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GhHAP5的表达分析及其互作蛋白的筛选鉴定

摘要第1-8页
Abstract第8-10页
本文縮写符号第10-11页
目录第11-14页
一、前言第14-21页
   ·转录因子的研究进展第14-15页
   ·CCAAT结合因子的研究进展第15页
   ·HAP转录因子的研究进展第15-18页
     ·HAP蛋白家族的种类第15-16页
     ·HAP蛋白和基因的分子结构第16-17页
     ·HAP蛋白的功能研究第17-18页
   ·GHBCP的研究进展第18-19页
   ·立题依据及研究意义第19-21页
二、材料与方法第21-40页
   ·实验材料第21-24页
     ·植物材料第21页
     ·菌种及质粒第21页
     ·化学试剂第21页
     ·工具酶第21页
     ·常用储液第21页
     ·常用缓冲液第21-22页
     ·培养基第22-23页
     ·棉花RNA的提取第23页
     ·酵母双杂交及双杂交试剂第23页
     ·PCR分析扩增试剂第23-24页
     ·DNA测序第24页
     ·仪器设备第24页
   ·实验方法第24-40页
     ·cDNA的分离第24页
     ·DNA和蛋白序列的分析第24-25页
     ·载体构建的方法第25-27页
     ·棉花基因组DNA的提取第27-28页
     ·基因全长的扩增第28页
     ·基因的表达分析第28-31页
     ·蛋白的亚细胞定位分析第31-35页
     ·酵母双杂交筛选棉花10d纤维的cDNA文库第35-39页
     ·重金属离子的胁迫处理下裂殖酵母(S.pombe)的生长状况分析第39-40页
三、实验结果第40-56页
   ·GhHAP5 cDNA的分离与鉴定第40页
   ·GhHAP5基因结构的分析第40页
   ·GhHAP5蛋白结构的分析第40-41页
   ·GhHAP5蛋白同源序列的分析第41-42页
   ·GhHAP5系统进化树分析第42-43页
   ·GhHAP5的组织表达分析第43-45页
     ·提取棉花不同组织的RNA第43-44页
     ·GhHAP5在棉花各组织中的表达第44-45页
   ·GhHAP5蛋白的亚细胞定位第45-46页
     ·PBI121-GhHAP5-GFP融合表达载体的构建第45页
     ·PBI121-GhHAP5-GFP融合表达载体转化农杆菌第45页
     ·PBI121-GhHAP5-eGFP转化的拟南芥在gDNA水平和RNA水平的鉴定第45-46页
     ·GhHAP5蛋白的亚细胞定位分析第46页
   ·GhHAP5互作蛋白的筛选第46-50页
     ·pGBKT7-GhHAP5表达载体的构建第47页
     ·pGBKT7-GhHAP5质粒转化酵母(Y187)的检测第47页
     ·pGBKT7-GhHAP5融合蛋白的自激活检测第47-48页
     ·毒性检测第48页
     ·棉花纤维的酵母双杂交cDNA文库的筛选第48-50页
     ·Mating效率的计算第50页
   ·GhBCP4的研究分析第50-54页
     ·重金属离子胁迫下GhBCP1/2/3/4的表达分析第50页
     ·GhBCP1/4转化的裂殖酵母提高了对重金属离子的耐受性第50-54页
   ·PMD-GhBCP4过量表达载体和PMD-GhBCP4RNAi载体的构建及其棉花转化第54-56页
     ·PMD-GhBCP4过量表达载体和PMD-GhBCP4RNAi载体的构建第54页
     ·将PMD-GhBCP4过量表达载体和PMD-GhBCP4RNAi载体转化农杆菌LBA4404第54页
     ·农杆菌介导的棉花的遗传转化第54-56页
四、讨论第56-60页
   ·GhHAP5的基因及其蛋白结果的分析第56页
   ·GhHAP5的表达及其调控第56页
   ·GhHAP5蛋白的亚细胞定位第56-57页
   ·GhHAP5的转录自激活分析第57页
   ·GhHAP5蛋白在植物发育中的功能第57页
   ·酵母双杂交的应用研究第57-58页
   ·GhHAP5蛋白相互作用蛋白的筛选第58-59页
   ·GhBCP可能参与了重金属离子的胁迫应答第59-60页
参考文献第60-65页
硕士期间发表的论文第65-66页
致谢第66页

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