摘要 | 第3-4页 |
ABSTRACT | 第4-5页 |
缩略表 | 第8-9页 |
第一章 文献综述 | 第9-22页 |
1. 水稻白叶枯病的研究进展 | 第9-14页 |
1.1 病原物互作与植物寄主的遗传基础 | 第9-12页 |
1.1.1 植物与病原微生物间的互作 | 第10页 |
1.1.2 水稻白叶枯病原菌Xoo的侵染途径 | 第10-11页 |
1.1.3 黄单胞杆菌的主要分泌系统 | 第11-12页 |
1.2 白叶枯病菌的相关效应因子 | 第12-14页 |
2. 水稻的白叶枯病抗性基因 | 第14-21页 |
2.1 抗病基因Xa10、Xa23、Xa27 | 第16-17页 |
2.2 抗病基因xa13、xa25 | 第17-18页 |
2.3 抗病基因Xa3、Xa21 | 第18-19页 |
2.4 抗病基因Xa1、xa5 | 第19-20页 |
2.5 抗病基因Xa7 | 第20-21页 |
3. 研究意义与研究目的 | 第21-22页 |
第二章 水稻抗白叶枯病基因Xa7的进一步精细定位 | 第22-29页 |
1. 前言 | 第22页 |
2. 材料与方法 | 第22-24页 |
2.1 材料 | 第22页 |
2.2 白叶枯病菌接种 | 第22-23页 |
2.3 DNA分子标记鉴定 | 第23-24页 |
2.3.1 植株进行DNA提取(SDS裂解法) | 第23页 |
2.3.2 PCR反应体系及程序 | 第23-24页 |
2.3.3 电泳分析 | 第24页 |
2.4 高通量测序 | 第24页 |
3. 结果与分析 | 第24-27页 |
3.1 水稻品种镇恢084辐射诱变与感病突变体的筛选 | 第24-25页 |
3.2 利用PCR方法筛选定位区间染色体发生缺失的突变体 | 第25-26页 |
3.3 感病突变体ZM2的遗传分析 | 第26页 |
3.4 ZM2突变体基因组分析 | 第26-27页 |
4. 讨论 | 第27-29页 |
第三章 Xa7候选基因的CRISPR/Cas9敲除分析 | 第29-36页 |
1. 前言 | 第29页 |
2. 材料与方法 | 第29-33页 |
2.1 材料 | 第29页 |
2.2 白叶枯病菌接种 | 第29页 |
2.3 表达分析的水稻材料取样 | 第29页 |
2.4 水稻RNA的提取和cDNA的合成 | 第29-30页 |
2.5 半定量RT-PCR | 第30页 |
2.6 构建CRISPR/Cas9载体 | 第30-31页 |
2.7 水稻遗传转化 | 第31-32页 |
2.8 转基因苗鉴定 | 第32-33页 |
2.8.1 水稻基因组DNA的提取 | 第32页 |
2.8.2 PCR扩增与电泳 | 第32页 |
2.8.3 转基因水稻的白叶枯病抗病性鉴定 | 第32-33页 |
3. 结果分析 | 第33-35页 |
3.1 Xa7定位区间的候选基因预测分析 | 第33页 |
3.2 Xa7定位区间候选基因的表达分析 | 第33-34页 |
3.3 候选基因的CRISPR-Cas9系统敲除分析 | 第34-35页 |
3.4 转基因水稻的白叶枯病抗病性分析 | 第35页 |
4. 讨论 | 第35-36页 |
第四章 Xa7候选基因的转基因功能互补验证 | 第36-43页 |
1. 前言 | 第36页 |
2. 材料与方法 | 第36-38页 |
2.1 材料 | 第36页 |
2.2 TAC文库构建与筛选 | 第36-38页 |
2.2.1 TAC文库的构建 | 第36-37页 |
2.2.2 TAC文库阳性克隆的筛选 | 第37页 |
2.2.3 Xa7的候选基因的亚克隆载体构建 | 第37页 |
2.2.4 TAC文库阳性克隆的提取质粒 | 第37-38页 |
2.3 农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第38页 |
2.4 转基因阳性苗鉴定 | 第38页 |
2.4.1 水稻基因组DNA的提取 | 第38页 |
2.4.2 PCR扩增与电泳 | 第38页 |
2.5 对转基因水稻阳性植株抗病性鉴定 | 第38页 |
3. 结果分析 | 第38-42页 |
3.1 水稻IRBB7的TAC文库构建与阳性克隆转基因验证 | 第38-40页 |
3.1.1 IRBB7的TAC文库构建与筛选 | 第38-40页 |
3.2 Xa7候选基因转基因功能验证 | 第40-42页 |
3.2.1 水稻转基因 | 第40页 |
3.2.2 转基因株系的分子鉴定 | 第40-42页 |
4. 讨论 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-52页 |
攻读学位期间取得的研究成果 | 第52-53页 |
致谢 | 第53-55页 |