中文摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-9页 |
1 文献综述 | 第9-26页 |
·PPV的发现及现状 | 第9页 |
·PPV的流行病学 | 第9-10页 |
·PPV的病毒特性 | 第10-12页 |
·PPV的分子生物学研究 | 第12-16页 |
·PPV的诊断技术 | 第16页 |
·PPV的疫苗研究进展 | 第16-19页 |
·核酸疫苗研究进展 | 第19-26页 |
2、研究的目的和意义 | 第26页 |
3、材料 | 第26-27页 |
·质粒、宿主菌、细胞和实验动物 | 第26页 |
·主要的酶及试剂 | 第26-27页 |
·主要仪器 | 第27页 |
4、方法 | 第27-37页 |
·VP2主要抗原表位基因的扩增 | 第28页 |
·PCR产物的回收 | 第28-29页 |
·VP2主要抗原表位基因的克隆 | 第29页 |
·阳性菌落的筛选与鉴定 | 第29-31页 |
·重组质粒pcDNA3.1(+)-VP2的构建 | 第31页 |
·CpG免疫刺激序列的制备 | 第31-32页 |
·重组质粒pcDNA3.1(+)-VP2—CpG的构建 | 第32-34页 |
·重组真核表达质粒在COS-7细胞中的瞬时表达 | 第34-36页 |
·DNA疫苗对小鼠免疫效果的研究 | 第36-37页 |
5、结果 | 第37-44页 |
·PCR结果 | 第37-38页 |
·克隆质粒酶切鉴定结果 | 第38页 |
·目的基因的测序及分析结果 | 第38-40页 |
·重组质粒pcDNA3.1(+)-VP2的酶切及菌落PCR鉴定结果 | 第40页 |
·CpG序列的PCR扩增 | 第40-41页 |
·克隆质粒pBS-T-CpG的酶切鉴定 | 第41页 |
·CpG免疫刺激序列的测序结果 | 第41-42页 |
·重组质粒pcDNA3.1(+)-VP2-CpG的酶切及PCR鉴定结果 | 第42页 |
·重组真核表达载体体外表达产物的荧光检测 | 第42-43页 |
·动物实验检测核酸疫苗免疫效果 | 第43-44页 |
6、讨论 | 第44-49页 |
·目的基因的选择 | 第44-45页 |
·表达载体的选择 | 第45页 |
·关于CpG免疫刺激序列 | 第45-47页 |
·转染的方法 | 第47页 |
·DNA疫苗的接种方式 | 第47-48页 |
·核酸疫苗免疫效果 | 第48-49页 |
7、结论 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-55页 |
致谢 | 第55-56页 |
实验试剂的配置 | 第56页 |