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产志贺毒素大肠杆菌毒素基因敲除及毒力测定的研究

摘要第1-5页
Summary第5-7页
目录第7-9页
外文缩略词表第9-10页
第一部分 文献综述第10-26页
 综述一 产志贺毒素大肠杆菌的概述第10-18页
  1 前言第10-11页
  2 产志贺毒素大肠杆菌的特征第11-12页
  3 产志贺毒素大肠杆菌主要毒力因子及作用机制第12-16页
   ·志贺毒素Ⅱ型变异体(Shiga toxin II variant,Stx2e)第12-14页
     ·Stx2e 的发现第12-13页
     ·Stx2e 的结构及作用机制第13-14页
   ·F18 菌毛第14-16页
     ·F18 菌毛的发现第14页
     ·F18 菌毛的特性及作用机制第14-16页
  4 产志贺毒素大肠杆菌的致病机理第16页
  5 产志贺毒素大肠杆菌的研究意义及主要研究内容第16-18页
 综述二 Red/ET 重组系统第18-26页
  1 引言第18页
  2 Red/ET 重组系统的结构和作用机理第18-20页
   ·Red/ET 重组系统的结构第18-19页
   ·Red/ET 重组系统的作用机理第19-20页
  3 Red/ET 重组系统的应用方式第20-22页
  4 Red/ET 重组系统相关质粒的介绍第22-24页
  5 Red/ET 重组系统在生物科学领域的应用前景第24-26页
第二部分 研究内容第26-47页
 实验一 产志贺毒素大肠杆菌毒素基因的敲除第26-41页
  1 材料和方法第27-35页
   ·材料第27-29页
     ·菌株与质粒第27页
     ·培养基第27-28页
     ·仪器和试剂第28页
     ·PCR 引物第28-29页
   ·方法第29-35页
     ·目的菌株的筛选第29-30页
     ·重组同源臂的 PCR 扩增第30-32页
     ·pRedET 质粒转化入 S451521 目的菌株中第32-33页
     ·携带 pRedET 表达质粒的感受态细胞制备及重组同源臂的电转化第33-34页
     ·卡那霉素抗性基因的消除第34-35页
  2 结果第35-39页
   ·目的菌株的筛选结果第35-36页
     ·药敏试验第35页
     ·菌毛表达的鉴定第35-36页
   ·pRedET 表达质粒电转化结果第36-37页
   ·重组同源臂的 PCR 扩增结果第37页
   ·重组菌的筛选与鉴定结果第37-38页
     ·重组菌的筛选第37-38页
     ·重组菌的鉴定第38页
   ·卡那霉素抗性基因的消除结果第38-39页
  3 讨论第39-41页
 实验二 产志贺毒素大肠杆菌及其志贺毒素 2 型变异体基因缺失株的毒力测定第41-47页
  1 材料与方法第42-43页
   ·材料第42页
     ·菌株第42页
     ·实验动物第42页
     ·培养基及主要试剂第42页
     ·主要器材第42页
   ·方法第42-43页
     ·细菌培养第42-43页
     ·LD50的测定第43页
     ·剖检并观察第43页
     ·细菌的分离培养及毒素基因的鉴定第43页
  2 结果第43-45页
   ·小白鼠临床症状第43-44页
   ·LD50的测定结果第44页
   ·病理变化第44页
   ·细菌的分离鉴定第44-45页
     ·细菌的分离培养结果第44页
     ·毒素基因的鉴定结果第44-45页
   ·原始菌株及 Stx2e 基因缺失株的毒力比较第45页
  3 讨论第45-47页
结论第47-48页
参考文献第48-54页
致谢第54-55页
作者简介第55-56页
导师简介第56-57页

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