| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-8页 |
| 引言 | 第8-9页 |
| 1 文献综述 | 第9-20页 |
| ·植物基因组学 | 第9-11页 |
| ·结构基因组学 | 第9-10页 |
| ·比较基因组学 | 第10页 |
| ·功能基因组学 | 第10-11页 |
| ·EST技术概述 | 第11-18页 |
| ·EST技术的起源 | 第11-12页 |
| ·EST技术原理和方法 | 第12页 |
| ·EST数据库 | 第12-13页 |
| ·EST序列分析软件 | 第13-14页 |
| ·EST序列同源产物的功能分类 | 第14-16页 |
| ·EST技术的应用 | 第16-18页 |
| ·构建遗传学图谱 | 第16-17页 |
| ·分离和鉴定新基因 | 第17页 |
| ·基因表达谱的研究 | 第17-18页 |
| ·用于制备DNA芯片 | 第18页 |
| ·试验内容及意义 | 第18-20页 |
| 试验正文 | 第20-55页 |
| 2 试验材料 | 第20页 |
| ·植物材料 | 第20页 |
| ·菌株与载体 | 第20页 |
| 3 试验技术路线及方法 | 第20-29页 |
| ·苜蓿总RNA的提取 | 第21-23页 |
| ·实验材料预处理 | 第21页 |
| ·总RNA的提取 | 第21-23页 |
| ·RNA纯度及其完整性检测 | 第23页 |
| ·mRNA的分离 | 第23页 |
| ·cDNA文库构建 | 第23-27页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第23-24页 |
| ·双链cDNA的合成(LD-PCR) | 第24页 |
| ·蛋白酶K消化与酶切 | 第24-25页 |
| ·cDNA片段的分级分离 | 第25-26页 |
| ·准备CHROMA SPIN-400柱 | 第25页 |
| ·cDNA片段的层析 | 第25-26页 |
| ·cDNA与载体pDNR-LIB连接及连接产物纯化 | 第26-27页 |
| ·大肠杆菌的转化 | 第27页 |
| ·文库质量鉴定 | 第27-28页 |
| ·文库滴度测定 | 第27页 |
| ·文库插入片段大小及重组率测定 | 第27-28页 |
| ·引物设计 | 第28页 |
| ·序列分析 | 第28-29页 |
| ·测序 | 第28页 |
| ·原始数据的预处理 | 第28页 |
| ·EST序列同源性比较和EST推测编码产物分类 | 第28-29页 |
| 4 试验结果与分析 | 第29-45页 |
| ·总RNA提取结果分析 | 第29-30页 |
| ·mRNA的分离 | 第30-31页 |
| ·文库质量鉴定 | 第31-33页 |
| ·LD-PCR产物 | 第31页 |
| ·cDNA的分级分离及体外连接 | 第31-32页 |
| ·未扩增文库滴度测定 | 第32-33页 |
| ·重组率及文库的PCR鉴定 | 第33页 |
| ·有效EST的获得 | 第33-35页 |
| ·EST序列同源性比较分析和功能已知蛋白的功能分类 | 第35-36页 |
| ·相关蛋白分析 | 第36-45页 |
| 5 结论与讨论 | 第45-51页 |
| ·结论 | 第45-46页 |
| ·讨论 | 第46-51页 |
| 参考文献 | 第51-55页 |
| 导师简介 | 第55-56页 |
| 个人简介 | 第56-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 附录1 试剂、溶液、仪器 | 第58-60页 |
| 附录2 本论文常用英文缩写 | 第60页 |