| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 英文缩略词表 | 第11-13页 |
| 绪论 | 第13-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-28页 |
| 综述一 离心去脂对孤雌激活胚胎甘油三酯和LIPIN1变化的影响 | 第14-24页 |
| 1 脂滴 | 第14-16页 |
| 1.1 卵母细胞中的脂滴 | 第14页 |
| 1.2 脂滴生成机制 | 第14-15页 |
| 1.3 脂滴相关蛋白及其他分子 | 第15-16页 |
| 2 甘油三酯 | 第16-19页 |
| 2.1 调控甘油三酯生成的通路 | 第16-17页 |
| 2.2 甘油三酯的水解 | 第17-18页 |
| 2.3 甘油三酯在猪卵母细胞成熟及胚胎发育中的变化 | 第18-19页 |
| 3 LIPIN蛋白 | 第19-24页 |
| 3.1 LIPIN1的发现与结构 | 第19-20页 |
| 3.2 LIPIN蛋白的功能 | 第20-21页 |
| 3.3 不同组织中LIPIN蛋白功能和脂滴代谢 | 第21-24页 |
| 综述二 猪卵母细胞和胚胎电穿孔RNA干扰方法建立 | 第24-28页 |
| 1 RNA干扰的发现 | 第24页 |
| 2 RNA干扰的定义和原理 | 第24-25页 |
| 3 RNA干扰的主要特点 | 第25页 |
| 4 RNA干扰的导入方法 | 第25-26页 |
| 5 RNA干扰在繁殖学上的应用 | 第26页 |
| 6 电穿孔转染方法 | 第26-28页 |
| 第二章 试验研究 | 第28-56页 |
| 实验一 离心去脂对孤雌激活胚胎甘油三酯和LIPIN1变化的影响 | 第28-50页 |
| 1 材料和方法 | 第28-37页 |
| 1.1 试验仪器与耗材 | 第28-29页 |
| 1.2 实验试剂 | 第29-31页 |
| 1.3 卵巢和卵母细胞的采集 | 第31页 |
| 1.4 卵母细胞的体外成熟 | 第31-32页 |
| 1.5 卵母细胞离心去脂 | 第32页 |
| 1.6 卵母细胞孤雌激活 | 第32页 |
| 1.7 去脂胚胎发育能力检测 | 第32页 |
| 1.8 LIPIN1和脂滴染色 | 第32-33页 |
| 1.9 三酰甘油含量检测 | 第33页 |
| 1.10 基因表达水平检测 | 第33-36页 |
| 1.11 Western blot分析 | 第36-37页 |
| 1.12 统计分析 | 第37页 |
| 2 实验设计 | 第37-38页 |
| 3 试验结果 | 第38-46页 |
| 3.1 离心去脂对猪孤雌激活胚胎发育潜能的影响 | 第38页 |
| 3.2 离心去脂法对于脂滴去除效果和脂滴分布 | 第38-39页 |
| 3.3 离心去脂后三酰甘油含量变化检测 | 第39页 |
| 3.4 三酰甘油生成相关的基因以及核因子PPARa和PPARy表达 | 第39-45页 |
| 3.5 离心去脂后LIPIN1分布变化 | 第45-46页 |
| 3.6 离心去脂后LIPIN1蛋白表达量变化 | 第46页 |
| 4 讨论 | 第46-50页 |
| 实验二 卵母细胞电穿孔RNA干扰方法建立 | 第50-56页 |
| 1 材料和方法 | 第50页 |
| 2 实验设计 | 第50-51页 |
| 3 实验结果 | 第51-54页 |
| 3.1 改良激活槽 | 第51-52页 |
| 3.2 建立电激活干扰方法 | 第52页 |
| 3.3 方法有效性检测 | 第52-53页 |
| 3.4 有效干扰片段选择 | 第53页 |
| 3.5 最佳干扰浓度选择 | 第53-54页 |
| 3.6 LIPIN1干扰实验 | 第54页 |
| 4 讨论 | 第54-56页 |
| 全文结论 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-74页 |
| 致谢 | 第74-76页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第76页 |
