| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-14页 |
| 一、前言 | 第14-21页 |
| ·植物应答低磷胁迫调节机理的研究进展 | 第15-20页 |
| ·WRKY家族 | 第15-16页 |
| ·SPY家族基因 | 第16-17页 |
| ·miRNA及其他非编码RNA序列在低磷信号传导种的作用 | 第17-19页 |
| ·MYB基因家族 | 第19-20页 |
| ·立题依据及本研究的意义 | 第20-21页 |
| 二、材料与方法 | 第21-39页 |
| ·实验材料 | 第21-24页 |
| ·植物材料 | 第21页 |
| ·菌种和质粒 | 第21页 |
| ·化学试剂及其它材料 | 第21页 |
| ·工具酶 | 第21页 |
| ·常用储存液 | 第21页 |
| ·常用缓冲液 | 第21-22页 |
| ·常用培养基 | 第22页 |
| ·Northern杂交所用试剂 | 第22-23页 |
| ·原核蛋白表达及纯化所用试剂及缓冲液 | 第23页 |
| ·EMSA实验所用试剂及缓冲液 | 第23-24页 |
| ·PCR分析扩增试剂 | 第24页 |
| ·DNA测序 | 第24页 |
| ·仪器设备 | 第24页 |
| ·实验方法 | 第24-39页 |
| ·油菜无菌苗的培养及材料收取 | 第24-25页 |
| ·油菜RNA的提取、纯化及逆转录反应 | 第25-26页 |
| ·从油菜的cDNA文库中分离基因 | 第26-27页 |
| ·分离基因的测序及序列比对 | 第27页 |
| ·对所得的目的基因进行序列分析 | 第27-28页 |
| ·表达分析 | 第28-29页 |
| ·拟南芥基因组DNA的提取及纯化 | 第29-30页 |
| ·BnPHR1基因DNA全长序列的分离克隆 | 第30-31页 |
| ·拟南芥的种植及农杆菌介导的遗传转化 | 第31-32页 |
| ·Genome Walker PCR方法调取BnPHR1启动子 | 第32页 |
| ·proBnPHR1：GUS融合表达载体的构建及拟南芥的遗传转化 | 第32-33页 |
| ·proBnPHR1：GUS转基因拟南芥的组织化学分析 | 第33页 |
| ·BnPHR1蛋白的转录激活分析 | 第33页 |
| ·pBI-BnPHR1：eGFP融合表达载体的构建及拟南芥的遗传转化 | 第33-34页 |
| ·phr1突变体的鉴定 | 第34页 |
| ·BnPHR1过量表达载体的构建及拟南芥的遗传转化 | 第34-35页 |
| ·pMAL-BnPHR1蛋白与BnPT2启动子相互作用的EMSA实验 | 第35-37页 |
| ·非变性聚丙烯酰胺凝胶检测蛋白 | 第37页 |
| ·双链DNA的合成 | 第37-39页 |
| 三、结果与分析 | 第39-59页 |
| ·BnPHR1基因的克隆 | 第39页 |
| ·油菜BnPHR1基因结构分析 | 第39-40页 |
| ·油菜BnPHR1蛋白序列分析 | 第40-41页 |
| ·BnPHR1基因的亚细胞定位及转录激活分析 | 第41-43页 |
| ·BnPHR1-eGFP融合表达载体的构建及拟南芥的遗传转化 | 第41-42页 |
| ·BnPHR1-eGFP融合蛋白的荧光观察 | 第42页 |
| ·油菜BnPHR1蛋白的转录激活功能分析 | 第42-43页 |
| ·油菜BnPHR1基因的组织表达分析 | 第43-44页 |
| ·BnPHR1基因的启动子分析 | 第44-46页 |
| ·pBI101：BnPHR1：GUS表达载体的构建及拟南芥的遗传转化 | 第44-45页 |
| ·BnPHR1基因的启动子组织化学分析 | 第45-46页 |
| ·拟南芥phr1突变体的鉴定 | 第46-47页 |
| ·BnPHR1过量表达转基因拟南芥低磷胁迫应答 | 第47-59页 |
| ·BnPHR1过量表达载体的构建及拟南芥的遗传转化 | 第47-48页 |
| ·BnPHR1过量表达转基因拟南芥的鉴定 | 第48-49页 |
| ·phr1突变体表型鉴定及表型回补 | 第49-50页 |
| ·BnPHR1过量表达参与植物低磷胁迫应答 | 第50-59页 |
| 四、讨论 | 第59-62页 |
| ·农杆菌介导的浸花法进行油菜的遗传转化 | 第59页 |
| ·BnPHR1基因及表达蛋白的结构分析 | 第59页 |
| ·BnPHR1回补拟南芥phr1缺失突变体表型分析 | 第59页 |
| ·BnPHR1蛋白的亚细胞定位分析 | 第59-60页 |
| ·低磷条件下BnPHR1启动子表达模式的改变分析 | 第60页 |
| ·BnPHR1参与调节植物体内磷饥饿应答基因的表达分析 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-66页 |
| 硕士期间参与发表的论文 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
