致谢 | 第1-6页 |
前言 | 第6-11页 |
中文摘要 | 第11-15页 |
英文摘要 | 第15-20页 |
英文缩写词表 | 第20-22页 |
目次 | 第22-25页 |
第一部分:问号钩端螺钩体鞭毛相关基因原核表达系统的构建和膜定位 | 第25-58页 |
引言 | 第25-26页 |
1 材料 | 第26-33页 |
·主要仪器 | 第26-28页 |
·主要试剂 | 第28-29页 |
·主要溶液 | 第29-33页 |
·菌株及质粒 | 第33页 |
2 方法 | 第33-46页 |
·fliH/I/N/Y基因扩增 | 第34-38页 |
·原核表达系统的构建 | 第38-40页 |
·目的重组蛋白的表达 | 第40-41页 |
·重组蛋白的纯化 | 第41-43页 |
·rFliH/I/N/Y抗血清制备与鉴定 | 第43-45页 |
·重组蛋白的Western blot检测 | 第45页 |
·钩体鞭毛蛋白的FliH/I/N/Y膜定位 | 第45-46页 |
3 结果 | 第46-55页 |
·fliH/I/N/Y基因扩增 | 第46-51页 |
·原核表达系统的构建 | 第51页 |
·目的重组蛋白的表达 | 第51-53页 |
·重组蛋白的纯化 | 第53页 |
·rFliH/I/N/Y抗血清制备与鉴定 | 第53页 |
·重组蛋白的Western blot检测 | 第53-54页 |
·钩体鞭毛蛋白的FliH/I/N/Y膜定位 | 第54-55页 |
4 讨论 | 第55-58页 |
第二部分:应用基因打靶技术构建问号钩端螺旋体fliH/I/N/Y基因突变体及其功能的初探 | 第58-92页 |
引言 | 第58-59页 |
1 材料 | 第59-66页 |
·主要仪器 | 第59-60页 |
·主要试剂 | 第60-62页 |
·主要溶液 | 第62-65页 |
·细胞株及培养 | 第65页 |
·菌株及培养 | 第65-66页 |
2 方法 | 第66-78页 |
·fliH/I/N/Y基因靶向敲除突变体的构建 | 第66-75页 |
·赖型钩体FliN~-、FliY~-突变株运动能力及毒性的改变 | 第75-76页 |
·fliH对fliI调控作用的初步研究 | 第76-78页 |
·统计学分析 | 第78页 |
3 结果 | 第78-87页 |
·fliH/I/H/Y基因靶向敲除突变体的构建 | 第78-82页 |
·赖型钩体FliN~-、FliY~-突变株运动能力及毒性的改变 | 第82-85页 |
·fliH对fliI调控作用的初步研究 | 第85-87页 |
4 讨论 | 第87-92页 |
结论 | 第92-93页 |
参考文献 | 第93-105页 |
作者简历与攻读学位期间取得的科研成果 | 第105页 |