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HBD-3基因乳腺特异性载体的构建及真核表达

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-11页
综述部分第11-25页
 第一章 HBD-3 的研究进展第11-17页
   ·HBD-3 的结构第11-12页
     ·HBD-3 基因的表达调控第12-13页
   ·HBD-3 的抗菌作用机理第13页
     ·HBD-3 的生物学功能第13-15页
     ·抗菌作用第13-14页
     ·抑制真菌、病毒作用第14-15页
     ·HBD-3 的免疫学活性第15页
   ·HBD-3 的基因工程研究第15-16页
   ·结语第16-17页
 第二章 转基因动物应用的现状及前景第17-25页
   ·转基因动物的应用第17-22页
     ·转基因动物在医学上的应用第17-19页
     ·转基因动物在农业上的应用第19-21页
     ·转基因动物及抗病性第21-22页
   ·转基因动物制作方法第22-24页
     ·显微注射法第22页
     ·逆转录病毒感染法第22页
     ·精子载体法第22-23页
     ·胚胎干细胞介导法第23页
     ·人工酵母染色体法第23页
     ·体细胞核移植法第23-24页
   ·结语第24-25页
实验部分第25-49页
 第三章 HBD-3 基因的克隆及鉴定第25-30页
   ·材料和方法第25-27页
     ·材料第25-26页
     ·方法第26-27页
   ·结果与分析第27-29页
     ·总RNA 的完整性第27-28页
     ·HBD-3 的PCR 扩增及重组质粒酶切鉴定第28-29页
     ·HBD-3 基因序列测定结果第29页
   ·讨论第29-30页
 第四章 乳腺特异性表达载体PEBCD 的的构建第30-38页
   ·材料和方法第30-33页
     ·材料第30-31页
     ·方法第31-32页
     ·初级乳腺载体构建第32页
       ·引物设计第32页
       ·PCR 扩增第32页
       ·hd 的亚克隆和酶切鉴定第32页
       ·初级乳腺载体pBCD 构建第32页
     ·乳腺特异性表达载体pEBCD 的构建第32-33页
   ·结果与分析第33-37页
     ·β-酪蛋白5’调控序列的PCR 扩增及亚克隆酶切鉴定第33-34页
     ·β-酪蛋白3’调控序列的PCR 扩增及亚克隆酶切鉴定第34-35页
     ·改建重组质粒pBCP 的酶切鉴定第35-36页
     ·重组质粒pMhD 的酶切鉴定第36页
     ·初级乳腺载体pBCD 的酶切鉴定第36页
     ·乳腺特异性表达载体pEBCD 的酶切鉴定第36-37页
   ·讨论第37页
   ·小结第37-38页
 第五章 乳腺特异性表达载体的真核转染及检测分析第38-49页
   ·材料和方法第38-45页
     ·材料第38-39页
     ·方法第39-45页
   ·结果第45-47页
     ·转染胎儿成纤维上皮细胞和乳腺上皮细胞的G418 抗性筛选第45页
     ·转染效率的检测第45-46页
     ·阳性细胞PCR 鉴定及RT-PCR 鉴定第46-47页
     ·诱导产物的Western blotting 检测第47页
   ·讨论第47-48页
   ·小结第48-49页
结论第49-50页
参考文献第50-58页
附录1 试验仪器第58-59页
附录2 试验试剂及配制方法第59-62页
缩略语第62-63页
致谢第63-64页
作者简介第64页

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