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猪SLA-DRA、SLA-DRB基因的克隆及其在大肠杆菌中的融合表达

摘要第1-8页
Abstract第8-10页
1.文献综述第10-21页
   ·MHC概况第10-15页
     ·MHC概念第10页
     ·MHC的分类第10页
     ·MHC的结构第10-11页
     ·猪主要组织相容性复合物(SLA)Ⅱ类基因的研究进展第11-15页
   ·MHC抗病性的研究进展及其应用第15-17页
     ·HLA与疾病的相关性第15-16页
     ·MHC与疾病易感性第16页
     ·基因座水平的疾病相关性研究第16页
     ·单体型水平的疾病相关性研究第16-17页
   ·猪抗病育种研究现状第17-19页
     ·机体抗病性的免疫遗传基础第17页
     ·猪疾病抗性的遗传水平上的研究第17-19页
     ·猪抗病育种的途径第19页
     ·展望第19页
   ·本研究的目的、意义和内容第19-21页
2.材料与方法第21-39页
   ·试验材料第21-26页
     ·试验材料的采集第21页
     ·载体与菌株第21页
     ·生物信息学网络资源及应用软件第21页
     ·主要试剂第21-22页
     ·试验溶液的配制第22-25页
     ·主要仪器设备第25-26页
   ·试验方法第26-39页
     ·RNA的提取第26页
     ·引物设计第26-27页
     ·RT-PCR第27-29页
     ·SLA-DRA、SLA-DRB基因cDNA的克隆第29-33页
     ·测序与序列分析第33页
     ·生物信息学分析第33页
     ·原核重组表达质粒的构建第33-36页
     ·SLA-DRA和SLA-DRB在大肠杆菌中的诱导表达及表达产物分析第36-37页
     ·重组融合蛋白的纯化第37-39页
3.结果与分析第39-56页
   ·长白猪肠系淋巴结组织总RNA的提取第39页
   ·RT-PCR扩增SLA-DRA、SLA-DRB第39-40页
   ·重组克隆质粒的构建和鉴定第40-42页
   ·测序与序列分析第42-45页
   ·生物信息学分析第45-50页
     ·SLA-DRA、SLA-DRB的糖基化位点预测第45-46页
     ·SLA-DRA、SLA-DRB的磷酸化位点预测第46-47页
     ·SLA-DRA、SLA-DRB的疏水性预测第47-48页
     ·SLA-DRA、SLA-DRB的二级结构预测第48-50页
   ·原核重组表达质粒的构建和鉴定第50-52页
   ·SLA-DRA、SLA-DRB在大肠杆菌中的诱导表达及产物分析第52-55页
     ·SLA-DRA、SLA-DRB的诱导表达第52-53页
     ·SLA-DRA、SLA-DRB诱导表达条件的优化第53-54页
     ·表达产物的可溶性分析第54-55页
   ·重组融合蛋白的纯化第55-56页
4.讨论第56-64页
   ·肠系淋巴结组织总RNA的提取第56页
   ·克隆片段的设计第56-57页
   ·克隆载体的选择第57-58页
   ·SLA-DRA、SLA-DRB基因的序列分析第58页
   ·SLA-DRA、SLA-DRB生物信息学预测第58-59页
   ·表达宿主菌的选择第59页
   ·载体载体的选择第59-62页
   ·SLA-DRA、SLA-DRB在大肠杆菌中的诱导表达及表达产物分析第62页
   ·关于融合蛋白的可溶性分析第62页
   ·重组融合蛋白的纯化第62-64页
5.结论第64-65页
6.参考文献第65-69页
致谢第69-70页
攻读硕士期间发表的论文第70-71页
作者简介第71页

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