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水稻Xa7候选基因分析与功能验证

摘要第3-4页
ABSTRACT第4-5页
缩略表第8-9页
第一章 文献综述第9-22页
    1. 水稻白叶枯病的研究进展第9-14页
        1.1 病原物互作与植物寄主的遗传基础第9-12页
            1.1.1 植物与病原微生物间的互作第10页
            1.1.2 水稻白叶枯病原菌Xoo的侵染途径第10-11页
            1.1.3 黄单胞杆菌的主要分泌系统第11-12页
        1.2 白叶枯病菌的相关效应因子第12-14页
    2. 水稻的白叶枯病抗性基因第14-21页
        2.1 抗病基因Xa10、Xa23、Xa27第16-17页
        2.2 抗病基因xa13、xa25第17-18页
        2.3 抗病基因Xa3、Xa21第18-19页
        2.4 抗病基因Xa1、xa5第19-20页
        2.5 抗病基因Xa7第20-21页
    3. 研究意义与研究目的第21-22页
第二章 水稻抗白叶枯病基因Xa7的进一步精细定位第22-29页
    1. 前言第22页
    2. 材料与方法第22-24页
        2.1 材料第22页
        2.2 白叶枯病菌接种第22-23页
        2.3 DNA分子标记鉴定第23-24页
            2.3.1 植株进行DNA提取(SDS裂解法)第23页
            2.3.2 PCR反应体系及程序第23-24页
            2.3.3 电泳分析第24页
        2.4 高通量测序第24页
    3. 结果与分析第24-27页
        3.1 水稻品种镇恢084辐射诱变与感病突变体的筛选第24-25页
        3.2 利用PCR方法筛选定位区间染色体发生缺失的突变体第25-26页
        3.3 感病突变体ZM2的遗传分析第26页
        3.4 ZM2突变体基因组分析第26-27页
    4. 讨论第27-29页
第三章 Xa7候选基因的CRISPR/Cas9敲除分析第29-36页
    1. 前言第29页
    2. 材料与方法第29-33页
        2.1 材料第29页
        2.2 白叶枯病菌接种第29页
        2.3 表达分析的水稻材料取样第29页
        2.4 水稻RNA的提取和cDNA的合成第29-30页
        2.5 半定量RT-PCR第30页
        2.6 构建CRISPR/Cas9载体第30-31页
        2.7 水稻遗传转化第31-32页
        2.8 转基因苗鉴定第32-33页
            2.8.1 水稻基因组DNA的提取第32页
            2.8.2 PCR扩增与电泳第32页
            2.8.3 转基因水稻的白叶枯病抗病性鉴定第32-33页
    3. 结果分析第33-35页
        3.1 Xa7定位区间的候选基因预测分析第33页
        3.2 Xa7定位区间候选基因的表达分析第33-34页
        3.3 候选基因的CRISPR-Cas9系统敲除分析第34-35页
        3.4 转基因水稻的白叶枯病抗病性分析第35页
    4. 讨论第35-36页
第四章 Xa7候选基因的转基因功能互补验证第36-43页
    1. 前言第36页
    2. 材料与方法第36-38页
        2.1 材料第36页
        2.2 TAC文库构建与筛选第36-38页
            2.2.1 TAC文库的构建第36-37页
            2.2.2 TAC文库阳性克隆的筛选第37页
            2.2.3 Xa7的候选基因的亚克隆载体构建第37页
            2.2.4 TAC文库阳性克隆的提取质粒第37-38页
        2.3 农杆菌介导的水稻遗传转化第38页
        2.4 转基因阳性苗鉴定第38页
            2.4.1 水稻基因组DNA的提取第38页
            2.4.2 PCR扩增与电泳第38页
        2.5 对转基因水稻阳性植株抗病性鉴定第38页
    3. 结果分析第38-42页
        3.1 水稻IRBB7的TAC文库构建与阳性克隆转基因验证第38-40页
            3.1.1 IRBB7的TAC文库构建与筛选第38-40页
        3.2 Xa7候选基因转基因功能验证第40-42页
            3.2.1 水稻转基因第40页
            3.2.2 转基因株系的分子鉴定第40-42页
    4. 讨论第42-43页
参考文献第43-52页
攻读学位期间取得的研究成果第52-53页
致谢第53-55页

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