| 致谢 | 第4-5页 |
| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 缩略词表 | 第12-13页 |
| 文献综述 | 第13-19页 |
| 引言 | 第19-20页 |
| 1 材料与方法 | 第20-34页 |
| 1.1 材料 | 第20-23页 |
| 1.1.1 模板和实验动物来源 | 第20页 |
| 1.1.2 质粒和菌株 | 第20页 |
| 1.1.3 工具酶与相关试剂 | 第20页 |
| 1.1.4 主要实验试剂配置 | 第20-23页 |
| 1.1.5 主要实验仪器 | 第23页 |
| 1.2 方法 | 第23-34页 |
| 1.2.1 引物设计与合成 | 第23-24页 |
| 1.2.2 Megaprimer PCR定点突变方法扩增CAV基因组 | 第24-26页 |
| 1.2.3 含点突变CAV基因与pEASY-Blunt Zreo连接 | 第26页 |
| 1.2.4 感受态细胞的制备 | 第26页 |
| 1.2.5 含点突变CAV基因组重组质粒pEASY-CAV转化大肠杆菌DH5α | 第26页 |
| 1.2.6 含点突变CAV基因组重组质粒pEASY-CAV的鉴定 | 第26-27页 |
| 1.2.7 含点突变重组质粒pEASY-CAV的抽提 | 第27页 |
| 1.2.8 含点突变CAV基因组重组质粒pcDNA-2CAV的构建 | 第27-29页 |
| 1.2.9 真核质粒的抽提和去内毒素 | 第29页 |
| 1.2.10 鸡胚接种检测 | 第29-31页 |
| 1.2.11 重组质粒转染细胞及病毒拯救 | 第31-34页 |
| 2 结果与分析 | 第34-43页 |
| 2.1 Megaprimer PCR定点突变方法扩增结果 | 第34页 |
| 2.2 含点突变CAV基因组重组质粒pEASY-CAV的构建和鉴定 | 第34-35页 |
| 2.3 含点突变CAV基因组重组质粒pcDNA-CAV的构建 | 第35-36页 |
| 2.4 含点突变CAV基因组重组质粒pcDNA-2CAV的构建和鉴定 | 第36-37页 |
| 2.5 鸡胚卵黄囊接种及相关检测 | 第37-38页 |
| 2.6 细胞转染以及拯救病毒侵染细胞后的观察和检测 | 第38-43页 |
| 2.6.1 重组质粒侵染细胞后电子显微镜观察 | 第38-39页 |
| 2.6.2 重组质粒转染细胞后凋亡检测 | 第39-41页 |
| 2.6.3 重组质粒转染细胞后病毒致病因子VP3蛋白在细胞内的表达 | 第41-42页 |
| 2.6.4 拯救的病毒侵染MSB1细胞后诱导凋亡情况 | 第42-43页 |
| 3 讨论 | 第43-45页 |
| 4 结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-54页 |
| 作者简介 | 第54页 |
