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口蹄疫病毒VP1基因转染树突状细胞对T淋巴细胞的活化作用研究

摘要第1-5页
Abstract第5-10页
1 引言第10-18页
   ·口蹄疫的研究进展第10-15页
     ·FMDV 特性第10-11页
     ·FMDV 复制周期第11页
     ·FMDV 的抗原位点第11-13页
     ·FMDV 的VP1 基因第13-14页
     ·口蹄疫VPl 诱导免疫应答的机制第14页
     ·FMDV 感染的发病机制第14-15页
   ·树突状细胞的研究进展第15-17页
     ·DC 的起源和分类第15-16页
     ·DC 的生物学特性第16页
     ·DC 的抗原提呈功能第16-17页
   ·本研究的目的和意义第17-18页
2 实验材料及仪器第18-20页
   ·质粒、菌株、载体和细胞第18页
   ·实验材料第18-19页
   ·主要仪器设备第19-20页
3. 实验方法第20-31页
   ·主要试剂配置第20-23页
   ·PCDNA3.1-VP1 重组质粒的构建第23-27页
     ·重组质粒pMD18-VP1 的小量制备第23-25页
     ·重组质粒pMD18-VP1 的DNA 序列测定与分析第25页
     ·真核表达载体pcDNA3.1(+)的制备第25-26页
     ·VP1 与pcDNA3.1(+)定向连接第26-27页
     ·连接产物转化宿主菌第27页
     ·重组质粒pcDNA3.1-VP1 真核表达载体的鉴定第27页
     ·重组质粒pcDNA3.1-VP1 的DNA 序列测定与分析第27页
   ·重组质粒PCDNA3.1-VP1 转染 DC 细胞第27-30页
     ·实验动物第27页
     ·DC 细胞及诱导培养第27-28页
     ·G418 筛选浓度的确定第28页
     ·转染质粒的pcDNA3.1-VP1 制备第28页
     ·pcDNA3.1-VP1 转染MoDCs 和转基因细胞株的筛选第28-29页
     ·FMDV-VP1 在MoDCs 的表达产物Western-blot 检测第29-30页
   ·FMDV- VP1 转染的MODCS 激活淋巴结T 细胞的体外检测第30页
   ·统计学分析第30-31页
4 结果第31-36页
   ·重组质粒PMD18-VP1 的酶切鉴定第31页
   ·PMD18-VP1 的序列测定与分析第31-32页
   ·重组质粒PCDNA3.1-VP1 的构建第32-33页
   ·重组质粒测序鉴定结果第33页
   ·WESTERN-BLOT 检测FMDV- VP1 在MODCS 的表达第33-34页
   ·FMDV- VP1 转染MODC 激活淋巴结T 细胞表达IFN-Γ的检测第34-36页
5 讨论第36-40页
   ·表达载体的构建第36-37页
   ·细胞转染及筛选第37-38页
   ·转染VP1 基因的MODC 激活淋巴结T 细胞的研究第38-40页
6 结论第40-41页
参考文献第41-47页
附图及说明第47-49页
在读期间发表的学术论文第49-50页
作者简历第50-51页
致谢第51页

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