| 摘要 | 第2-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 引言 | 第9-10页 |
| 1 文献综述 | 第10-27页 |
| 1.1 几丁质 | 第10-12页 |
| 1.1.1 几丁质的分类 | 第10-11页 |
| 1.1.2 几丁质的降解 | 第11-12页 |
| 1.2 几丁质的代谢 | 第12-18页 |
| 1.2.1 几丁质代谢酶的分类 | 第12页 |
| 1.2.2 碳水化合物结合模块 | 第12页 |
| 1.2.3 糖苷水解酶 | 第12-14页 |
| 1.2.4 裂解性多糖单加氧酶 | 第14-18页 |
| 1.3 粘质沙雷氏菌裂解性多糖单加氧酶 | 第18-21页 |
| 1.3.1 几丁质结合蛋白21 | 第19页 |
| 1.3.2 几丁质结合蛋白21的结构特点 | 第19-20页 |
| 1.3.3 几丁质结合蛋白21的性质研究 | 第20-21页 |
| 1.4 昆虫裂解性多糖单加氧酶 | 第21-25页 |
| 1.4.1 昆虫裂解性多糖单加氧酶的序列特征 | 第22-23页 |
| 1.4.2 昆虫裂解性多糖单加氧酶的结构特点 | 第23-25页 |
| 1.4.3 昆虫裂解性多糖单加氧酶的活性分析 | 第25页 |
| 1.5 论文的选题依据与研究内容 | 第25-27页 |
| 1.5.1 选题依据 | 第25页 |
| 1.5.2 研究内容 | 第25-27页 |
| 2 昆虫裂解性多糖单加氧酶的表达模式分析 | 第27-41页 |
| 2.1 引言 | 第27页 |
| 2.2 实验材料与仪器 | 第27-28页 |
| 2.2.1 材料与试剂 | 第27-28页 |
| 2.2.2 主要仪器与耗材 | 第28页 |
| 2.3 实验方法 | 第28-32页 |
| 2.3.1 总RNA的提取 | 第28-29页 |
| 2.3.2 cDNA的合成 | 第29-30页 |
| 2.3.3 目的基因片段的获取 | 第30-31页 |
| 2.3.4 昆虫AA15基因及其编码氨基酸序列的分析 | 第31页 |
| 2.3.5 昆虫AA15基因发育时期表达特性检测 | 第31页 |
| 2.3.6 昆虫AA15基因组织表达特性检测 | 第31-32页 |
| 2.4 实验结果与讨论 | 第32-40页 |
| 2.4.1 昆虫AA15基因序列的获得 | 第32-33页 |
| 2.4.2 昆虫AA15基因多重序列比对分析 | 第33页 |
| 2.4.3 昆虫AA15基因的进化分析 | 第33-34页 |
| 2.4.4 昆虫AA15基因编码的保守氨基酸残基分析 | 第34-36页 |
| 2.4.5 昆虫AA15基因的组织表达特异性分析 | 第36-38页 |
| 2.4.6 昆虫AA15基因发育时期表达模式 | 第38-40页 |
| 2.5 小结 | 第40-41页 |
| 3 昆虫裂解性多糖单加氧酶的生理功能分析 | 第41-55页 |
| 3.1 引言 | 第41页 |
| 3.2 实验材料与仪器 | 第41-42页 |
| 3.2.1 材料与试剂 | 第41页 |
| 3.2.2 主要仪器与耗材 | 第41-42页 |
| 3.3 实验方法 | 第42-45页 |
| 3.3.1 用于dsRNA合成的模板DNA的制备 | 第42-43页 |
| 3.3.2 双链RNA的合成 | 第43-44页 |
| 3.3.3 双链RNA的体外注射及供试昆虫的喂养 | 第44页 |
| 3.3.4 RNA干扰水平检测及表型观察 | 第44-45页 |
| 3.3.5 HE染色切片观测及电镜显微观测 | 第45页 |
| 3.4 实验结果 | 第45-54页 |
| 3.4.1 模板DNA及dsRNA的合成 | 第45-46页 |
| 3.4.2 RNAi后供试昆虫的表型观察 | 第46-50页 |
| 3.4.3 dsRNA对LmAA15基因的干扰效率分析 | 第50-52页 |
| 3.4.4 HE染色切片观测及电镜显微观测 | 第52-54页 |
| 3.5 小结 | 第54-55页 |
| 4 昆虫裂解性多糖单加氧酶的重组表达、分离纯化与性质表征 | 第55-67页 |
| 4.1 引言 | 第55页 |
| 4.2 实验材料与仪器 | 第55-58页 |
| 4.2.1 材料与试剂 | 第55-56页 |
| 4.2.2 主要仪器及耗材 | 第56-58页 |
| 4.3 实验方法 | 第58-62页 |
| 4.3.1 昆虫裂解性多糖单加氧酶表达载体的构建 | 第58-59页 |
| 4.3.2 亚洲玉米螟OfAA15-I的诱导表达 | 第59-60页 |
| 4.3.3 亚洲玉米螟OfAA15-I的分离纯化 | 第60-61页 |
| 4.3.4 亚洲玉米螟OfAA15-I的纯度分析 | 第61页 |
| 4.3.5 亚洲玉米螟OfAA15-I催化活性的测定 | 第61-62页 |
| 4.4 实验结果 | 第62-66页 |
| 4.4.1 亚洲玉米螟OfAA15-I的重组及诱导表达 | 第62-64页 |
| 4.4.2 亚洲玉米螟OfAA15-I-pET50b的分离纯化 | 第64-65页 |
| 4.4.3 亚洲玉米螟OfAA15-I协同活性的测定 | 第65-66页 |
| 4.5 小结 | 第66-67页 |
| 结论 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-74页 |
| 展望 | 第74-75页 |
| 攻读硕士期间发表的学术论文情况 | 第75-76页 |
| 致谢 | 第76-78页 |
