| 目录 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-11页 |
| Abstract | 第11-15页 |
| 缩略词(Abbreviation) | 第15-16页 |
| 第1章 文献综述 | 第16-48页 |
| ·猪传染性胸膜肺炎的危害与防治 | 第16-27页 |
| ·病原学 | 第16-18页 |
| ·流行病学 | 第18-20页 |
| ·发病机制 | 第20-21页 |
| ·临床症状 | 第21页 |
| ·病理变化 | 第21-22页 |
| ·诊断 | 第22-26页 |
| ·防治 | 第26-27页 |
| ·胸膜肺炎放线杆菌毒力因子研究进展 | 第27-37页 |
| ·荚膜(Capsule,CP) | 第27-28页 |
| ·脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS) | 第28-29页 |
| ·外膜蛋白(Outer membrane proteins,OMP) | 第29-30页 |
| ·金属离子摄取相关蛋白(Iron-transport related proteins) | 第30-31页 |
| ·酶类(Enzymes) | 第31-32页 |
| ·黏附因子(Adherence factor) | 第32-33页 |
| ·RTX毒素(RTX-toxins,Apx) | 第33-36页 |
| ·生物被膜(Bacterial Biofilm,BBF) | 第36页 |
| ·双组分信号转导系统(Two-component signal transduction system,TCSTS) | 第36-37页 |
| ·胸膜肺炎放线杆菌疫苗的研究进展 | 第37-45页 |
| ·灭活疫苗 | 第37-38页 |
| ·亚单位疫苗 | 第38-40页 |
| ·核酸疫苗 | 第40页 |
| ·异源疫苗 | 第40-41页 |
| ·ghosts疫苗 | 第41-42页 |
| ·口服疫苗 | 第42页 |
| ·弱毒活疫苗 | 第42-45页 |
| ·胸膜肺炎放线杆菌突变株构建方法的研究进展 | 第45-48页 |
| ·自然突变 | 第45-46页 |
| ·化学诱变 | 第46页 |
| ·转座子突变技术 | 第46页 |
| ·同源重组技术 | 第46-48页 |
| 第2章 研究的目的和意义 | 第48-50页 |
| 第3章 材料与方法 | 第50-68页 |
| ·实验材料 | 第50-56页 |
| ·菌株、质粒和培养条件 | 第50-53页 |
| ·工具酶和试剂 | 第53-54页 |
| ·培养基及抗生素配制 | 第54页 |
| ·主要溶液的配制 | 第54-56页 |
| ·引物 | 第56页 |
| ·实验动物 | 第56页 |
| ·实验方法 | 第56-68页 |
| ·细菌的增殖及胸膜肺炎放线杆菌基因组的提取 | 第56-57页 |
| ·PCR产物或酶切产物的回收与纯化 | 第57页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备(氯化钙法) | 第57-58页 |
| ·连接产物的转化 | 第58页 |
| ·质粒的制备 | 第58-59页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第59页 |
| ·胸膜肺炎放线杆菌电转化 | 第59-60页 |
| ·融合蛋白的表达和纯化 | 第60页 |
| ·SDS-PAGE蛋白凝胶电泳 | 第60-61页 |
| ·Western blot | 第61-62页 |
| ·Southern blot | 第62-63页 |
| ·apxⅣA N端片段的克隆 | 第63页 |
| ·重组转移质粒的构建 | 第63-64页 |
| ·胸膜肺炎放线杆菌双基因缺失株的构建 | 第64页 |
| ·互补菌株的构建 | 第64-65页 |
| ·血清抗体检测 | 第65页 |
| ·突变株株的生物学特性研究 | 第65-66页 |
| ·突变株对小鼠的免疫效力试验 | 第66页 |
| ·突变株对断奶仔猪的免疫效力试验 | 第66-67页 |
| ·统计分析 | 第67-68页 |
| 第4章 结果与分析 | 第68-87页 |
| ·重组转移质粒的构建 | 第68-69页 |
| ·apxⅣA N端片段的扩增 | 第68页 |
| ·重组自杀性质粒pEΔⅣA的构建 | 第68-69页 |
| ·突变株的筛选和鉴定 | 第69-71页 |
| ·突变株的筛选 | 第69-71页 |
| ·突变株缺失段序列分析 | 第71页 |
| ·突变株Southern blot鉴定 | 第71页 |
| ·APXⅣAM的克隆表达及ELISA诊断方法建立 | 第71-72页 |
| ·ApxⅣAM的克隆及表达 | 第71-72页 |
| ·ApxⅣAM-ELISA诊断方法建立 | 第72页 |
| ·互补菌株的构建 | 第72-74页 |
| ·穿梭质粒的构建 | 第72-73页 |
| ·互补菌株的构建 | 第73-74页 |
| ·互补菌株功能验证 | 第74页 |
| ·突变株生物学特性的研究 | 第74-81页 |
| ·突变株遗传稳定性 | 第74-75页 |
| ·突变株生长特性 | 第75页 |
| ·突变株对小鼠致病力的研究 | 第75-76页 |
| ·突变株对仔猪致病力的研究 | 第76-81页 |
| ·突变株对BALB/C小鼠的免疫效力试验 | 第81-82页 |
| ·突变株对小鼠的保护试验 | 第81-82页 |
| ·小鼠血清检测结果 | 第82页 |
| ·突变株对仔猪免疫效力试验 | 第82-87页 |
| ·临床症状 | 第82-83页 |
| ·剖检 | 第83页 |
| ·抗体检测 | 第83-87页 |
| 第5章 讨论 | 第87-95页 |
| ·胸膜肺炎放线杆菌的RTX毒素 | 第88-89页 |
| ·胸膜肺炎放线杆菌弱毒疫苗 | 第89-90页 |
| ·目标基因和亲本菌株的选择 | 第90-91页 |
| ·突变株致病力分析 | 第91-93页 |
| ·体液免疫及鉴别诊断方法初步建立 | 第93页 |
| ·突变株免疫保护效能 | 第93-95页 |
| 第6章 结论 | 第95-96页 |
| 参考文献 | 第96-116页 |
| PUBLICATIONS | 第116-117页 |
| CURRICULUM VITAE | 第117-118页 |
| 致谢 | 第118页 |
