| 中文摘要 | 第1-5页 |
| 英文摘要 | 第5-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-23页 |
| 1 猪流感病毒的概况 | 第11-18页 |
| ·猪流感病毒病毒的分型 | 第11页 |
| ·猪流感病毒的一般生物学特性 | 第11-12页 |
| ·猪流感病毒编码蛋白 | 第12-16页 |
| ·猪流感病毒的变异 | 第16页 |
| ·SIV的种间传播及公共卫生 | 第16-18页 |
| 2 H3N2亚型流感病毒研究进展 | 第18-21页 |
| ·H3N2亚型猪流感流行情况 | 第18-19页 |
| ·我国H3N2亚型猪流感病毒疫苗研究进展 | 第19-21页 |
| 3 展望 | 第21-23页 |
| 第二章 HA基因原核表达载体的构建 | 第23-36页 |
| 1 材料 | 第23-25页 |
| ·实验材料 | 第23页 |
| ·主要试剂及其配制 | 第23-25页 |
| ·主要仪器设备 | 第25页 |
| 2 方法 | 第25-31页 |
| ·HA序列分析 | 第25页 |
| ·HA基因的扩增 | 第25-26页 |
| ·HA基因的亚克隆 | 第26-27页 |
| ·重组pMD18-T-HA质粒的抽提及鉴定 | 第27-28页 |
| ·重组表达质粒pET32a-HA的构建 | 第28-29页 |
| ·原核表达质粒pET32-HA转化表达菌BL21 | 第29-30页 |
| ·重组表达质粒pET32a-HA的鉴定 | 第30页 |
| ·HA基因在大肠杆菌中的诱导表达 | 第30-31页 |
| 3 结果与分析 | 第31-33页 |
| ·HA基因序列分析 | 第31页 |
| ·重组pMD18-T-HA质粒的的鉴定 | 第31-32页 |
| ·重组表达质粒pET32a-HA的鉴定 | 第32-33页 |
| ·重组表达质粒的诱导表达 | 第33页 |
| 4 讨论 | 第33-36页 |
| 第三章 HA基因的真核表达 | 第36-46页 |
| 1 材料 | 第36-37页 |
| ·实验材料 | 第36页 |
| ·主要试剂及其配制 | 第36-37页 |
| ·主要仪器设备 | 第37页 |
| 2 实验方法 | 第37-42页 |
| ·HA基因的扩增 | 第37页 |
| ·HA基因的亚克隆 | 第37页 |
| ·重组pMD18-T-HA质粒的抽提及鉴定 | 第37-38页 |
| ·重组质粒pcDNA3.1-HA的构建 | 第38-39页 |
| ·真核表达质粒pcDNA3.1-HA转化 | 第39页 |
| ·重组质粒pcDNA3.1-HA的鉴定 | 第39-40页 |
| ·高免血清的制备 | 第40-41页 |
| ·重组质粒pCDNA-HA脂质体法转染VERO细胞 | 第41页 |
| ·表达产物的间接免疫荧光鉴定 | 第41-42页 |
| 3 结果与分析 | 第42-44页 |
| ·重组pMD18-T-HA质粒的的鉴定 | 第42页 |
| ·重组表达质粒pcDNA3.1-HA的鉴定 | 第42-43页 |
| ·表达产物的间接荧光鉴定 | 第43-44页 |
| 4 讨论 | 第44-46页 |
| 第四章 猪流感HA DNA疫苗免疫效果研究 | 第46-57页 |
| 1 材料 | 第46-47页 |
| ·实验材料 | 第46页 |
| ·主要试剂及其配制 | 第46-47页 |
| 2 实验方法 | 第47-50页 |
| ·真核表达质粒pcDNA3.1-HA的大量制备与纯化 | 第47页 |
| ·猪流感病毒的增值 | 第47-48页 |
| ·猪流感病毒鸡胚半数感染力(EID_(50))的测定 | 第48页 |
| ·猪流感H3N2亚型病毒的灭活 | 第48页 |
| ·动物实验 | 第48-50页 |
| ·实验动物的分组及免疫 | 第48-49页 |
| ·保护性试验 | 第49页 |
| ·小鼠血清抗体水平的检测 | 第49-50页 |
| 3 结果与分析 | 第50-54页 |
| ·抽提的pcDNA3.1-HA的浓度测定 | 第50-51页 |
| ·鸡胚半数感染量的测定结果 | 第51页 |
| ·猪流感H3N2亚型病毒效价测定结果 | 第51-52页 |
| ·小鼠血清制备 | 第52页 |
| ·小鼠血液抗体效价血凝抑制(HI)试验结果 | 第52-53页 |
| ·小鼠攻毒后体重变化情况 | 第53页 |
| ·小鼠剖杀后病毒滴定结果 | 第53-54页 |
| 4 讨论 | 第54-57页 |
| 结论 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-64页 |
| 致谢 | 第64页 |
