| 中文摘要 | 第10-12页 |
| ABSTRACT | 第12-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-25页 |
| 1.1 抗菌肽 | 第15-19页 |
| 1.1.1 抗菌肽简介 | 第15-17页 |
| 1.1.2 具有抗菌活性的植物蛋白酶抑制剂 | 第17-18页 |
| 1.1.3 α-hairpinins结构蛋白家族 | 第18-19页 |
| 1.2 抗菌肽的作用机制 | 第19-20页 |
| 1.2.1 膜破坏机制 | 第19-20页 |
| 1.2.2 非膜破坏机制 | 第20页 |
| 1.3 抗菌肽的选择性 | 第20-22页 |
| 1.4 抗菌肽的分子改造 | 第22-23页 |
| 1.5 研究目的及意义 | 第23-25页 |
| 第二章 苦荞α-螺旋发夹抗菌肽FtAMP的原核表达与纯化 | 第25-37页 |
| 2.1 引言 | 第25页 |
| 2.2 材料 | 第25-26页 |
| 2.2.1 菌株及主要试剂 | 第25-26页 |
| 2.2.2 主要仪器 | 第26页 |
| 2.3 方法 | 第26-30页 |
| 2.3.1 FtAMP基因的获取 | 第26页 |
| 2.3.2 FtAMP基因原核表达载体的构建 | 第26-29页 |
| 2.3.3 融合蛋白GST-FtAMP的表达与条件优化 | 第29-30页 |
| 2.3.4 重组FtAMP的纯化 | 第30页 |
| 2.3.5 FtAMP抑制活性的测定 | 第30页 |
| 2.4 结果 | 第30-36页 |
| 2.4.1 pGEX-4T-1-FtAMP的构建 | 第30-31页 |
| 2.4.2 融合蛋白GST-FtAMP表达及条件优化 | 第31-33页 |
| 2.4.3 苦荞α-螺旋抗菌肽FtAMP的纯化 | 第33-35页 |
| 2.4.4 FtAMP胰蛋白酶抑制活性的测定 | 第35-36页 |
| 2.5 讨论 | 第36-37页 |
| 第三章 FtAMP蛋白酶抑制活性与抗菌活性的关系 | 第37-51页 |
| 3.1 引言 | 第37页 |
| 3.2 材料 | 第37-38页 |
| 3.2.1 菌株及主要试剂 | 第37页 |
| 3.2.2 主要仪器 | 第37-38页 |
| 3.3 方法 | 第38-41页 |
| 3.3.1 pGEX-4T-1-FtAMP-R21A/FtAMP-R21F的构建 | 第38页 |
| 3.3.2 FtAMP-R21A和FtAMP-R21F的原核表达与纯化 | 第38页 |
| 3.3.3 蛋白酶抑制活性的测定 | 第38-39页 |
| 3.3.4 抗菌活性的测定 | 第39-40页 |
| 3.3.5 FtAMP分子结构中二硫键缺失对其生物活性的影响 | 第40页 |
| 3.3.6 FtAMP分子中N-端与C-端两端螺旋肽合成与测定 | 第40页 |
| 3.3.7 统计学分析 | 第40-41页 |
| 3.4 结果 | 第41-49页 |
| 3.4.1 FtAMP及其突变体的二级结构 | 第41-42页 |
| 3.4.2 FtAMP-R21A和FtAMP-R21F的获取 | 第42-44页 |
| 3.4.3 蛋白酶抑制活性的测定 | 第44-45页 |
| 3.4.4 抗菌活性的测定 | 第45-48页 |
| 3.4.5 FtAMP分子结构中二硫键缺失对其生物活性的影响 | 第48-49页 |
| 3.4.6 FtAMP分子中N-端与C-端两端螺旋肽合成与测定 | 第49页 |
| 3.5 讨论 | 第49-51页 |
| 第四章 FtAMP的分子改造及其抗菌活性的研究 | 第51-63页 |
| 4.1 引言 | 第51页 |
| 4.2 材料 | 第51页 |
| 4.2.1 菌株及主要试剂 | 第51页 |
| 4.2.2 主要仪器 | 第51页 |
| 4.3 方法 | 第51-53页 |
| 4.3.1 FtAMP的分子设计 | 第51-52页 |
| 4.3.2 设计多肽的突变构建表达及纯化 | 第52页 |
| 4.3.3 抑制活性分析 | 第52页 |
| 4.3.4 圆二色光谱分析 | 第52页 |
| 4.3.5 抗真菌活性的测定 | 第52-53页 |
| 4.3.6 溶血活性分析 | 第53页 |
| 4.3.7 细胞选择性指数计算 | 第53页 |
| 4.3.8 统计学分析 | 第53页 |
| 4.4 结果 | 第53-60页 |
| 4.4.1 FtAMP的分子设计及理化参数 | 第53-55页 |
| 4.4.2 设计多肽的表达及纯化 | 第55页 |
| 4.4.3 胰蛋白酶抑制活性分析 | 第55页 |
| 4.4.4 圆二色光谱分析 | 第55-57页 |
| 4.4.5 抗真菌活性分析 | 第57-58页 |
| 4.4.6 溶血活性分析 | 第58-59页 |
| 4.4.7 细胞选择性计算 | 第59-60页 |
| 4.5 讨论 | 第60-63页 |
| 小结与展望 | 第63-65页 |
| 参考文献 | 第65-71页 |
| 攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第71-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 个人简况及联系方式 | 第73-76页 |
