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弓形虫GRA4重组质粒诱导的小鼠免疫保护作用及快速ELISA诊断弓形虫感染的应用研究

致谢第1-5页
摘要第5-7页
Abstract第7-14页
1 绪论第14-30页
   ·课题背景第14-29页
     ·弓形虫抗原基因的研究进展第14-26页
     ·弓形虫病的早期诊断研究第26-29页
   ·研究内容第29-30页
2 实验一 快速ELISA检测弓形虫循环抗原的应用研究第30-48页
   ·材料与方法第32-37页
     ·材料第32页
     ·试剂与仪器第32-33页
     ·方法第33-37页
   ·结果第37-42页
     ·制备的弓形虫可溶性抗原浓度第37页
     ·稀释度的选择第37-38页
     ·双抗体夹心ELISA法的检测灵敏度第38-39页
     ·弓形虫感染兔CAg消长规律研究第39页
     ·实验室检测结果第39-40页
     ·交叉反应结果分析第40页
     ·双抗体夹心法检测CAg的临床应用考核第40-41页
     ·双抗体夹心ELISA检测CAg与其他方法的比较第41-42页
   ·讨论第42-46页
   ·结论第46-48页
3 实验二 脂质体包裹弓形虫真核表达质粒pGRA4的免疫分析第48-83页
   ·材料与方法第50-67页
     ·材料第50页
     ·试剂与仪器第50-54页
     ·方法第54-67页
   ·结果第67-76页
     ·弓形虫基因组DNA的提取第67页
     ·GRA4基因扩增第67-68页
     ·弓形虫重组质粒pGEX-GRA4的原核表达产物SDS-PAGE分析第68-69页
     ·pGRA4真核表达载体的鉴定第69页
     ·弓形虫pGRA4真核表达载体转染COS-7细胞表达蛋白的SDS-PAGE分析第69-70页
     ·弓形虫pGRA4真核表达载体转染COS-7细胞表达蛋白的Western-blot分析第70-71页
     ·RT-PCR检测目的基因在骨骼肌中的转录第71-72页
     ·脱水再水化法构建脂质体第72页
     ·脂质体粒径大小及表面电荷第72页
     ·脂质体包裹率的测定结果第72-73页
     ·血清IgG抗体测定第73页
     ·抗体亚型检测结果第73-74页
     ·细胞因子检测结果第74页
     ·弓形虫弱毒ME49株攻击感染C57BL/6小鼠第74-76页
     ·弓形虫RH强毒株攻击感染BALB/c小鼠第76页
   ·讨论第76-81页
   ·结论第81-83页
4 展望和下一步研究目标第83-85页
参考文献第85-101页
附录第101-103页
作者简历第103-105页

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