123-124页
     ·纳米颗粒与DNA结合的表征第124页
     ·氨基化硅壳类纳米颗粒与质粒DNA的结合能力第124-128页
       ·氨基化二氧化硅纳米颗粒与质粒DNA的结合第125页
       ·氨基化硅壳磁性纳米颗粒与质粒DNA的结合第125-128页
     ·氨基化硅壳类纳米颗粒-DNA复合物的解离第128页
     ·氨基化硅壳类纳米颗粒-DNA复合物对DNA的保护性第128-130页
       ·琼脂糖凝胶电泳检测氨基化硅壳类纳米颗粒-DNA复合物对DNA的保护性第128-129页
       ·DNaseI酶作用过的质粒DNA-纳米颗粒复合物中的质粒DNA功能的完整性第129-130页
     ·氨基化硅壳类纳米颗粒-DNA复合物对DNA的保护性分析第130-132页
     ·基于氨基化硅壳类纳米颗粒的新型基因载体在基因转染中的应用第132-133页
   ·结论与展望第133-135页
第八章 基于氨基化二氧化硅纳米颗粒的DNA快速抽提纯化方法第135-145页
   ·前言第135-136页
   ·实验部分第136-138页
     ·化学试剂和仪器第136-137页
     ·肝细胞的裂解第137页
     ·纳米颗粒-DNA复合物的形成和分离第137页
     ·DNA的收集第137-138页
     ·对比实验的设计第138页
     ·基于氨基化二氧化硅纳米颗粒提取DNA的重复使用性第138页
   ·结果与讨论第138-143页
     ·比较三种提取DNA的方法第138-140页
       ·碱裂解后酚-氯仿抽提法第138页
       ·DNA抽提试剂盒法第138-139页
       ·本文所述的氨基化二氧化硅纳米颗粒方法第139页
       ·氨基化二氧化硅纳米颗粒与DNA抽提试剂盒中的树脂颗粒的物理特性比较第139-140页
     ·应用氨基化二氧化硅纳米颗粒抽提DNA第140-143页
       ·氨基化二氧化硅纳米颗粒结合DNA后的zeta电位变化第140-141页
       ·氨基化二氧化硅纳米颗粒提取DNA的效果第141-143页
       ·基于氨基化二氧化硅纳米颗粒提取DNA的重复使用性第143页
   ·结论与展望第143-145页
第九章 结论第145-152页
   ·核壳纳米颗粒的基本特征第145-147页
     ·良好的生物亲和性第145-146页
     ·核壳荧光纳米颗粒的高稳定性第146页
     ·硅壳磁纳米颗粒的超顺磁性第146页
     ·核壳荧光纳米颗粒的高灵敏性第146页
     ·纳米颗粒尺度效应产生的DNaseI酶切保护性第146页
     ·核壳纳米颗粒的生物可修饰性第146-147页
   ·取得主要研究成果第147-150页
     ·在采用微乳液方法制备核壳纳米颗粒的机理研究中取得了突破,并形成了核壳纳米颗粒制备技术第147-148页
     ·利用核壳纳米颗粒的优异特点,开展了基于核壳生物纳米颗粒在生物医学分析中的广泛应用第148-150页
       ·纳米尺度上生物与化学信息的荧光传感第148-149页
       ·发展了基于超顺磁性纳米捕获器的生物分离新方法,分离了葡聚糖、互补ssDNA第149页
       ·发展了基于氨基化硅壳纳米颗粒的新型DNA富集技术第149-150页
   ·本论文研究工作的先进性与创新点第150-152页
致谢第152-154页
参考文献第154-172页
附录第172-174页
 A 作者在攻读学位期间完成的相关论文以及专利题录第172-174页

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