大鼠骨髓间充质干细胞生物反应器灌注培养细胞数量即时监测与分化的研究
| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-18页 |
| 1. 骨髓 MSC 及其扩增、分化研究简介 | 第11-15页 |
| ·骨髓间充质干细胞的发现 | 第11页 |
| ·骨髓间充质干细胞的分离培养方法 | 第11-12页 |
| ·骨髓间充质干细胞的一般特性 | 第12-13页 |
| ·骨髓间充质干细胞分化潜能 | 第13-14页 |
| ·间充质干细胞应用面临的问题 | 第14-15页 |
| 2. 细胞数量监测 | 第15-18页 |
| 第二章 材料与方法 | 第18-28页 |
| 1. 实验材料、仪器与试剂 | 第18-19页 |
| ·材料 | 第18页 |
| ·主要仪器和设备 | 第18-19页 |
| ·试剂 | 第19页 |
| 2. 实验方法 | 第19-28页 |
| ·DMEM/α-MEM 培养液的配制 | 第19-20页 |
| ·提取大鼠骨髓间充质干细胞及原代培养 | 第20页 |
| ·VERO 细胞及rMSCs 细胞培养 | 第20-21页 |
| ·大鼠间充质干细胞的生长曲线与形态 | 第21页 |
| ·连续灌注培养生物反应器系统 | 第21-22页 |
| ·24 孔板半连续灌注培养 | 第22-23页 |
| ·生物反应器连续灌注培养 | 第23页 |
| ·大鼠骨髓间充质干细胞成骨诱导分化 | 第23页 |
| ·大鼠骨髓间充质干细胞成诱导脂分化 | 第23页 |
| ·台肦蓝计数活细胞密度 | 第23页 |
| ·CCK-8 法检测细胞增殖活性 | 第23-24页 |
| ·碱性磷酸酶染色 | 第24页 |
| ·茜素红染色 | 第24页 |
| ·碱性磷酸酶检测 | 第24-25页 |
| ·油红O 染色 | 第25页 |
| ·生长动力学分析 | 第25页 |
| ·代谢分析 | 第25-26页 |
| ·24 孔板半连续培养动力学 | 第26页 |
| ·生物反应器的连续灌注培养动力学 | 第26-27页 |
| ·数据分析 | 第27-28页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第28-45页 |
| 1. 细胞生长形态及生长曲线 | 第28-32页 |
| ·Vero 细胞在自制 T 瓶上的生长形态及密度 | 第28-29页 |
| ·rMSCs 的原代培养生长形态及生长曲线 | 第29-32页 |
| 2. 生物反应器系统稳定性试验 | 第32页 |
| ·无细胞无培养液的连续灌注 | 第32页 |
| ·VERO 细胞的连续灌注 | 第32页 |
| 3. 24孔板半连续培养动力学 | 第32-35页 |
| ·生长动力学 | 第32-33页 |
| ·代谢动力学 | 第33-35页 |
| 4. 生物反应器的连续灌注培养动力学 | 第35-39页 |
| ·生物反应器生长动力学 | 第35-39页 |
| 5. rMSCs 成骨分化 | 第39-43页 |
| ·rMSCs 的成骨分化 ALP 活性检测 | 第39-42页 |
| ·rMSCs 成骨分化ALP 染色与茜素红染色 | 第42-43页 |
| 6. rMSCs 成脂分化 | 第43-45页 |
| 第四章 讨论 | 第45-49页 |
| 1. 原代rMSCs 的分离培养 | 第45-46页 |
| 2. 骨髓 MSCs 的确定 | 第46页 |
| 3. 细胞代谢 | 第46-47页 |
| 4. 自制生物反应器 | 第47-49页 |
| 第五章 结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 硕士期间发表或接受录用论文及专利 | 第58-60页 |
