| 摘要 | 第1-13页 |
| Abstract | 第13-15页 |
| 第1章 前言 | 第15-36页 |
| ·2-DOS类氨基糖苷类抗生素的药理学性质 | 第16-17页 |
| ·2-DOS类氨基糖苷类抗生素应用中出现的问题 | 第17-18页 |
| ·耐药性问题 | 第17-18页 |
| ·毒副作用 | 第18页 |
| ·2-DOS类氨基糖苷类抗生素的化学结构改造 | 第18-20页 |
| ·C-3’,4’脱氧修饰 | 第18-19页 |
| ·1-N衍生化修饰 | 第19-20页 |
| ·氨基糖苷类抗生素生物合成的研究进展 | 第20-30页 |
| ·共同生物中间体的合成 | 第20-24页 |
| ·4,5-双取代2-DOS氨基糖苷类的生物合成 | 第24-26页 |
| ·妥布霉素的生物合成 | 第26-27页 |
| ·卡那霉素的生物合成 | 第27-28页 |
| ·庆大霉素的生物合成 | 第28-30页 |
| ·安普霉素的生物合成 | 第30页 |
| ·氨基糖苷类抗生素生物合成基因功能的研究方法 | 第30-32页 |
| ·基因阻断 | 第30-32页 |
| ·体外表达 | 第32页 |
| ·研究妥布霉素生物合成基因簇中aprD3和aprD4基因的立题意义 | 第32-36页 |
| ·研究的理论意义 | 第32-34页 |
| ·研究的应用价值 | 第34-36页 |
| 第2章 材料和方法 | 第36-47页 |
| ·试验材料 | 第36-40页 |
| ·菌种 | 第36页 |
| ·质粒 | 第36页 |
| ·试剂 | 第36-38页 |
| ·引物 | 第38页 |
| ·缓冲液 | 第38-39页 |
| ·培养基 | 第39-40页 |
| ·仪器 | 第40页 |
| ·实验方法 | 第40-47页 |
| ·大肠杆菌质粒DNA小量提取 | 第40-41页 |
| ·链霉菌总DNA的小量提取 | 第41页 |
| ·链霉菌总DNA的大量提取 | 第41页 |
| ·大肠杆菌DH 5α感受态细胞的制备 | 第41-42页 |
| ·DNA酶切与去磷酸化 | 第42页 |
| ·DNA连接 | 第42页 |
| ·DNA转化大肠杆菌 | 第42页 |
| ·DNA电泳和片断回收 | 第42页 |
| ·PCR反应 | 第42-43页 |
| ·接合转移试验 | 第43页 |
| ·Southem blot杂交 | 第43-45页 |
| ·黑暗链霉菌发酵培养及产物检测 | 第45页 |
| ·发酵产物的高效液相检测 | 第45页 |
| ·黑暗链霉菌发酵产物生物效价的测定 | 第45页 |
| ·氨甲酰卡那霉素B产量的HPLC测定 | 第45-46页 |
| ·发酵产物的分离纯化 | 第46页 |
| ·基因序列及蛋白序列功能分析 | 第46页 |
| ·进化树分析 | 第46-47页 |
| 第3章 aprD3阻断变株的获得及产物分析 | 第47-58页 |
| ·aprD3阻断变株的获得 | 第47-51页 |
| ·aprD3基因阻断质粒的构建 | 第47-49页 |
| ·接合转移实验 | 第49页 |
| ·单交换菌株的筛选 | 第49页 |
| ·双交换菌株的筛选 | 第49-51页 |
| ·aprD3阻断变株发酵产物的分离及结构鉴定 | 第51-54页 |
| ·aprD3全基因删除菌株的构建及产物分析 | 第54-55页 |
| ·讨论 | 第55-58页 |
| 第4章 aprD4阻断变株的获得及产物分析 | 第58-68页 |
| ·阻断载体的构建 | 第58-61页 |
| ·pNXP8的构建 | 第58-59页 |
| ·aprD4阻断载体的构建 | 第59-61页 |
| ·阻断变株产物结构分离纯化及结构鉴定 | 第61-63页 |
| ·aprD3及aprD4双阻断基因菌株的构建及产物分析 | 第63-66页 |
| ·讨论 | 第66-68页 |
| 第5章 卡那霉素B高产菌株的构建 | 第68-79页 |
| ·氨甲酰卡那霉素B高产菌株的构建 | 第68-73页 |
| ·卡那霉素B高产菌株的构建 | 第73-75页 |
| ·讨论 | 第75-79页 |
| 第6章 全文结论 | 第79-80页 |
| 参考文献 | 第80-86页 |
| 学位期间发表论文 | 第86-87页 |
| 致谢 | 第87-88页 |
| 附录 | 第88-96页 |