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鹅和番鸭细小病毒VP3-ELISA诊断方法的建立

摘要第1-7页
Abstract第7-13页
第一章 引言第13-21页
   ·水禽细小病毒病简介第13页
   ·水禽细小病毒的特性第13-16页
     ·形态特点和理化特性第13-14页
     ·基因组结构与功能第14-15页
     ·病毒结构蛋白及其功能第15页
     ·水禽细小病毒致病性与病毒培养第15-16页
     ·抗原性分析第16页
   ·水禽细小病毒诊断方法的研究进展第16-18页
     ·病毒的分离和鉴定第16-17页
     ·病毒的电境观察第17页
     ·病毒的血清学鉴定第17页
     ·病毒的分子生物学鉴定第17-18页
   ·水禽细小病毒病的预防第18页
   ·ELISA 诊断方法的研究进展第18-19页
   ·本研究的目的和意义第19-21页
第二章 GPV VP3 蛋白的原核表达、纯化、定量和 Western blot 分析第21-27页
   ·材料和方法第21-23页
     ·菌株、质粒和血清第21页
     ·工具酶和主要试剂第21页
     ·仪器设备第21页
     ·GPV VP3 蛋白的表达第21页
     ·重组蛋白pET30a-VP3 的SDS-PAGE 电泳分析第21-22页
     ·重组蛋白pET30a-VP3 的纯化第22-23页
     ·重组蛋白pET30a-VP3 的定量和保存第23页
     ·重组蛋白pET30a-VP3 的Western blot 分析第23页
   ·结果第23-25页
     ·重组蛋白pET30a-VP3 的表达、纯化第23-24页
     ·重组蛋白pET30a-VP3 的定量第24页
     ·重组蛋白pET30a-VP3 的Western blot 分析第24-25页
   ·讨论第25-26页
     ·原核表达重组蛋白的纯化第25页
     ·纯化重组蛋白的免疫活性第25-26页
   ·小结第26-27页
第三章 水禽细小病毒VP3-ELISA 的建立和评价第27-39页
   ·材料和方法第27-31页
     ·毒株、血清和禽胚第27页
     ·工具酶和主要试剂第27页
     ·仪器设备第27页
     ·间接ELISA 操作程序第27-28页
     ·抗原最佳包被浓度和血清最佳稀释度的确定第28页
     ·封闭时间的确定第28-29页
     ·待检血清最佳作用时间的确定第29页
     ·酶标抗体工作浓度与作用时间的确定第29页
     ·底物显色时间确定实验第29页
     ·阴阳性判定标准的确定第29页
     ·特异性试验第29页
     ·敏感性实验第29页
     ·重复性试验第29-30页
     ·血清样品的检测第30-31页
   ·结果第31-36页
     ·抗原最佳包被浓度和血清最佳稀释度的确定第31页
     ·封闭时间的确定第31-32页
     ·待检血清最适作用时间的确定第32页
     ·酶标抗体工作浓度与作用时间的确定第32页
     ·底物显色时间确定实验第32-33页
     ·阴阳性判定标准的确定第33-34页
     ·特异性试验第34页
     ·敏感性实验第34页
     ·重复性试验第34-35页
     ·血清样品的检测第35-36页
   ·讨论第36-37页
   ·小结第37-39页
第四章 稳定性试验第39-43页
   ·材料和方法第39-40页
     ·血清第39页
     ·工具酶和主要试剂第39页
     ·仪器设备第39页
     ·试验设计第39-40页
   ·结果第40-42页
     ·新包被 ELISA 板检测结果第40页
     ·保存三个月检测结果第40页
     ·保存六个月检测结果第40-41页
     ·保存九个月检测结果第41页
     ·综合分析保存效果第41-42页
   ·讨论第42页
   ·小结第42-43页
第五章 全文结论第43-44页
参考文献第44-48页
附录第48-50页
致谢第50-51页
作者简历第51页

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