摘要 | 第1-5页 |
Summary | 第5-7页 |
目录 | 第7-9页 |
外文缩略词表 | 第9-10页 |
第一部分 文献综述 | 第10-26页 |
综述一 产志贺毒素大肠杆菌的概述 | 第10-18页 |
1 前言 | 第10-11页 |
2 产志贺毒素大肠杆菌的特征 | 第11-12页 |
3 产志贺毒素大肠杆菌主要毒力因子及作用机制 | 第12-16页 |
·志贺毒素Ⅱ型变异体(Shiga toxin II variant,Stx2e) | 第12-14页 |
·Stx2e 的发现 | 第12-13页 |
·Stx2e 的结构及作用机制 | 第13-14页 |
·F18 菌毛 | 第14-16页 |
·F18 菌毛的发现 | 第14页 |
·F18 菌毛的特性及作用机制 | 第14-16页 |
4 产志贺毒素大肠杆菌的致病机理 | 第16页 |
5 产志贺毒素大肠杆菌的研究意义及主要研究内容 | 第16-18页 |
综述二 Red/ET 重组系统 | 第18-26页 |
1 引言 | 第18页 |
2 Red/ET 重组系统的结构和作用机理 | 第18-20页 |
·Red/ET 重组系统的结构 | 第18-19页 |
·Red/ET 重组系统的作用机理 | 第19-20页 |
3 Red/ET 重组系统的应用方式 | 第20-22页 |
4 Red/ET 重组系统相关质粒的介绍 | 第22-24页 |
5 Red/ET 重组系统在生物科学领域的应用前景 | 第24-26页 |
第二部分 研究内容 | 第26-47页 |
实验一 产志贺毒素大肠杆菌毒素基因的敲除 | 第26-41页 |
1 材料和方法 | 第27-35页 |
·材料 | 第27-29页 |
·菌株与质粒 | 第27页 |
·培养基 | 第27-28页 |
·仪器和试剂 | 第28页 |
·PCR 引物 | 第28-29页 |
·方法 | 第29-35页 |
·目的菌株的筛选 | 第29-30页 |
·重组同源臂的 PCR 扩增 | 第30-32页 |
·pRedET 质粒转化入 S451521 目的菌株中 | 第32-33页 |
·携带 pRedET 表达质粒的感受态细胞制备及重组同源臂的电转化 | 第33-34页 |
·卡那霉素抗性基因的消除 | 第34-35页 |
2 结果 | 第35-39页 |
·目的菌株的筛选结果 | 第35-36页 |
·药敏试验 | 第35页 |
·菌毛表达的鉴定 | 第35-36页 |
·pRedET 表达质粒电转化结果 | 第36-37页 |
·重组同源臂的 PCR 扩增结果 | 第37页 |
·重组菌的筛选与鉴定结果 | 第37-38页 |
·重组菌的筛选 | 第37-38页 |
·重组菌的鉴定 | 第38页 |
·卡那霉素抗性基因的消除结果 | 第38-39页 |
3 讨论 | 第39-41页 |
实验二 产志贺毒素大肠杆菌及其志贺毒素 2 型变异体基因缺失株的毒力测定 | 第41-47页 |
1 材料与方法 | 第42-43页 |
·材料 | 第42页 |
·菌株 | 第42页 |
·实验动物 | 第42页 |
·培养基及主要试剂 | 第42页 |
·主要器材 | 第42页 |
·方法 | 第42-43页 |
·细菌培养 | 第42-43页 |
·LD50的测定 | 第43页 |
·剖检并观察 | 第43页 |
·细菌的分离培养及毒素基因的鉴定 | 第43页 |
2 结果 | 第43-45页 |
·小白鼠临床症状 | 第43-44页 |
·LD50的测定结果 | 第44页 |
·病理变化 | 第44页 |
·细菌的分离鉴定 | 第44-45页 |
·细菌的分离培养结果 | 第44页 |
·毒素基因的鉴定结果 | 第44-45页 |
·原始菌株及 Stx2e 基因缺失株的毒力比较 | 第45页 |
3 讨论 | 第45-47页 |
结论 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-54页 |
致谢 | 第54-55页 |
作者简介 | 第55-56页 |
导师简介 | 第56-57页 |