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禽流感病毒核蛋白的真核表达及蛋白芯片检测技术初步研究

摘要第1-7页
Abstract第7-13页
第一章 文献综述第13-32页
   ·禽流感的研究现状第13-21页
     ·禽流感的病原及流行病学第13-15页
     ·禽流感病毒核蛋白的结构与功能第15-16页
     ·禽流感病毒非结构蛋白的结构与功能第16-18页
     ·禽流感诊断技术的研究现状及进展第18-21页
   ·昆虫杆状病毒表达系统第21-26页
     ·杆状病毒的分类第21页
     ·杆状病毒的复制与分子生物学特性第21-22页
     ·杆状病毒的基因及其功能第22页
     ·杆状病毒表达系统重组杆状病毒的构建和筛选第22-23页
     ·杆状病毒表达系统的特点第23-24页
     ·影响杆状病毒表达系统表达外源蛋白的因素第24-25页
     ·结束语第25-26页
   ·蛋白质芯片技术及其研究状况第26-30页
     ·蛋白质芯片的构成及使用第26-28页
     ·蛋白质芯片的检测第28页
     ·蛋白质芯片的应用第28-30页
     ·蛋白质芯片的优点第30页
     ·蛋白芯片的应用前景第30页
   ·本研究的目的和意义第30-32页
第二章 流感病毒核蛋白的真核表达第32-43页
   ·实验材料第32-33页
     ·病毒与血清第32页
     ·主要试剂第32页
     ·主要实验仪器与材料第32页
     ·配制的溶液第32-33页
   ·实验方法第33-38页
     ·引物与合成第33-34页
     ·病毒基因组RNA 的提取和cDNA 的制备第34-35页
     ·NP 杆状病毒转移载体的构建第35-36页
     ·NP 杆状病毒表达载体的构建第36页
     ·目的蛋白的表达第36-37页
     ·目的蛋白的SDS-PAGE 和Western-blot 检测第37-38页
   ·结果第38-42页
     ·RT-PCR 电泳结果及pFast-NP 的鉴定结果第38-40页
     ·重组转座子rBacmid-NP 的鉴定结果第40页
     ·免疫荧光检测效果第40-41页
     ·目的蛋白的SDS-PAGE 和Western-blot 检测结果第41-42页
   ·讨论第42-43页
第三章 荧光蛋白质芯片体系的建立第43-59页
   ·实验材料第43页
     ·主要材料和仪器第43页
     ·主要试剂及溶液第43页
   ·实验方法第43-47页
     ·通用点样、封闭、杂交及扫描程序第43-45页
     ·蛋白检测芯片的制备及各种条件的优化第45-47页
   ·实验结果第47-56页
     ·病毒蛋白纯化浓度第47页
     ·二抗浓度对检测结果的影响第47-48页
     ·抗原浓度对检测结果的影响第48-49页
     ·一抗浓度对检测结果的影响第49-50页
     ·点样后固定时间对信号值的影响第50-51页
     ·四种封闭缓冲液的比较第51-52页
     ·一抗作用时间对检测结果的影响第52-53页
     ·二抗作用时间对检测结果的影响第53页
     ·免疫血清和感染血清的检测结果第53-54页
     ·荧光鉴别诊断蛋白芯片的应用检测第54-55页
     ·荧光鉴别诊断蛋白芯片对现地样品的检测结果第55-56页
   ·讨论第56-59页
结论第59-60页
参考文献第60-67页
致谢第67-68页
作者简历第68页

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