| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 1 前言 | 第11-17页 |
| ·水稻条纹病毒的研究概况 | 第11-12页 |
| ·水稻条纹叶枯病的发生及危害 | 第11页 |
| ·水稻条纹叶枯病的症状 | 第11页 |
| ·水稻条纹叶枯病的传播途径和发病条件 | 第11-12页 |
| ·水稻条纹病毒的基因组结构及其编码的蛋白 | 第12页 |
| ·酵母双杂交系统及其应用 | 第12-14页 |
| ·酵母双杂交系统简介 | 第12页 |
| ·酵母双杂交系统的原理 | 第12-13页 |
| ·利用酵母双杂交系统研究RSV 与寄主的互作情况 | 第13-14页 |
| ·实时荧光定量PCR 技术及其应用 | 第14-15页 |
| ·荧光定量PCR 技术原理 | 第14-15页 |
| ·荧光化学 | 第15页 |
| ·定量方法 | 第15页 |
| ·实时荧光定量PCR 技术的应用 | 第15页 |
| ·原核表达技术及应用 | 第15-16页 |
| ·原核表达系统简介 | 第15页 |
| ·原核表达在RSV 中的应用 | 第15-16页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第16-17页 |
| 2 利用酵母双杂交技术验证NW1、N815 与CP、SP、NSvc4 互作情况 | 第17-30页 |
| ·材料与方法 | 第17-23页 |
| ·材料 | 第17页 |
| ·方法 | 第17-23页 |
| ·结果与分析 | 第23-28页 |
| ·重组质粒和酵母菌株的验证 | 第23-24页 |
| ·NW1、N815 基因的扩增与克隆 | 第24-25页 |
| ·NW1、N815 基因酵母双杂交载体的构建 | 第25-26页 |
| ·NSvc4 和NW1、N815 两蛋白之间的互作检测 | 第26-28页 |
| ·小结与讨论 | 第28-30页 |
| 3 荧光定量PCR 检测N815、NW1 mRNA 表达情况 | 第30-39页 |
| ·材料与方法 | 第30-32页 |
| ·材料 | 第30页 |
| ·方法 | 第30-32页 |
| ·结果与分析 | 第32-37页 |
| ·样品总RNA 的质量检测 | 第32页 |
| ·目的基因和内参基因的融解曲线 | 第32-33页 |
| ·目的基因和内参基因的扩增曲线 | 第33-34页 |
| ·目的基因和内参基因的标准曲线 | 第34-35页 |
| ·目的基因和内参基因的原始定量 | 第35-37页 |
| ·目的基因的相对定量 | 第37页 |
| ·小结和讨论 | 第37-39页 |
| 4 NB15 基因的原核表达及植株体内蛋白的western-blot 检测 | 第39-50页 |
| ·材料与方法 | 第39页 |
| ·材料 | 第39页 |
| ·菌株 | 第39页 |
| ·主要试剂 | 第39页 |
| ·方法 | 第39-44页 |
| ·PCR 引物的设计与合成 | 第39页 |
| ·目的基因的获得 | 第39页 |
| ·PCR 产物的琼脂糖凝胶电泳检测 | 第39页 |
| ·克隆 | 第39-41页 |
| ·NB15 基因在大肠杆菌中的表达 | 第41-42页 |
| ·融合蛋白特异性抗血清的制备及Western blot 鉴定 | 第42-44页 |
| ·结果与分析 | 第44-48页 |
| ·目的基因的克隆及原核表达载体的构建 | 第44-45页 |
| ·融合蛋白的诱导表达 | 第45-46页 |
| ·融合蛋白的可溶性分析 | 第46-47页 |
| ·制备原核表达产物的抗血清 | 第47页 |
| ·Western blot 检测结果 | 第47-48页 |
| ·小结与讨论 | 第48-50页 |
| 5 N53 蛋白自身，N53 与CP, SP， NSvc4 之间互作情况的检测 | 第50-62页 |
| ·材料与方法 | 第50-54页 |
| ·材料 | 第50页 |
| ·方法 | 第50-54页 |
| ·结果与分析 | 第54-60页 |
| ·NS3 目的基因的获得及其克隆 | 第54-55页 |
| ·N53 基因酵母双杂交载体的构建 | 第55页 |
| ·重组质粒对酵母细胞毒性和自激活活性检测 | 第55-57页 |
| ·蛋白自身互作的检测 | 第57-58页 |
| ·N53 蛋白与CP、SP、NSvc4 蛋白互作的检测 | 第58-60页 |
| ·小结与讨论 | 第60-62页 |
| 6 全文小结和展望 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-67页 |
| 附录1 缩写词和英汉对照 | 第67-69页 |
| 附录2 载体图谱 | 第69-73页 |
| 附录3 攻硕期间发表的文章 | 第73-74页 |
| 致谢 | 第74页 |
