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问号钩端螺旋体鞭毛相关基因的克隆表达与功能的初步研究

致谢第1-6页
前言第6-11页
中文摘要第11-15页
英文摘要第15-20页
英文缩写词表第20-22页
目次第22-25页
第一部分:问号钩端螺钩体鞭毛相关基因原核表达系统的构建和膜定位第25-58页
 引言第25-26页
 1 材料第26-33页
   ·主要仪器第26-28页
   ·主要试剂第28-29页
   ·主要溶液第29-33页
   ·菌株及质粒第33页
 2 方法第33-46页
   ·fliH/I/N/Y基因扩增第34-38页
   ·原核表达系统的构建第38-40页
   ·目的重组蛋白的表达第40-41页
   ·重组蛋白的纯化第41-43页
   ·rFliH/I/N/Y抗血清制备与鉴定第43-45页
   ·重组蛋白的Western blot检测第45页
   ·钩体鞭毛蛋白的FliH/I/N/Y膜定位第45-46页
 3 结果第46-55页
   ·fliH/I/N/Y基因扩增第46-51页
   ·原核表达系统的构建第51页
   ·目的重组蛋白的表达第51-53页
   ·重组蛋白的纯化第53页
   ·rFliH/I/N/Y抗血清制备与鉴定第53页
   ·重组蛋白的Western blot检测第53-54页
   ·钩体鞭毛蛋白的FliH/I/N/Y膜定位第54-55页
 4 讨论第55-58页
第二部分:应用基因打靶技术构建问号钩端螺旋体fliH/I/N/Y基因突变体及其功能的初探第58-92页
 引言第58-59页
 1 材料第59-66页
   ·主要仪器第59-60页
   ·主要试剂第60-62页
   ·主要溶液第62-65页
   ·细胞株及培养第65页
   ·菌株及培养第65-66页
 2 方法第66-78页
   ·fliH/I/N/Y基因靶向敲除突变体的构建第66-75页
   ·赖型钩体FliN~-、FliY~-突变株运动能力及毒性的改变第75-76页
   ·fliH对fliI调控作用的初步研究第76-78页
   ·统计学分析第78页
 3 结果第78-87页
   ·fliH/I/H/Y基因靶向敲除突变体的构建第78-82页
   ·赖型钩体FliN~-、FliY~-突变株运动能力及毒性的改变第82-85页
   ·fliH对fliI调控作用的初步研究第85-87页
 4 讨论第87-92页
结论第92-93页
参考文献第93-105页
作者简历与攻读学位期间取得的科研成果第105页

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