摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-11页 |
综述部分 | 第11-25页 |
第一章 HBD-3 的研究进展 | 第11-17页 |
·HBD-3 的结构 | 第11-12页 |
·HBD-3 基因的表达调控 | 第12-13页 |
·HBD-3 的抗菌作用机理 | 第13页 |
·HBD-3 的生物学功能 | 第13-15页 |
·抗菌作用 | 第13-14页 |
·抑制真菌、病毒作用 | 第14-15页 |
·HBD-3 的免疫学活性 | 第15页 |
·HBD-3 的基因工程研究 | 第15-16页 |
·结语 | 第16-17页 |
第二章 转基因动物应用的现状及前景 | 第17-25页 |
·转基因动物的应用 | 第17-22页 |
·转基因动物在医学上的应用 | 第17-19页 |
·转基因动物在农业上的应用 | 第19-21页 |
·转基因动物及抗病性 | 第21-22页 |
·转基因动物制作方法 | 第22-24页 |
·显微注射法 | 第22页 |
·逆转录病毒感染法 | 第22页 |
·精子载体法 | 第22-23页 |
·胚胎干细胞介导法 | 第23页 |
·人工酵母染色体法 | 第23页 |
·体细胞核移植法 | 第23-24页 |
·结语 | 第24-25页 |
实验部分 | 第25-49页 |
第三章 HBD-3 基因的克隆及鉴定 | 第25-30页 |
·材料和方法 | 第25-27页 |
·材料 | 第25-26页 |
·方法 | 第26-27页 |
·结果与分析 | 第27-29页 |
·总RNA 的完整性 | 第27-28页 |
·HBD-3 的PCR 扩增及重组质粒酶切鉴定 | 第28-29页 |
·HBD-3 基因序列测定结果 | 第29页 |
·讨论 | 第29-30页 |
第四章 乳腺特异性表达载体PEBCD 的的构建 | 第30-38页 |
·材料和方法 | 第30-33页 |
·材料 | 第30-31页 |
·方法 | 第31-32页 |
·初级乳腺载体构建 | 第32页 |
·引物设计 | 第32页 |
·PCR 扩增 | 第32页 |
·hd 的亚克隆和酶切鉴定 | 第32页 |
·初级乳腺载体pBCD 构建 | 第32页 |
·乳腺特异性表达载体pEBCD 的构建 | 第32-33页 |
·结果与分析 | 第33-37页 |
·β-酪蛋白5’调控序列的PCR 扩增及亚克隆酶切鉴定 | 第33-34页 |
·β-酪蛋白3’调控序列的PCR 扩增及亚克隆酶切鉴定 | 第34-35页 |
·改建重组质粒pBCP 的酶切鉴定 | 第35-36页 |
·重组质粒pMhD 的酶切鉴定 | 第36页 |
·初级乳腺载体pBCD 的酶切鉴定 | 第36页 |
·乳腺特异性表达载体pEBCD 的酶切鉴定 | 第36-37页 |
·讨论 | 第37页 |
·小结 | 第37-38页 |
第五章 乳腺特异性表达载体的真核转染及检测分析 | 第38-49页 |
·材料和方法 | 第38-45页 |
·材料 | 第38-39页 |
·方法 | 第39-45页 |
·结果 | 第45-47页 |
·转染胎儿成纤维上皮细胞和乳腺上皮细胞的G418 抗性筛选 | 第45页 |
·转染效率的检测 | 第45-46页 |
·阳性细胞PCR 鉴定及RT-PCR 鉴定 | 第46-47页 |
·诱导产物的Western blotting 检测 | 第47页 |
·讨论 | 第47-48页 |
·小结 | 第48-49页 |
结论 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-58页 |
附录1 试验仪器 | 第58-59页 |
附录2 试验试剂及配制方法 | 第59-62页 |
缩略语 | 第62-63页 |
致谢 | 第63-64页 |
作者简介 | 第64页 |