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自噬对猪克隆早期胚胎中供体线粒体清除及重编程的影响初探

摘要第7-9页
ABSTRACT第9-11页
缩略语中英文对照表第12-14页
绪论第14-15页
第一部分 文献综述第15-27页
    第一章 克隆胚中供体细胞源线粒体命运的研究进展第15-23页
        1 克隆胚中供体线粒体的命运第15-19页
            1.1 克隆后代中的供体线粒体可能被完全清除第15-17页
            1.2 供体线粒体能以极低含量与母源线粒体共存第17-18页
            1.3 供体线粒体可能主导重构胚及其后代的发育第18-19页
        2 供体线粒体可能的清除机制第19-23页
            2.1 胞吐第19页
            2.2 泛素蛋白酶体系统第19-20页
            2.3 自噬第20-23页
    第二章 克隆胚中重编程的研究进展第23-27页
        1 克隆胚中的重编程第23-25页
        2 自噬与重编程第25-27页
第二部分 试验研究第27-65页
    第三章 猪克隆胚中供体线粒体清除机制初探第27-51页
        1 试验材料第27-29页
            1.1 试验仪器第27-28页
            1.2 主要耗材第28页
            1.3 细胞、卵母细胞及胚胎培养相关试剂第28页
            1.4 染色相关试剂第28-29页
            1.5 Western blot相关试剂第29页
        2 试验方法第29-36页
            2.1 核移植体细胞的准备第29-31页
            2.2 猪卵母细胞的采集与体外成熟第31页
            2.3 孤雌激活胚以及手工克隆胚的构建第31-33页
            2.4 3-MA以及CB处理第33-34页
            2.5 免疫荧光染色第34-35页
            2.6 透射电镜观察第35页
            2.7 Western blot分析第35-36页
            2.8 数据分析第36页
        3 试验结果第36-46页
            3.1 克隆胚中供体线粒体的分布变化第36-39页
            3.2 克隆胚与孤雌胚中LC3荧光的分布变化第39-41页
            3.3 调节自噬对供体线粒体清除的影响第41-43页
            3.4 克隆胚与孤雌胚的电镜观察第43-44页
            3.5 胞质排出现象的观察及其对供体线粒体清除特异性的初探第44-46页
        4 讨论第46-51页
    第四章 自噬对猪克隆早期胚胎重编程的影响初探第51-65页
        1 试验材料第51-52页
            1.1 试验仪器第51页
            1.2 耗材第51-52页
            1.3 试验试剂第52页
        2 试验方法第52-56页
            2.1 引物设计第52-53页
            2.2 LC3 siRNA转染第53-54页
            2.3 雷帕霉素处理第54页
            2.4 基因表达水平评估第54-56页
            2.5 统计分析第56页
        3 试验结果第56-61页
            3.1 转染LC3 siRNA对猪克隆胚的影响第56-59页
            3.2 雷帕霉素对猪克隆胚的影响第59-61页
        4 讨论第61-65页
全文结论第65-67页
参考文献第67-79页
附录第79-83页
致谢第83-85页
攻读硕士学位期间发表的论文第85页

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