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黄瓜绿斑驳花叶病毒的分子鉴定及检测技术研究

摘要第1-8页
Abstract第8-9页
1 前言第9-18页
   ·黄瓜绿斑驳花叶病毒(CGMMV)的研究现状第10-14页
     ·CGMMV 的分布与为害第10-11页
     ·CGMMV 的分类第11-12页
     ·CGMMV 的寄主范围与症状第12-14页
     ·CGMMV 传播方式第14页
     ·CGMMV 粒体及基因组结构与编码策略第14页
   ·黄瓜绿斑驳花叶病毒检测技术第14-16页
     ·生物学检测鉴定第15页
     ·电镜检测第15页
     ·血清学检测第15-16页
     ·分子生物学检测第16页
   ·本研究的目的及意义第16-18页
2 CGMMV 生物学和分子生物学鉴定第18-25页
   ·材料第18-19页
     ·供试毒源第18页
     ·供试寄主植物第18页
     ·试剂及耗材第18页
     ·所用仪器设备第18-19页
   ·方法第19-21页
     ·黄瓜绿斑驳花叶病毒的生物学鉴定第19页
     ·黄瓜绿斑驳花叶病毒的分子生物学鉴定第19-21页
       ·病叶总RNA 的提取第19页
       ·引物设计合成第19页
       ·RT-PCR 扩增第19-20页
       ·PCR 产物的检测第20-21页
   ·结果与分析第21-24页
     ·生物学鉴定第21-22页
     ·CGMMV 的分子生物学鉴定第22-24页
   ·小结与讨论第24-25页
3 黄瓜绿斑驳花叶病毒编码区序列分析第25-39页
   ·材料第25页
     ·供试植物、菌株及载体第25页
     ·主要试剂第25页
     ·主要仪器第25页
   ·方法第25-30页
     ·引物设计合成第25-26页
     ·植物总RNA 的提取第26页
     ·RT-PCR 扩增CGMMV 编码区序列第26-27页
     ·PCR 产物的检测和回收第27-28页
     ·目的片段与pMD18-T 克隆载体连接第28页
     ·大肠杆菌DH5α的制备第28-29页
     ·转化第29页
     ·质粒提取第29页
     ·重组质粒的酶切鉴定第29-30页
     ·克隆序列的测定与序列分析第30页
   ·结果与分析第30-38页
     ·PCR 扩增结果第30-31页
     ·CGMMV 编码区目的片段的重组质粒筛选结果第31页
     ·编码区序列的测定及其生物信息学分析第31-32页
     ·与烟草花叶病毒属其他成员编码区序列的同源性比较分析第32-38页
   ·小结与讨论第38-39页
4 黄瓜绿斑驳花叶病毒检测技术比较研究第39-48页
   ·材料处理第39页
   ·实验处理第39-40页
   ·主要试剂第40页
   ·方法第40-44页
     ·DAS-ELISA 检测CGMMV 灵敏度第40-41页
     ·RT-PCR 检测CGMMV 灵敏度第41-42页
     ·核酸斑点杂交检测CGMMV 灵敏度第42-44页
       ·探针的的制备第42页
       ·探针的检测第42-43页
       ·核酸斑点杂交程序第43-44页
   ·结果与分析第44-47页
     ·DAS-ELISA 检测CGMMV 的灵敏度第44-45页
     ·RT-PCR 检测CGMMV 的灵敏度第45-46页
     ·核酸斑点杂交检测CGMMV 的灵敏度第46-47页
       ·探针标记结果第46页
       ·检测灵敏度第46-47页
   ·小结与讨论第47-48页
     ·检测技术比较分析第47页
     ·CGMMV 检疫检测标准建立的探索第47-48页
5 总结第48-50页
参考文献第50-54页
附录1 CGMMV 编码区序列第54-57页
附录2 缓冲液的配制第57-59页
附录3 缩写词和英汉对照第59-60页
致谢第60页

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