摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-10页 |
1 引言 | 第10-18页 |
·口蹄疫的研究进展 | 第10-15页 |
·FMDV 特性 | 第10-11页 |
·FMDV 复制周期 | 第11页 |
·FMDV 的抗原位点 | 第11-13页 |
·FMDV 的VP1 基因 | 第13-14页 |
·口蹄疫VPl 诱导免疫应答的机制 | 第14页 |
·FMDV 感染的发病机制 | 第14-15页 |
·树突状细胞的研究进展 | 第15-17页 |
·DC 的起源和分类 | 第15-16页 |
·DC 的生物学特性 | 第16页 |
·DC 的抗原提呈功能 | 第16-17页 |
·本研究的目的和意义 | 第17-18页 |
2 实验材料及仪器 | 第18-20页 |
·质粒、菌株、载体和细胞 | 第18页 |
·实验材料 | 第18-19页 |
·主要仪器设备 | 第19-20页 |
3. 实验方法 | 第20-31页 |
·主要试剂配置 | 第20-23页 |
·PCDNA3.1-VP1 重组质粒的构建 | 第23-27页 |
·重组质粒pMD18-VP1 的小量制备 | 第23-25页 |
·重组质粒pMD18-VP1 的DNA 序列测定与分析 | 第25页 |
·真核表达载体pcDNA3.1(+)的制备 | 第25-26页 |
·VP1 与pcDNA3.1(+)定向连接 | 第26-27页 |
·连接产物转化宿主菌 | 第27页 |
·重组质粒pcDNA3.1-VP1 真核表达载体的鉴定 | 第27页 |
·重组质粒pcDNA3.1-VP1 的DNA 序列测定与分析 | 第27页 |
·重组质粒PCDNA3.1-VP1 转染 DC 细胞 | 第27-30页 |
·实验动物 | 第27页 |
·DC 细胞及诱导培养 | 第27-28页 |
·G418 筛选浓度的确定 | 第28页 |
·转染质粒的pcDNA3.1-VP1 制备 | 第28页 |
·pcDNA3.1-VP1 转染MoDCs 和转基因细胞株的筛选 | 第28-29页 |
·FMDV-VP1 在MoDCs 的表达产物Western-blot 检测 | 第29-30页 |
·FMDV- VP1 转染的MODCS 激活淋巴结T 细胞的体外检测 | 第30页 |
·统计学分析 | 第30-31页 |
4 结果 | 第31-36页 |
·重组质粒PMD18-VP1 的酶切鉴定 | 第31页 |
·PMD18-VP1 的序列测定与分析 | 第31-32页 |
·重组质粒PCDNA3.1-VP1 的构建 | 第32-33页 |
·重组质粒测序鉴定结果 | 第33页 |
·WESTERN-BLOT 检测FMDV- VP1 在MODCS 的表达 | 第33-34页 |
·FMDV- VP1 转染MODC 激活淋巴结T 细胞表达IFN-Γ的检测 | 第34-36页 |
5 讨论 | 第36-40页 |
·表达载体的构建 | 第36-37页 |
·细胞转染及筛选 | 第37-38页 |
·转染VP1 基因的MODC 激活淋巴结T 细胞的研究 | 第38-40页 |
6 结论 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-47页 |
附图及说明 | 第47-49页 |
在读期间发表的学术论文 | 第49-50页 |
作者简历 | 第50-51页 |
致谢 | 第51页 |