摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-13页 |
第一章 引言 | 第13-21页 |
·水禽细小病毒病简介 | 第13页 |
·水禽细小病毒的特性 | 第13-16页 |
·形态特点和理化特性 | 第13-14页 |
·基因组结构与功能 | 第14-15页 |
·病毒结构蛋白及其功能 | 第15页 |
·水禽细小病毒致病性与病毒培养 | 第15-16页 |
·抗原性分析 | 第16页 |
·水禽细小病毒诊断方法的研究进展 | 第16-18页 |
·病毒的分离和鉴定 | 第16-17页 |
·病毒的电境观察 | 第17页 |
·病毒的血清学鉴定 | 第17页 |
·病毒的分子生物学鉴定 | 第17-18页 |
·水禽细小病毒病的预防 | 第18页 |
·ELISA 诊断方法的研究进展 | 第18-19页 |
·本研究的目的和意义 | 第19-21页 |
第二章 GPV VP3 蛋白的原核表达、纯化、定量和 Western blot 分析 | 第21-27页 |
·材料和方法 | 第21-23页 |
·菌株、质粒和血清 | 第21页 |
·工具酶和主要试剂 | 第21页 |
·仪器设备 | 第21页 |
·GPV VP3 蛋白的表达 | 第21页 |
·重组蛋白pET30a-VP3 的SDS-PAGE 电泳分析 | 第21-22页 |
·重组蛋白pET30a-VP3 的纯化 | 第22-23页 |
·重组蛋白pET30a-VP3 的定量和保存 | 第23页 |
·重组蛋白pET30a-VP3 的Western blot 分析 | 第23页 |
·结果 | 第23-25页 |
·重组蛋白pET30a-VP3 的表达、纯化 | 第23-24页 |
·重组蛋白pET30a-VP3 的定量 | 第24页 |
·重组蛋白pET30a-VP3 的Western blot 分析 | 第24-25页 |
·讨论 | 第25-26页 |
·原核表达重组蛋白的纯化 | 第25页 |
·纯化重组蛋白的免疫活性 | 第25-26页 |
·小结 | 第26-27页 |
第三章 水禽细小病毒VP3-ELISA 的建立和评价 | 第27-39页 |
·材料和方法 | 第27-31页 |
·毒株、血清和禽胚 | 第27页 |
·工具酶和主要试剂 | 第27页 |
·仪器设备 | 第27页 |
·间接ELISA 操作程序 | 第27-28页 |
·抗原最佳包被浓度和血清最佳稀释度的确定 | 第28页 |
·封闭时间的确定 | 第28-29页 |
·待检血清最佳作用时间的确定 | 第29页 |
·酶标抗体工作浓度与作用时间的确定 | 第29页 |
·底物显色时间确定实验 | 第29页 |
·阴阳性判定标准的确定 | 第29页 |
·特异性试验 | 第29页 |
·敏感性实验 | 第29页 |
·重复性试验 | 第29-30页 |
·血清样品的检测 | 第30-31页 |
·结果 | 第31-36页 |
·抗原最佳包被浓度和血清最佳稀释度的确定 | 第31页 |
·封闭时间的确定 | 第31-32页 |
·待检血清最适作用时间的确定 | 第32页 |
·酶标抗体工作浓度与作用时间的确定 | 第32页 |
·底物显色时间确定实验 | 第32-33页 |
·阴阳性判定标准的确定 | 第33-34页 |
·特异性试验 | 第34页 |
·敏感性实验 | 第34页 |
·重复性试验 | 第34-35页 |
·血清样品的检测 | 第35-36页 |
·讨论 | 第36-37页 |
·小结 | 第37-39页 |
第四章 稳定性试验 | 第39-43页 |
·材料和方法 | 第39-40页 |
·血清 | 第39页 |
·工具酶和主要试剂 | 第39页 |
·仪器设备 | 第39页 |
·试验设计 | 第39-40页 |
·结果 | 第40-42页 |
·新包被 ELISA 板检测结果 | 第40页 |
·保存三个月检测结果 | 第40页 |
·保存六个月检测结果 | 第40-41页 |
·保存九个月检测结果 | 第41页 |
·综合分析保存效果 | 第41-42页 |
·讨论 | 第42页 |
·小结 | 第42-43页 |
第五章 全文结论 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-48页 |
附录 | 第48-50页 |
致谢 | 第50-51页 |
作者简历 | 第51页 |