致谢 | 第1-6页 |
中文摘要 | 第6-9页 |
英文摘要 | 第9-13页 |
英文缩写词表 | 第13-15页 |
目次 | 第15-19页 |
第一部分:绪论 | 第19-38页 |
1 细胞凋亡及其信号传导机制 | 第19-27页 |
·细胞凋亡概念及特征 | 第19-20页 |
·细胞凋亡的调控因素 | 第20-24页 |
·细胞凋亡的信号传导途径 | 第24-27页 |
2 细菌感染与细胞凋亡 | 第27-31页 |
·细菌感染诱导宿主细胞凋亡 | 第27-30页 |
·细菌感染抑制宿主细胞凋亡 | 第30-31页 |
3 钩端螺旋体病及其致病机制 | 第31-36页 |
·钩体的运动与致病性 | 第32页 |
·钩体的黏附、侵袭与致病性 | 第32-34页 |
·钩体毒力因子与致病性 | 第34-36页 |
4 本研究的内容、目的和意义 | 第36-38页 |
第二部分:问号钩体感染对不同类型细胞的影响 | 第38-58页 |
1 材料 | 第38-41页 |
·动物 | 第38-39页 |
·细胞株与菌株 | 第39页 |
·实验仪器和设备 | 第39-40页 |
·主要试剂和药品 | 第40页 |
·溶液配制 | 第40-41页 |
2 方法 | 第41-44页 |
·钩端螺旋体的培养 | 第41页 |
·细胞复苏、培养和冻存 | 第41-42页 |
·小鼠腹腔巨噬细胞的分离培养 | 第42页 |
·钩端螺旋体感染细胞 | 第42页 |
·乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测细胞毒性 | 第42-43页 |
·流式细胞术检测细胞凋亡(ANNEXIN V/PI双染法) | 第43页 |
·透射电镜下细胞形态学观察 | 第43-44页 |
·数据处理方法 | 第44页 |
3 结果 | 第44-55页 |
·LDH释放法检测钩端螺旋体感染对细胞的毒性作用 | 第44-46页 |
·流式细胞术检测细胞凋亡和坏死 | 第46-53页 |
·透射电镜观察细胞凋亡 | 第53-55页 |
4 讨论 | 第55-57页 |
5 小结 | 第57-58页 |
第三部分:问号钩体诱导细胞凋亡过程中CASPASE信号传导通路的研究 | 第58-88页 |
1 材料 | 第58-63页 |
·动物 | 第58页 |
·细胞株与菌株 | 第58-59页 |
·实验仪器和设备 | 第59-60页 |
·主要试剂和药品 | 第60-61页 |
·溶液配制 | 第61-63页 |
2 方法 | 第63-67页 |
·钩端螺旋体的培养 | 第63页 |
·细胞培养 | 第63页 |
·小鼠腹腔巨噬细胞的分离培养 | 第63-64页 |
·钩体感染及caspase抑制剂处理细胞 | 第64页 |
·流式细胞术检测细胞凋亡(ANNEXIN V/PI双染法) | 第64页 |
·CASPASE活性检测 | 第64-65页 |
·WESTERN BLOT检测凋亡相关蛋白的表达 | 第65-67页 |
·数据处理方法 | 第67页 |
3 结果 | 第67-83页 |
·CASPASE参与问号钩体诱导的J774A.1细胞凋亡 | 第67-76页 |
·CASPASE参与问号钩体诱导的小鼠腹腔巨噬细胞凋亡 | 第76-83页 |
4 讨论 | 第83-86页 |
5 小结 | 第86-88页 |
第四部分:JNK和P38MAPK通路在问号钩体诱导J774A.1细胞凋亡中的作用 | 第88-101页 |
1 材料 | 第88-90页 |
·细胞株与菌株 | 第88页 |
·实验仪器和设备 | 第88-89页 |
·主要试剂和药品 | 第89-90页 |
·溶液配制 | 第90页 |
2 方法 | 第90-92页 |
·钩端螺旋体的培养 | 第90页 |
·细胞培养 | 第90-91页 |
·钩体感染及JNK、P38MAPK抑制剂处理细胞 | 第91页 |
·流式细胞术检测细胞凋亡(Annexin V/PI双染法) | 第91页 |
·JNK和P38MAPK磷酸化水平检测 | 第91-92页 |
·数据处理方法 | 第92页 |
3 结果 | 第92-97页 |
·JNK和P38MAPK抑制剂对细胞凋亡的抑制作用 | 第92-93页 |
·问号钩体对J774A.1细胞中JNK和P38MAPK磷酸化水平的影响 | 第93页 |
·JNK和P38MAPK抑制剂对caspase-3,-8活性及FADD表达的影响 | 第93-97页 |
4 讨论 | 第97-99页 |
5 小结 | 第99-101页 |
结论 | 第101-102页 |
参考文献 | 第102-117页 |
作者简历及攻读学位期间取得的科研成果 | 第117页 |