| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-23页 |
| ·动物乳腺细胞培养研究进展 | 第10-18页 |
| ·乳腺的结构 | 第10页 |
| ·动物细胞培养研究进展 | 第10页 |
| ·动物细胞培养发展简史 | 第10-12页 |
| ·牛乳腺细胞的研究进展 | 第12-14页 |
| ·乳腺细胞培养方法研究进展 | 第14页 |
| ·乳腺上皮细胞的分离 | 第14-16页 |
| ·乳腺上皮细胞体外培养研究概况 | 第16-18页 |
| ·转基因技术应用研究进展 | 第18-19页 |
| ·转基因动物应用的现状及前景 | 第19-21页 |
| ·转基因动物在医学中的应用 | 第19页 |
| ·利用转基因动物乳腺生物反应器生产药用蛋白 | 第19-20页 |
| ·利用转基因动物生产抗体 | 第20页 |
| ·利用转基因动物生产血液成分替代品 | 第20页 |
| ·转基因猪作为医学器官移植的来源 | 第20页 |
| ·用转基因家畜制作人类疾病的动物模型 | 第20页 |
| ·人畜共患病的防治 | 第20-21页 |
| ·转基因动物在农业中的应用 | 第21-22页 |
| ·改善肉质 | 第21页 |
| ·生长率、饲料利用率的提高 | 第21页 |
| ·乳质的改善 | 第21页 |
| ·毛用产品 | 第21页 |
| ·转基因动物及抗病性 | 第21-22页 |
| ·端粒，端粒酶研究进展 | 第22-23页 |
| ·端粒 | 第22页 |
| ·端粒酶 | 第22-23页 |
| 第二章 牛乳腺上皮细胞体外培养研究 | 第23-30页 |
| ·材料 | 第23页 |
| ·动物材料 | 第23页 |
| ·实验器材 | 第23页 |
| ·主要试剂 | 第23页 |
| ·仪器设备 | 第23页 |
| ·方法 | 第23-25页 |
| ·组织块制备 | 第23-24页 |
| ·组织块培养法牛乳腺上皮细胞的体外培养 | 第24-25页 |
| ·消化法培养牛乳腺上皮细胞的体外培养 | 第25页 |
| ·细胞生长曲线测定 | 第25页 |
| ·结果 | 第25-27页 |
| ·三种培养方法原代结果 | 第25-26页 |
| ·三种培养方法传代结果 | 第26-27页 |
| ·细胞生长曲线绘图 | 第27页 |
| ·三种方法获得乳腺细胞生长特性 | 第27页 |
| ·讨论 | 第27-30页 |
| 第三章 绿色荧光蛋白融合表达载体的构建及转染效率研究 | 第30-36页 |
| ·实验材料 | 第30页 |
| ·质粒和菌株 | 第30页 |
| ·实验方法 | 第30-32页 |
| ·pEGFP-hTERT 真核表达载体的构建 | 第30-31页 |
| ·新霉素(G418)最佳筛选浓度的确定 | 第31-32页 |
| ·结果 | 第32-34页 |
| ·重组载体pEGFP-htert 载体构建示意图 | 第32页 |
| ·pEGFP-hTERT 真核表达载体的鉴定 | 第32-33页 |
| ·转染结果 | 第33页 |
| ·转染效率结果统计学分析 | 第33-34页 |
| ·转融合蛋白的乳腺上皮细胞的类型鉴定 | 第34页 |
| ·讨论 | 第34-36页 |
| ·采用质脂体法转染牛乳腺上皮细胞 | 第34-35页 |
| ·影响牛乳腺细胞体外转基因效率的因素 | 第35-36页 |
| 第四章 牛乳腺上皮细胞转端粒酶基因及相关生物学鉴定 | 第36-42页 |
| ·实验材料 | 第36页 |
| ·质粒和菌株 | 第36页 |
| ·主要实验试剂 | 第36页 |
| ·实验方法 | 第36-39页 |
| ·融合表达载体pEGFP-TERT 纯化 | 第36-37页 |
| ·重组表达质粒转染牛乳腺上皮细胞 | 第37页 |
| ·G418 筛选及阳性细胞的获得 | 第37页 |
| ·RNA 提取及RT-PCR | 第37-38页 |
| ·牛乳腺上皮细胞的核型分析 | 第38-39页 |
| ·流式细胞仪检测细胞周期 | 第39页 |
| ·结果 | 第39-40页 |
| ·RT- PCR 分析 | 第39页 |
| ·核型分析结果 | 第39-40页 |
| ·细胞周期图结果检测 | 第40页 |
| ·讨论 | 第40-42页 |
| 结论 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-49页 |
| 附录一 | 第49-52页 |
| 英文缩略词表 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 作者简介 | 第54页 |