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带BAC质粒的重组伪狂犬病病毒的构建及其体外生长特性研究

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-9页
缩略语表第9-10页
1 前言第10-33页
   ·伪狂犬病病毒概述第10-20页
     ·PRV的分子生物学第11-12页
     ·PRV毒力有关蛋白第12-14页
     ·PRV的免疫学研究进展第14-17页
     ·重组伪狂犬病病毒的研究进展第17-20页
   ·细菌人工染色体技术研究进展第20-31页
     ·BAC载体系统简述第20-23页
     ·BAC分子克隆化病毒第23-28页
     ·细菌人工染色体的修饰技术第28-31页
       ·Red/ET介导的同源重组第28-29页
       ·RecA蛋白介导的同源重组第29-30页
       ·Cre/loxP介导的同源重组第30-31页
       ·Tn转座子介导的随机插入和突变技术第31页
   ·研究目的和意义第31-33页
2 材料和方法第33-42页
   ·材料第33-36页
     ·质粒、菌种、病毒与试剂第33页
     ·仪器与设备第33-34页
     ·引物设计第34页
     ·主要溶液的配制第34-35页
     ·大肠杆菌DH5α感受态的制备第35-36页
   ·试验方法第36-42页
     ·rv-PRVBAC重组病毒构建的技术路线第36页
     ·细菌人工染色体重组病毒转移载体的设计第36-37页
     ·重组病毒转移载体的构建第37-39页
       ·PRV Bartha K61株的细胞培养和DNA提取第37-39页
       ·同源臂的克隆第39页
       ·带loxP位点的绿色荧光蛋白表达盒的克隆第39页
       ·BAC质粒的插入第39页
     ·重组病毒的获取第39-40页
       ·转移载体的提取与纯化第39-40页
       ·转移载体和病毒基因组的共转染第40页
       ·重组病毒的纯化第40页
       ·重组病毒的鉴定第40页
     ·重组病毒的生长特性分析第40-42页
       ·重组病毒与亲本毒形成的噬斑比较第40-41页
       ·重组病毒与亲本毒的一步生长曲线比较第41页
       ·重组病毒的遗传稳定性第41-42页
3 结果第42-46页
   ·转移载体构建的鉴定第42页
   ·重组病毒的纯化及鉴定第42-44页
   ·重组病毒rv-PRVBAC与亲本毒形成的噬斑比较第44页
   ·重组病毒rv-PRVBAC与亲本毒生长曲线的比较第44-45页
   ·重组病毒rv-PRVBAC的遗传稳定性分析第45-46页
4 讨论第46-49页
5 结论第49-50页
参考文献第50-59页
致谢第59-60页
作者简介第60页
已发表论文第60页
待发表论文第60页

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